Tècniques de Seqüenciació

Choose a study mode

Play Quiz
Study Flashcards
Spaced Repetition
Chat to Lesson

Podcast

Play an AI-generated podcast conversation about this lesson
Download our mobile app to listen on the go
Get App

Questions and Answers

Quina és una de les característiques dels mètodes de seqüenciació de segona generació (NGS) en comparació amb la seqüenciació de Sanger?

  • Utilitzen una mostra única de DNA
  • Són més cars per nuclèotid
  • Generen menys errors
  • Se seqüencien més ràpidament (correct)

Quin és el principal avantatge de permetre 'multiplexar' les mostres de DNA durant la seqüenciació NGS?

  • Permet analitzar diverses mostres alhora (correct)
  • Redueix la necessitat de controls de qualitat
  • Permet la seqüenciació de fragments més llargs
  • Incrementa la taxa d'errors en les lectures

Quina plataforma NGS és considerada la més estesa actualment?

  • Ion Torrent
  • HiSeq/MiSeq d'Illumina (correct)
  • SOLiD
  • 454 de Roche

Com es realitza la seqüenciació en la tecnologia HiSeq/MiSeq d'Illumina?

<p>Per síntesi amb nucleòtids marcats (D)</p> Signup and view all the answers

Quina és la longitud màxima dels fragments de DNA que poden ser seqüenciats amb les tècniques NGS d'Illumina?

<p>300 nucleòtids (B)</p> Signup and view all the answers

Quina és la funció dels fluoròfors en la seqüenciació per síntesi?

<p>Inhibir temporalment la síntesi del DNA (D)</p> Signup and view all the answers

Quin problema important s'ha de considerar en la seqüenciació NGS?

<p>L'augment en la taxa d'errors (D)</p> Signup and view all the answers

Quin tipus de sistema es fa servir per amplificar els fragments de DNA en la seqüenciació NGS?

<p>Amplificació per PCR (A)</p> Signup and view all the answers

Quines són les aplicacions de la seqüenciació de segona generació (NGS)?

<p>Seqüenciar genomes sencers (B), Anàlisi de mostres d'aigua (D)</p> Signup and view all the answers

Quina és una característica distintiva de la seqüenciació d'una sola molècula (SMRT)?

<p>És capaç de seqüenciar molècules úniques (B)</p> Signup and view all the answers

Quina és la finalitat principal de la 1a PCR en el procés d'anàlisi metagenòmica?

<p>Amplificar la regió V3 i V4 de les mostres (D)</p> Signup and view all the answers

Quin és l'objectiu del 'codi de barres' en el procés de PCR?

<p>Identificar cada mostra de manera única (B)</p> Signup and view all the answers

Quina limitació té la seqüenciació d'una sola molècula (PacBio) en comparació amb la segona generació?

<p>La taxa d'error és més alta (B)</p> Signup and view all the answers

Quina tècnica és utilitzada per seqüenciar metagenomes?

<p>Seqüenciació d'ADN ambiental (C)</p> Signup and view all the answers

Quina tècnica s'utilitza per validar els productes de PCR?

<p>Anàlisi per Bioanalyzer (D)</p> Signup and view all the answers

Quina fase del procés implica la neteja dels productes de PCR?

<p>Quantificació i normalització (A)</p> Signup and view all the answers

Quina de les següents tecnologies és considerada de tercera generació?

<p>PacBio (A)</p> Signup and view all the answers

Quina de les següents característiques és veritable sobre la seqüenciació basada en porus (Oxford Nanopore)?

<p>Permet la seqüenciació en temps real (B)</p> Signup and view all the answers

Quina és la funció de la 2a PCR coneguda com a Index PCR?

<p>Etiquetar les mostres amb codis únics (B)</p> Signup and view all the answers

Quin pas segueix immediatament després de la neteja dels productes de PCR?

<p>Quantificació (A)</p> Signup and view all the answers

Quina tècnica pot ser utilitzada per estudiar la variabilitat genètica en els organismes?

<p>Seqüenciació de genomes sencers (D)</p> Signup and view all the answers

Quina és una de les preocupacions amb la seqüenciació de tercera generació?

<p>Requereix l'ús de llibreries complexes (C)</p> Signup and view all the answers

Quina tècnica es fa servir per a la quantificació dels productes de PCR?

<p>Quantificació per PCR en temps real (B)</p> Signup and view all the answers

Quins criteris s'utilitzen durant la normalització dels productes de PCR?

<p>Equilibri entre les concentracions de diferents mostres (A)</p> Signup and view all the answers

Quina fases finalitzen el procés d'anàlisi abans de l'next gen sequencing?

<p>Normalització, quantificació i barreja (B)</p> Signup and view all the answers

Quina tècnica és utilitzada per analitzar différents amplicons relacionats amb malalties humanes?

<p>Anàlisi metagenòmica (A)</p> Signup and view all the answers

Quina és la longitud típica dels reads obtinguts amb la tècnica MiSeq mencionada?

<p>250 bp (D)</p> Signup and view all the answers

Quin és l'objectiu principal de l'anàlisi bioinformàtica en aquest context?

<p>Avaluar la qualitat de les lectures i fer alineament amb genomes coneguts (C)</p> Signup and view all the answers

Quina informació s'obté en analitzar els reads alineats amb genomes de referència?

<p>Identificació d'espècies bacterianes en una mostra complexa (B)</p> Signup and view all the answers

Quina tècnica de seqüenciació es caracteritza per una mida d'amplificació mitjana de 30.000 pb?

<p>PacBio (C)</p> Signup and view all the answers

Quins tipus de bacteris es poden identificar gràcies a les seqüències 16S?

<p>Gèneres i espècies variades (A)</p> Signup and view all the answers

Quina afirmació sobre la tercera generació de tècniques de seqüenciació és correcta?

<p>Permet seqüenciar metagenomes. (A)</p> Signup and view all the answers

Quina tècnica es va desenvolupar abans que la HiSeq i la Miseq d'Illumina?

<p>Sanger (B)</p> Signup and view all the answers

Quin és un dels avantatges de la tècnica de seqüenciació MinION?

<p>És un dispositiu portàtil. (C)</p> Signup and view all the answers

Quina és la principal aplicació de les tècniques de tercera generació?

<p>Seqüenciació de genomes complets. (C)</p> Signup and view all the answers

Quina afirmació és falsa sobre la seqüenciació d'RNA en la tercera generació?

<p>Requereix sempre la retrotrascripció a cDNA. (B)</p> Signup and view all the answers

Quina és la taxa d'error típica de les tècniques de tercera generació?

<p>Més alta que la primera generació. (C)</p> Signup and view all the answers

Quina és la primera etapa que es necessita en el procés de seqüenciació?

<p>Obtenció de DNA o RNA de bona qualitat (B)</p> Signup and view all the answers

Quina és la finalitat de l'anotació del genoma?

<p>Identificar les parts del DNA que codifiquen per a proteïnes (C)</p> Signup and view all the answers

Quina informació es pot obtenir d'un genome browser?

<p>Funcions possibles dels gens basades en similituds (B)</p> Signup and view all the answers

En l'anàlisi metagenòmica, quina és la principal finalitat?

<p>Identificar diferents espècies de microorganismes en mostres complexes (A)</p> Signup and view all the answers

Quina tècnica es pot utilitzar per investigar genomes de diferents organismes?

<p>Comparació de genomes a través de browser (B)</p> Signup and view all the answers

Quin organisme no té un genome browser conegut segons els exemples?

<p>E. coli (B)</p> Signup and view all the answers

Quin procés es realitza després d'assemblar el genoma?

<p>Identificació de gens i anotació del genoma (C)</p> Signup and view all the answers

Què implica la construcció de biblioteques en el context metagenòmic?

<p>Crear mostres complexes amb múltiples espècies (C)</p> Signup and view all the answers

Quina és una manera de buscar genome browsers per a diferents organismes?

<p>Cercant el nom de l'organisme seguit de 'genome browser' (A)</p> Signup and view all the answers

Flashcards

Anàlisi bioinformàtica de seqüències

Un procés bioinformàtic que analitza la qualitat de les seqüències obtingudes, alineant-les amb genomes de referència o seqüències 16S conegudes.

Identificació de bacteris

És el procediment que permet identificar els bacteris presents en una mostra complexa, a partir de l'anàlisi bioinformàtica de les seqüències del gen 16S.

Amplicó 1

És una seqüència d'ADN amb una longitud aproximada de 450 parells de bases, que s'utilitza per identificar bacteris.

Seqüències MiSeq 2x250 pair-end

Són fragments curts d'ADN que s'obtenen a partir de la seqüenciació de l'ADN, amb una longitud de 2x250 parells de bases.

Signup and view all the flashcards

Protocol d'anàlisi d'amplicons

S'utilitza per analitzar mostres que provenen de diferents individus, per exemple, en estudis de malalties humanes.

Signup and view all the flashcards

Seqüenciació de segona generació (NGS)

Mètodes de seqüenciació d'alt rendiment que seqüencien més ràpid i amb un cost menor per nuclèotid que Sanger.

Signup and view all the flashcards

Seqüenciació d'Illumina (HiSeq/MiSeq)

Una tècnica de NGS on la seqüenciació es realitza per síntesi, usant nucleòtids marcats amb fluoròfors que inhibeixen temporalment la síntesi del DNA.

Signup and view all the flashcards

Flow cell

Un suport sòlid on es realitza l'amplificació dels fragments de DNA en la seqüenciació d'Illumina.

Signup and view all the flashcards

Codi de barres

Un fragment de DNA curt i conegut que s'afegeix a les mostres de DNA abans de ser barrejat en una seqüenciació NGS per a identificar l'origen de cada seqüència.

Signup and view all the flashcards

Amplicons

Fragments curts de DNA que es seqüencien amb NGS.

Signup and view all the flashcards

Seqüenciació de Sanger

La tècnica de seqüenciació que va ser utilitzada abans de l'aparició de la seqüenciació de nova generació (NGS).

Signup and view all the flashcards

Multiplexar

És la capacitat de seqüenciar diverses mostres de DNA al mateix temps en una seqüenciació.

Signup and view all the flashcards

Seqüenciació del genoma complet

Una tecnologia de seqüenciació que s'utilitza per a caracteritzar els genomes complets.

Signup and view all the flashcards

Alineat de seqüències

El procés d'alinear seqüències d'ADN per identificar zones similars i diferents, i per obtenir informació sobre la relació entre les seqüències.

Signup and view all the flashcards

Anotació del Genoma

Després d'assemblar el genoma, cal identificar els gens i assignar-los funcions basades en similituds amb bases de dades conegudes. Aquest procés s'anomena anotació de genoma.

Signup and view all the flashcards

Seqüenciació de la següent generació (NGS)

Un tipus de seqüenciació d'àcid nucleic que fa servir la tecnologia de seqüenciació de la següent generació (NGS). Aquesta tecnologia permet seqüenciar genomes sencers, exomes, transcriptomes i epigenomes, tant en organismes individuals com en mostres complexes com ara metagenomes.

Signup and view all the flashcards

Navegadors de genomes

Bases de dades que contenen informació completa sobre els genomes d'organismes, permetent la visualització i anàlisi de les seqüències.

Signup and view all the flashcards

Llibreries de DNA

Un conjunt de seqüències d'ADN que representen el conjunt de gens o fragments d'ADN d'un organisme o d'una comunitat d'organismes. S'utilitzen en metagenòmica

Signup and view all the flashcards

Seqüenciació d'una sola molècula

Una tècnica de seqüenciació de l'ADN que utilitza molècules d'ADN individuals per evitar la necessitat d'amplificar la mostra d'ADN.

Signup and view all the flashcards

Metagenòmica

L'estudi de la composició genètica d'un conjunt de microorganismes en un entorn concret (com el sòl o l'aigua), permetent identificar els diferents tipus de microorganismes presents.

Signup and view all the flashcards

Seqüenciació de síntesi de cadena

Una tècnica de seqüenciació d'una sola molècula que usa una polimerasa per sintetitzar una nova cadena d'ADN, mentre es detecten els nucleòtids afegits.

Signup and view all the flashcards

Millora genètica

L'ús de la genòmica per millorar els cultius, per exemple, incrementant el rendiment o la resistència a les malalties.

Signup and view all the flashcards

Seqüenciació basada en porus

Una tècnica de seqüenciació d'una sola molècula basada en la detecció dels ions que flueixen a través d'un porus en una membrana.

Signup and view all the flashcards

Alineat de seqüències

Procés d'assemblar fragments d'ADN de petites mides en segments més grans, reconstruint un genoma complet.

Signup and view all the flashcards

PacBio

Un tipus de seqüenciació d'una sola molècula que consisteix en col·locar molècules d'ADN preparades en nanocavitats, on una polimerasa sintetitza la cadena d'ADN a mesura que es detecten els nucleòtids afegits.

Signup and view all the flashcards

Oxford Nanopore

Una tècnica de seqüenciació d'una sola molècula que fa servir un nanoporus per detectar els ions que flueixen a través d'un porus en una membrana quan una cadena d'ADN passa per ell.

Signup and view all the flashcards

Seqüenciació de nanopors 

Tècnica que permet seqüenciar l'ADN de forma ràpida i econòmica, usant nanopors, obrint noves possibilitats per a la investigació biològica .

Signup and view all the flashcards

Metagenòmica

La seqüenciació d'una mostra d'ADN per identificar i quantificar els microorganismes presents, sense necessitat de cultivar-los.

Signup and view all the flashcards

Transcriptomes

L'estudi de l'expressió gènica a través de la seqüenciació d'ARN.

Signup and view all the flashcards

Seqüenciació en temps real

Sequenciació que es realitza en un interval de temps real, en un temps curt.

Signup and view all the flashcards

Detecta modificacions epigenètiques

Tècnica de seqüenciació que permet detectar canvis epigenètics en el DNA.

Signup and view all the flashcards

Sequencia directament RNA

Tècnica de seqüenciació que permet seqüenciar directament l'RNA sense necessitat de convertir-lo en DNA.

Signup and view all the flashcards

És portàtil

Tècnica de seqüenciació que té una mida petita, per tant, és fàcil de transportar.

Signup and view all the flashcards

Seqüencia genomes complets

Tècnica de seqüenciació que es pot utilitzar per sequenciar genomes complets. Això significa que pot seqüenciar tot el material genètic d'un organisme.

Signup and view all the flashcards

Seqüencia metagenomes

Tècnica de seqüenciació que es pot utilitzar per sequenciar metagenomes. Això significa que pot sequenciar el DNA de diverses espècies que es troben en un mateix entorn.

Signup and view all the flashcards

Estudis d'epigenomes

Tècnica de seqüenciació que es pot utilitzar per estudiar epigenomes. Això significa que pot examinar les modificacions en el DNA que no afecten la seqüència de bases, però que sí que influeixen en l'expressió dels gens.

Signup and view all the flashcards

Anàlisis transcriptòmiques

Tècnica de seqüenciació que es pot utilitzar per fer anàlisis transcriptòmiques. Això significa que pot analitzar l'abundància de cada molècula d'RNA en una mostra.

Signup and view all the flashcards

1a PCR: Amplicon PCR

Un procés de PCR que amplifica una regió específica de l'ADN, en aquest cas, les regions V3 i V4 del gen 16S rRNA. Aquesta PCR s'aplica a cada mostra individual que volem analitzar.

Signup and view all the flashcards

2a PCR: Index PCR

Una reacció de PCR que afegeix un

Signup and view all the flashcards

Index PCR: Marcatge de mostres

Una ampliació de l'ADN d'una mostra, on s'usa un codi de barres únic per identificar a cada mostra. Després d'aquest procés, les mostres es poden barrejar.

Signup and view all the flashcards

Neteja de productes de PCR

Un procés per separar i purificar els productes de PCR, per exemple, amb un gel d'agarosa o un sistema de purificació d'ADN.

Signup and view all the flashcards

Validació amb Bioanalyzer

Es fa servir un 'Bioanalyzer' per a validar la qualitat i quantitat dels productes de PCR. Aquesta validació garanteix que l'ADN està preparat per a la seqüenciació.

Signup and view all the flashcards

Quantificació, normalització i combinació

Els productes de PCR es quantifiquen per determinar-ne la concentració. Després, s'ajusten les concentracions a un nivell uniforme en un procés de normalització, i les mostres es combinen en un grup de mostres total.

Signup and view all the flashcards

Anàlisi Metagenòmica

Aquest procés es basa en l'anàlisi dels genomes de microorganismes presents en una mostra, com el sòl, el fetge o la microbiota intestinal.

Signup and view all the flashcards

Construcció de llibreries

Aquest procés és un mètode per a amplificar i seqüenciar l'ADN d'un grup de mostres. L'objectiu és identificar i quantificar els microorganismes presents en cada mostra.

Signup and view all the flashcards

Seqüenciació d'ADN

Un procés per a sequenciar l'ADN d'un organisme, generalment seguint una sèrie d'etapes predefinides.

Signup and view all the flashcards

Study Notes

Tècniques de seqüenciació

  • La genòmica i la millora genètica estan relacionades amb la seqüenciació.
  • La informació genètica es guarda al DNA i RNA com a seqüència de nucleòtids.
  • La seqüenciació és el procés de lectura del codi genètic a partir de mostres biològiques.
  • El motlle és una mostra de DNA que es vol seqüenciar.
  • Els encebadors (primers) són fragments curts de DNA complementaris a una part del DNA motlle. Són necessaris per iniciar la seqüenciació.
  • La biblioteca és una barreja de diferents DNA motlles preparats per a seqüenciar.
  • La seqüència és l'ordre dels nucleòtids en una molècula de DNA.
  • La seqüenciació és determinar l'ordre dels nucleòtids en una mostra.
  • Una ronda de funcionament de la màquina de seqüenciació és un run.
  • La lectura (read) és el resultat d'un únic run, part o total del DNA motlle, i pot contenir errors.
  • L'error de seqüenciació és la diferència entre la seqüència obtinguda i la del DNA motlle.
  • El muntatge o ensamblatge (assembly) és agrupar la informació de totes les lectures per reconstruir la seqüència del genoma.
  • Hi ha tres generacions de seqüenciació, cadascuna amb característiques diferents.
  • La primera generació o seqüenciació de Sanger és la que té una menor taxa d'error. Sequenceja fragments de 1000 nucleòtids (bp) i s'acostuma a usar per seqüenciar 1 o 2 gens.
    • Necessa amplificar el DNA en bacteris o per PCR.
  • La segona generació o NGS (Next Generation Sequencing) és més ràpida i de menor cost per nucleòtid. Sequenceja fragments més curts de 150-300 bp i utilitza una tècnica de síntesi per determinar la seqüència.
  • La tercera generació o single molecule sequencing (SMRT) permet llegir fragments molt llargs (30.000 pb o 30 kb) i no necessita amplificació prèvia del DNA.
    • PacBio i MinION són exemples de tècniques de la tercera generació.
  • Per a la seqüenciació de genomes sencers o per reconstruir la informació de moltes seqüències es necessita un sistema d'alineament.
  • Per a obtenir el genoma complet, es construeix el muntatge o assembly, que connecta els fragments de la seqüència.
  • Un cop assemblat el genoma necessite identificar els gens.
  • Hi ha una sèrie de bases de dades de genomes (ex. Arabidopsis, Meló, etc.).
  • Podem analitzar espècies de microorganismes complexos mitjançant la construció de llibreries.

Studying That Suits You

Use AI to generate personalized quizzes and flashcards to suit your learning preferences.

Quiz Team

Related Documents

More Like This

Capillary DNA Analysis
40 questions

Capillary DNA Analysis

CompactConsonance avatar
CompactConsonance
Molecular Genetics and Linkage Analysis Quiz
48 questions
Use Quizgecko on...
Browser
Browser