Ujian Pengesanan Antibodi Darah

Ujian Penyaringan Darah 'Emergency O'

• Ujian 'Emergency O' merupakan ujian penyaringan darah untuk mengenal pasti sama ada seseorang itu mempunyai kumpulan darah O.

Ujian Pengesanan Streptolysin O

• Ujian mengesan kehadiran antibodi anti-streptolysin O (ASO) dalam serum.
• ASO dihasilkan oleh sistem imun sebagai tindak balas terhadap jangkitan kumpulan A streptokokus.
• Streptokokus kumpulan A menyebabkan penyakit seperti demam reumatik dan glomerulonefritis.

Sistem Penunjuk untuk Ujian Komplemen

• Sel darah merah kambing biri-biri yang disalut antibodi anti-sel darah kambing biri-biri digunakan sebagai sistem penunjuk.
• Komplemen boleh melisis sel-sel yang disalut dengan antibodi.
• Reaksi positif menunjukkan tiada hemolisis.
• Reaksi negatif menunjukkan hemolisis.

Ujian Hemolisin

• Ujian ini mengesan kehadiran antibodi dalam serum.
• Bahan ujian dicampur dengan antigen, kemudian ditambah dengan komplemen standard dan sel darah merah yang disalut antibodi.
• Diukur jumlah lisis sel darah merah yang berlaku.

Masalah Yang Dihadapi Dalam Ujian Pengesanan Antigen-Antibodi

• Fenomena Prozon - Nisbah antibodi lebih tinggi daripada antigen, menyebabkan tindak balas tidak dapat dikesan.
• Fenomena Post-Zone - Nisbah antigen lebih tinggi daripada antibodi, menyebabkan tindak balas tidak dapat dikesan.

Imunoessei

• Imunoessei ialah teknik makmal yang menggunakan antibodi yang dilabel untuk mengukur konsentrasi bahan tertentu dengan menggunakan tindak balas antigen-antibodi.

Jenis Imunoessei

• Enzim Imunoessei (EIA):
  • ELISA:
    • Indirect ELISA
    • Sandwich ELISA
    • Competitive ELISA
• Imunopendaflour:
  • Direct
  • Indirect
• Radioimunoessei (RIA):

Enzyme Linked Immunosorbent Assay (ELISA)

• Prinsip: Tindak balas antigen-antibodi dikesan melalui aktiviti enzim.
• Antibodi yang dikonjugasi dengan enzim digabungkan dengan kompleks antigen-antibodi.
• Substrate ditambah dan diubah oleh enzim, menyebabkan perubahan warna.
• Digunakan untuk mengesan antigen atau antibodi dalam spesimen pesakit.
• Menggunakan plat mikrotiter.

Single Radial Immunodiffusion

• Diameter zon presipitasi diukur dan dibandingkan dengan nilai standard untuk menentukan kuantiti antibodi dalam serum.
• Aplikasi: Mengukur kuantiti antibodi dalam serum.

Double Radial Immunodiffusion (Ouchterlony Method)

• Teknik ini digunakan untuk mengesan kewujudan antibodi dalam serum atau antigen dalam sediaan yang tidak diketahui.
• Menggunakan agar gel sebagai medium tindak balas.
• Serum pesakit dan larutan antigen dimasukkan ke dalam telaga yang ditebuk pada agar gel.
• Jalur-jalur presipitin terbentuk di tempat antigen-antibodi bertemu.
• Aplikasi: Mengesan antibodi atau subkelas-antibodi.

Immunoelektroforesis

• Digunakan untuk memisahkan dan mecirikan protein berdasarkan elektroforesis dan tindak balas dengan antibodi.
• Protein dalam serum atau plasma manusia dipisahkan menggunakan elektroforesis.
• Antibodi terhadap protein tersebut dimasukkan ke dalam telaga dan meresap ke arah pergerakan protein spesifik.
• Aplikasi: Analisis komponen serum pesakit (kualitatif), mengenalpasti imunoglobulin spesifik dalam serum, dan mengesan protein abnormal dalam kes multiple myeloma.

Presipitasi Dalam Larutan

• Banyak tiub diperlukan dengan pelbagai kepekatan antibodi dan antigen untuk mendapatkan garis presipitasi yang dapat dilihat.

Turbidometrik

• Kaedah untuk mengesan dan menguji kuantitatif tindak balas presipitasi dalam serum.
• Prinsip: Fenomena penyebaran cahaya yang disebabkan oleh presipitasi larutan.
• Sampel pesakit yang mengandungi antigen tertentu dieramkan dengan antigen berlabel.
• Antiserum yang mengandungi antibodi ditambah bersama-sama antigen.
• Kepekatan antigen dalam sampel ditentukan dengan membandingkan bilangan antigen berlabel yang bergabung dengan antibodi.

Perbezaan Antara ELISA, Imunopendaflour & Radioimunoessei

• ELISA: Menggunakan enzim sebagai label, memerlukan substrat, waktu analisis lebih lama, tidak bahaya.
• Imunopendaflour: Menggunakan bahan pendaflour sebagai label, tidak memerlukan substrat, waktu analisis lebih cepat daripada ELISA, tidak bahaya.
• Radioimunoessei: Menggunakan radioisotop sebagai label, tidak memerlukan substrat, waktu analisis sangat cepat, bahaya disebabkan radioisotop.

Kegunaan Lain Imunoessei

• Ujian kumpulan darah ABO (maju dan songsang)
• Ujian kehamilan air kencing (aglutinasi/ ELISA)
• Ujian Rapid Plasma Reagin (RPR/ VDRL)