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Questions and Answers
¿Qué características de las colonias de Clostridium difficile se observan en agar CCFA bajo luz ultravioleta?
¿Qué características de las colonias de Clostridium difficile se observan en agar CCFA bajo luz ultravioleta?
El olor que exhalan las colonias de Clostridium difficile es similar al de las heces de los caballos.
El olor que exhalan las colonias de Clostridium difficile es similar al de las heces de los caballos.
True
¿Cuánto tiempo se requiere para que crezcan las colonias de Clostridium difficile en agar CCFA?
¿Cuánto tiempo se requiere para que crezcan las colonias de Clostridium difficile en agar CCFA?
48 horas
Clostridium difficile es un organismo _____ positivo y forma esporas.
Clostridium difficile es un organismo _____ positivo y forma esporas.
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Asocia los tipos de cultivo o tinción con su característica principal:
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La temperatura óptima para el crecimiento de Clostridium difficile es:
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¿Cuál es la función principal del inmunoensayo enzimático (ELISA) en el proceso descrito?
¿Cuál es la función principal del inmunoensayo enzimático (ELISA) en el proceso descrito?
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El color verde en el resultado del test indica la presencia de toxinas de Clostridium difficile.
El color verde en el resultado del test indica la presencia de toxinas de Clostridium difficile.
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¿Qué se debe hacer con la muestra de heces antes de realizar el inmunoensayo?
¿Qué se debe hacer con la muestra de heces antes de realizar el inmunoensayo?
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La prueba de ELISA utiliza _________ específicos para detectar las toxinas A y B.
La prueba de ELISA utiliza _________ específicos para detectar las toxinas A y B.
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Asocia las partes del proceso con su descripción correspondiente:
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¿Qué se añade al pocillo después de lavar para continuar el proceso de ELISA?
¿Qué se añade al pocillo después de lavar para continuar el proceso de ELISA?
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¿Cuál de las siguientes especies de Clostridium causa botulismo?
¿Cuál de las siguientes especies de Clostridium causa botulismo?
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Clostridium difficile es un bacilo Gram negativo.
Clostridium difficile es un bacilo Gram negativo.
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¿Qué tipo de toxinas produce Clostridium difficile?
¿Qué tipo de toxinas produce Clostridium difficile?
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Clostridium difficile se transmite vía _____ porque se puede ingerir en su forma vegetativa o esporulada.
Clostridium difficile se transmite vía _____ porque se puede ingerir en su forma vegetativa o esporulada.
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¿Cuál es la función principal de la Toxina B de Clostridium difficile?
¿Cuál es la función principal de la Toxina B de Clostridium difficile?
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Asocia las siguientes especies de Clostridium con sus efectos clínicos:
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La formación de endosporas en Clostridium difficile le permite sobrevivir en ambientes hostiles.
La formación de endosporas en Clostridium difficile le permite sobrevivir en ambientes hostiles.
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Clostridium difficile es un _____ estricto, lo que significa que no puede crecer en presencia de oxígeno.
Clostridium difficile es un _____ estricto, lo que significa que no puede crecer en presencia de oxígeno.
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¿Cuál es el síntoma más común de la colitis pseudomembranosa?
¿Cuál es el síntoma más común de la colitis pseudomembranosa?
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La colitis pseudomembranosa se caracteriza por la formación de placas amarillentas en la mucosa del colon.
La colitis pseudomembranosa se caracteriza por la formación de placas amarillentas en la mucosa del colon.
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¿Qué dos toxinas principales produce Clostridium difficile al colonizar el intestino?
¿Qué dos toxinas principales produce Clostridium difficile al colonizar el intestino?
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Las muestras utilizadas para el diagnóstico de la infección pueden ser heces, biopsias ________ y superficie contaminadas.
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Asocia el tipo de prueba con su función:
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¿Qué efecto tienen las toxinas de Clostridium difficile en la mucosa intestinal?
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La deshidratación es un síntoma común de la colitis pseudomembranosa.
La deshidratación es un síntoma común de la colitis pseudomembranosa.
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¿Qué método diagnóstico se utiliza para demostrar la presencia de toxinas en muestras de heces?
¿Qué método diagnóstico se utiliza para demostrar la presencia de toxinas en muestras de heces?
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Clostridium difficile se germina en un entorno ________ y se transforma en su forma vegetativa.
Clostridium difficile se germina en un entorno ________ y se transforma en su forma vegetativa.
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Asocia el síntoma con su descripción:
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Study Notes
Clostridium Difficile Generalidades
- Género: Clostridium
- Especie: Existen más de 200, pero las de importancia clínica son:
- Clostridium botulinum (causa botulismo)
- Clostridium difficile (causa colitis pseudomembranosa)
- Clostridium perfringens (causa gangrena gaseosa)
- Clostridium septicum
- Clostridium tetani (causa tétanos)
Características de Clostridium difficile
- Bacilo Gram positivo (+)
- Anaerobio estricto
- Móvil, flagelos perítricos
- Formador de esporas, ovaladas y subterminales
- Se encuentra en el ambiente y como microbiota gastrointestinal
- Produce 2 citotoxinas que causan infección intestinal
Factores de Virulencia
- Toxina A: Enterotoxina
- Toxina B: Citotoxina
- Hialuronidasa: Enzima que produce actividad hidrolítica del ácido hialurónico
- Formación de endosporas: Permite la supervivencia durante meses en el medio hospitalario
Toxinas
-
Toxina A:
- Enterotoxina
- Aumenta la permeabilidad de la mucosa intestinal
- Produce inflamación intestinal por la liberación de citocinas proinflamatorias que causa quimiotaxis
-
Toxina B:
- Citotoxina
- Más potente que la toxina A
- Responsable de los síntomas más graves
- Induce la despolimerización de la actina, causando pérdida del citoesqueleto celular y apoptosis
- Puede llevar a necrosis y daño severo del tejido intestinal
Patogenia
- Se transmite vía fecal-oral, en forma vegetativa o esporulada
- La infección comienza al ingerir esporas que germinan en un entorno anaeróbico
- Al germinar, coloniza el colon y produce toxinas A y B
- Las toxinas provocan inflamación grave de la mucosa intestinal, dando lugar a la formación de seudomembranas en el colon
- Destrucción de la mucosa intestinal, alterando la absorción de líquidos y electrolitos, resultando en diarrea severa y desequilibrio electrolítico
Cuadro Clínico
- Diarrea asociada a antibióticos: es el síntoma más común, después del uso de antibióticos que alteran la microbiota intestinal
- Colitis pseudomembranosa: inflamación del colon caracterizada por la formación de placas amarillentas en la mucosa
Síntomas
- Diarrea acuosa, maloliente
- Cólicos y dolor abdominal
- Fiebre
- Náuseas
- Vómito
- Pérdida de apetito
- Pérdida de peso
- Deshidratación
Tipos de Muestras
- Heces
- Biopsias intestinales
- Colonoscopia
- Superficie contaminadas (esporas)
Diagnóstico
- Pruebas para detección de toxinas (ELISA, Ensayo citotoxicidad, GDH)
- Pruebas moleculares (PCR)
- Cultivo
Detección de Toxinas (Prueba rápida)
- Útil para la detección simultánea de Glutamato Deshidrogenasa (GDH), de Toxina A y B en muestras de heces
Inmunoensayo Enzimático (ELISA)
- Técnica que se basa en anticuerpos monoclonales para detectar directamente toxinas A y B en heces.
- Proceso: Se procesa la muestra para obtener las toxinas y se colocan en pocillos con anticuerpos específicos para toxinas A y B. Tras un periodo de incubación, se añaden anticuerpos marcados con enzimas, y luego un sustrato que permite medir la intensidad del color proporcional a la cantidad de toxina en la muestra.
Ensayo de Citotoxicidad
- Permite detectar la toxina B en heces, utilizando células Vero
- Proceso: Se centrifuga la muestra de heces para obtener el sobrenadante. El sobrenadante se inocula a las células Vero. Si la toxina B está presente, daña las células Vero.
Medios de Cultivo
- Agar sangre CDC: Para material fecal previamente tratado con alcohol al 50% por una hora o calor. Las colonias crecen después de 48 horas de incubación a 37°C
- Agar yema de huevo: Útil para material fecal previamente tratado. Los resultados son negativos para lecitinasa y lipasa.
- Agar CCFA (fructosa-cicloserina-cefoxitina): Las colonias crecen después de 48 horas de incubación a 30-37°C .Bajo luz ultravioleta, muestra fluorescencia amarilla verdosa.
Morfología de la colonia
- Agar sangre CDC: Coloias no hemolíticas. Grises translúcidas, de 2-4 mm de diámetro, ligeramente elevadas y con orillas filamentosas.
- Agar yema de huevo: Colonias blanquecinas y opacas con bordes irregulares.
- Agar CCFA: Colonias de 5-8 mm de diámetro, fluorescencia amarilla verdosa bajo luz ultravioleta.
- Otras: Bajo luz normal, son amarillentas y expelen un olor similar al de las heces de los caballos.
Tinción de Gram
- Útil para el examen directo del espécimen y la observación de las esporas.
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