Podcast
Questions and Answers
PCR nedir?
PCR nedir?
Polimeraz Zincir Reaksiyonu
PCR kim tarafından geliştirilmiştir?
PCR kim tarafından geliştirilmiştir?
Kary Mullis ve arkadaşları
PCR hangi alanlarda kullanılır?
PCR hangi alanlarda kullanılır?
PCR için gerekli reaktiflerden biri nedir?
PCR için gerekli reaktiflerden biri nedir?
Signup and view all the answers
PCR cihazının adı nedir?
PCR cihazının adı nedir?
Signup and view all the answers
Bir PCR döngüsü kaç aşamada gerçekleşir?
Bir PCR döngüsü kaç aşamada gerçekleşir?
Signup and view all the answers
PCR'nin başarılı olması için hedef DNA dizisinin bilinmesi gerekir mi?
PCR'nin başarılı olması için hedef DNA dizisinin bilinmesi gerekir mi?
Signup and view all the answers
PCR'nin bir avantajı nedir?
PCR'nin bir avantajı nedir?
Signup and view all the answers
PCR ürünlerinin saptanması için kullanılan bir teknik nedir?
PCR ürünlerinin saptanması için kullanılan bir teknik nedir?
Signup and view all the answers
Jel elektroforezinde DNA parçalarını boyaymak için hangi madde kullanılır?
Jel elektroforezinde DNA parçalarını boyaymak için hangi madde kullanılır?
Signup and view all the answers
Agaroz jel, sıcak suda çözünür.
Agaroz jel, sıcak suda çözünür.
Signup and view all the answers
Multipleks PCR (mPCR) ne anlama gelir?
Multipleks PCR (mPCR) ne anlama gelir?
Signup and view all the answers
Gerçek zamanlı PCR (qPCR) ne anlama gelir?
Gerçek zamanlı PCR (qPCR) ne anlama gelir?
Signup and view all the answers
Flashcards
PCR (Polimeraz Zincir Reaksiyonu)
PCR (Polimeraz Zincir Reaksiyonu)
Hedef bir DNA bölgesinin kısa sürede çoğaltılmasını sağlayan bir laboratuvar tekniğidir.
PCR Döngüsü
PCR Döngüsü
PCR cihazı, DNA'nın üç aşamada çoğaltılmasını sağlar: Denatürasyon, Bağlanma ve Uzama.
Denatürasyon Aşaması (PCR)
Denatürasyon Aşaması (PCR)
DNA zincirinin 90˚C gibi yüksek sıcaklıklarda iki ayrı tek zincirli hale ayrılmasıdır.
Bağlanma Aşaması (PCR)
Bağlanma Aşaması (PCR)
Signup and view all the flashcards
Uzama Aşaması (PCR)
Uzama Aşaması (PCR)
Signup and view all the flashcards
Taq DNA Polimeraz
Taq DNA Polimeraz
Signup and view all the flashcards
Denatürasyon
Denatürasyon
Signup and view all the flashcards
Bağlanma (PCR)
Bağlanma (PCR)
Signup and view all the flashcards
Uzama (PCR)
Uzama (PCR)
Signup and view all the flashcards
PCR'ın Başarısını Etkileyen Faktörler
PCR'ın Başarısını Etkileyen Faktörler
Signup and view all the flashcards
Jel Elektroforezi
Jel Elektroforezi
Signup and view all the flashcards
Agaroz Jel
Agaroz Jel
Signup and view all the flashcards
DNA Boyutu ve Jeldeki Hareket Hızı
DNA Boyutu ve Jeldeki Hareket Hızı
Signup and view all the flashcards
Etidyum Bromid (EtBr)
Etidyum Bromid (EtBr)
Signup and view all the flashcards
PCR Ürünlerinin Elektroforeze Tabi Tutulması
PCR Ürünlerinin Elektroforeze Tabi Tutulması
Signup and view all the flashcards
Çoklu Hedefli PCR
Çoklu Hedefli PCR
Signup and view all the flashcards
Gerçek Zamanlı PCR
Gerçek Zamanlı PCR
Signup and view all the flashcards
Floresan Problar (Gerçek Zamanlı PCR)
Floresan Problar (Gerçek Zamanlı PCR)
Signup and view all the flashcards
PCR'ın Uygulama Alanları
PCR'ın Uygulama Alanları
Signup and view all the flashcards
PCR Kullanımı: Genetik Hastalıkların Teşhisi
PCR Kullanımı: Genetik Hastalıkların Teşhisi
Signup and view all the flashcards
PCR Kullanımı: Prenatal Tanı
PCR Kullanımı: Prenatal Tanı
Signup and view all the flashcards
PCR Kullanımı: Enfeksiyonların Tespiti
PCR Kullanımı: Enfeksiyonların Tespiti
Signup and view all the flashcards
PCR Kullanımı: Forensik Tıp
PCR Kullanımı: Forensik Tıp
Signup and view all the flashcards
PCR Kullanımı: Tarım ve Gıda Sanayisi
PCR Kullanımı: Tarım ve Gıda Sanayisi
Signup and view all the flashcards
PCR Kullanımı: Evrimsel Çalışmalar
PCR Kullanımı: Evrimsel Çalışmalar
Signup and view all the flashcards
PCR'ın Evrensel Uygulaması
PCR'ın Evrensel Uygulaması
Signup and view all the flashcards
PCR'ın Hassasiyeti
PCR'ın Hassasiyeti
Signup and view all the flashcards
PCR'ın Önemi
PCR'ın Önemi
Signup and view all the flashcards
PCR ve Nobel Ödülü
PCR ve Nobel Ödülü
Signup and view all the flashcards
Study Notes
TIBBİ BİYOLOJİ: PCR VE KULLANIM ALANLARI
- PCR (Polimeraz Zincir Reaksiyonu), DNA'nın hedef bölgesini tüp içinde kısa sürede çoğaltan bir yöntemdir.
- Hücresel DNA replikasyonunun in vitro bir şeklidir.
- DNA'nın çeşitli türlerini (örneğin, fosil DNA'lar dahil) çoğaltmak için kullanılır.
- Kary Mullis ve arkadaşları tarafından 1985'te geliştirilmiştir.
- 1993 Nobel Kimya Ödülü'ne layık görülmüştür.
PCR'IN KULLANIM ALANLARI
- Temel Bilim: Genom haritalama, gen klonlama ve gen ekspresyonu
- Klinik: Genetik hastalıklarda hasta ve taşıyıcıların tanısı, prenatal tanı, viral ve bakteriyel patojenlerin doğrudan tanısı, antibiyotik direnç ve virülanlık genlerinin belirlenmesi.
- Adli Tıp: Cinayet yerlerinden alınan küçük kan, doku veya spermlerden elde edilen DNA'larla suçlu tespiti, babalık davalarının çözümü.
- Tarım ve Gıda Sanayii: Bitki ve hayvan ırklarının tanımlanması, GDO'lu ürünlerin tespiti.
- Evrimsel Çalışmalar: Fosil DNA'ların incelenmesi (örn., 40.000 yaşında bir mamutun DNA'sı çoğaltılmıştır).
PCR İLE İKİ PRIMER ARASINDA KALAN DNA BÖLGESİ ÇOĞALTILIR
- PCR amplifikasyonu için hedef DNA dizisinin bilinmesi gereklidir.
- Hedef bölgeye özgü 18-25 bazlık (oligonükleotid) primerler kullanılır.
- Primerler, genomdaki başka bir bölgeye bağlanmamalıdır.
PCR İÇİN GEREKLİ REAKTİFLER
- Isıya dayanıklı bir DNA polimeraz enzimi (Taq DNA polimeraz) kullanılır.
- Dört tip nükleotid (dNTP'ler: dATP, dCTP, dGTP ve dTTP) gereklidir.
- Primerler.
- MgCl2 (magnezyum klorür) reaksiyon için önemli bir ko-faktör işlevi görmektedir.
PCR İÇİN GEREKLİ CİHAZ
- Isı döngüsü (Thermal Cycler) veya PCR cihazı.
HER PCR DÖNGÜSÜ 3 BASAMAK İÇERİR
- Denatürasyon: Çift zincirli DNA 90-95°C'de tek zincirlere ayrıştırılır.
- Bağlanma: Primerler 50-60°C'de tek zincirli DNA'ya bağlanır.
- Uzama: Taq polimeraz enzimi, primerlere komşu nükleotidleri ekleyerek yeni DNA zincirlerini sentezler.
PCR CİHAZINDA BU 3 AŞAMANIN 30-35 KEZ TEKRARLANMASI İLE HEDEF DNA'NIN ÇOK SAYIDA KOPYASI ELDE EDİLİR.
- Bu, üstel olarak artan bir DNA kopyalama sağlar.
PCR REAKTİFLERİNİN ÖZELLİKLERİ (MİKTARI VE KALİTESİ)
- PCR döngüsü (ısı dereceleri ve süreler) doğru ayarlanmalıdır.
- Reaktiflerin kalitesi önemlidir.
- İnhibitörler ve kontaminasyonlar dikkatlice yönetilmelidir
PCR ÜRÜNÜ DNA'LARIN GÖRÜNTÜLENMESİ
- Ethidium bromid (EtBr) gibi florasan boyalar kullanılır.
- Agaroz jelde ayrışan DNA parçaları, UV ışığı altında görünür hale gelir.
PCR ÜRÜNÜ DNA BANTLARININ DEĞERLENDİRİLMESİ
- Ayırılan DNA bantlarının boyunun analiz edilmesi.
AGAROS JEL ELEKTROFOREZ YÖNTEMİ
- Elektroforez, negatif yüklü DNA'nın jel boyunca ayrışması için kullanılır.
- Agaroz jelin yoğunluğu, DNA'nın jelde ne kadar hızlı hareket ettiğine etki eder.
AGAROS JEL ELEKTROFOREZ EKİPMANI
- Jel hazırlama için kullanılan ekipman
AGAROS JELDE DNA PARÇALARININ AYRIMI
- Agaroz jel, DNA parçalarının büyüklüklerine göre ayrılmasını sağlar.
AGAROS
- Agaroz, kırmızı alglerden elde edilen bir polisakkariddir.
Multipleks PCR (mPCR)
- Birden fazla hedef DNA dizisinin aynı anda çoğaltılmasını sağlar.
Gerçek Zamanlı PCR (qPCR)
- DNA çoğaltma sırasında üretilen DNA miktarını gerçek zamanlı olarak ölçer.
- Eklenen floresan problar kullanılır.
- Jel elektroforezine gerek yoktur.
Studying That Suits You
Use AI to generate personalized quizzes and flashcards to suit your learning preferences.
Related Documents
Description
Bu quiz, Polimeraz Zincir Reaksiyonu (PCR) ve kullanım alanları hakkında bilgi edinmenizi sağlayacaktır. PCR'nın temel bilimden adli tıp ve tarıma kadar olan geniş uygulama yelpazesini keşfedeceksiniz. Ayrıca, PCR'nın gelişimi ve önemi konusunda da bilgiler yer alıyor.