Questions and Answers
¿Cuál es la fase móvil utilizada en la técnica HPLC?
¿Qué presión es necesaria para que los analitos pasen a través de la columna en HPLC?
¿Cuál es un factor que determina el tiempo de separación en HPLC?
¿Qué tipo de cromatografía se utiliza para analitos con tamaño molecular menor a 30 nm?
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¿Cuál de los siguientes componentes no forma parte del sistema HPLC?
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¿Qué tipo de cromatografía se usa para separar compuestos iónicos?
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¿Cuál es el rango típico de tiempo de separación en HPLC?
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¿Qué tipo de compuestos se caracteriza por tener una masa molecular mayor a 2000 en HPLC?
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¿Cuál es una desventaja de la bomba disipativa utilizada en HPLC?
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¿Qué caracteriza a una bomba de HPLC de tipo reciprocante?
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¿Cuál es el propósito principal del eliminador de polvo en el sistema de solventes?
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¿Qué tipo de bomba es más comúnmente utilizada en sistemas de HPLC?
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¿Qué función tiene el desgasificador en el sistema de solventes?
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El flujo y la velocidad constante en una bomba de HPLC son importantes para?
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¿Cuál de las siguientes es una propiedad importante de la fase móvil en un sistema HPLC?
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¿Qué efecto tiene el uso de un cambio continuo en los sistemas de elución?
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¿Cuál de las siguientes aplicaciones NO corresponde al HPLC?
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¿Cuál es el rango de trabajo del HPLC para muestras líquidas?
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Entre los siguientes compuestos, ¿cuál es un objetivo común para el análisis mediante HPLC?
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¿Qué tipo de contaminantes es el HPLC capaz de analizar en el agua?
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¿Qué tipo de muestras se pueden analizar en HPLC para determinar pesticidas?
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¿Cuál es la principal función de los compuestos fluorescentes en el análisis?
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¿Qué tipo de compuestos son ejemplos de fluorescentes?
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¿Cuál es el principio de funcionamiento del detector de dispersión de luz?
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¿Cuál es un límite de detección típico de un detector de dispersión de luz?
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¿Qué interfaz utiliza calefacción y nitrógeno para convertir el eluato en aerosol en espectrometría de masas?
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¿Cuál es la función del termovaporizador en un espectrómetro de masas?
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¿Cuál es una característica del detector de fluorescencia?
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¿Qué tipo de analitos puede detectar el detector de dispersión de luz?
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Cuáles son las longitudes de onda seleccionadas para el ácido salvianólico A y B?
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Qué compuesto se detectó a 326 nm según los espectros UV?
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¿Qué solvente se utilizó como fase móvil durante el experimento HPLC?
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Cuál de las siguientes aplicaciones no se menciona en relación con HPLC?
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Cuántos ácidos fenólicos se detectaron simultáneamente en la inyección de Danshen?
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Cuál es el objetivo principal de aplicar HPLC en la industria farmacéutica?
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Qué compuesto se menciona específicamente en la figura asociada a los espectros UV?
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Cuál es la longitud de onda para el Danshensu y el aldehído protocatecuico?
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Study Notes
Técnica HPLC
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- La fase móvil en la cromatografía líquida de alta resolución (HPLC) es un líquido que desempeña un papel fundamental en el proceso de separación de los analitos. Esta fase es crucial, ya que es el medio a través del cual los componentes de una mezcla se mueven y se separan a medida que fluyen por la columna cromatográfica.
- Los analitos, que son las sustancias o compuestos que se desean analizar, se disuelven en un solvente específico. Este solvente se somete a una presión extrema, que puede alcanzar hasta 400 atmósferas, facilitando así su movimiento eficiente a través de la columna. Esta alta presión es necesaria para mantener el flujo constante y para asegurar que los analitos se separen adecuadamente en función de sus propiedades químicas y físicas.
- El tiempo que se requiere para llevar a cabo la separación de los analitos varía considerablemente, oscilando entre 5 y 10 minutos en condiciones normales, aunque en algunos casos puede extenderse hasta varias horas o incluso días, dependiendo de la complejidad de la muestra y de las condiciones operativas de la HPLC.
Características de los Analitos
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Las macromoléculas, con una masa molecular superior a 2000, son de especial interés en diversas aplicaciones químicas y biológicas. La solubilidad de estas sustancias en solventes orgánicos es fundamental, ya que determina su comportamiento en diferentes entornos de reacción, así como su capacidad para ser purificadas y analizadas.
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En el campo de la nanomedicina y la nanotecnología, las distintas escalas de tamaños moleculares que van desde menos de 30 nanómetros (nm) hasta 400 nm son cruciales para el desarrollo de nuevos materiales y sistemas de entrega de fármacos, permitiendo un mejor control sobre sus propiedades físicas y químicas.
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Las técnicas cromatográficas como la cromatografía en fase reversa, el intercambio iónico y la exclusión molecular son métodos analíticos y de separación eficaces para purificar y caracterizar compuestos según su masa molecular y carga, garantizando la obtención de productos de alta pureza en la investigación y el desarrollo de fármacos.
Componentes del HPLC
- Sistema de solventes: permite la elución isocrática y el uso de filtros para eliminar el polvo.
- Sistema de bombeo: proporciona alta presión, esencial para el funcionamiento eficaz de la HPLC.
- Sistema de inyección de muestra y detector de datos: capturan y procesan las señales.
Sistema de Solventes
- Utiliza depósitos diversos para la fase móvil y un desgasificador para mantener la calidad de los solventes.
- Incluye un eliminador de polvo para evitar interferencias en la detección y daño al sistema de bombas.
Tipos de Bombas
- Bombas de alta presión: operan sobre 6000 psi para mantener el flujo adecuado.
- Bombas reciprocantes y de jeringa son las más comunes, cada una con ventajas y desventajas en cuanto a pulsos y capacidad.
Sistema de Inyectores y Detectores
- Detectores más sencillos usan luz ultravioleta y fuentes de excitación específicas para compuestos fluorescentes.
- El detector de dispersión de luz es prácticamente universal y responde a analitos menos volátiles que la fase móvil.
Acoplamiento HPLC-Espectrómetro de Masas
- Se utiliza una interfaz para eliminar solventes del eluato y vaporizar e ionizar analitos.
- Existen diversas interfaces, incluyendo termovaporizadores y opciones de ionización química.
Aplicaciones de HPLC
- Utilizado en la industria farmacéutica para el control y estabilización de drogas.
- Imprescindible para la separación de moléculas complejas y control de calidad en productos farmacéuticos.
- Otras aplicaciones incluyen análisis de contaminantes en aire y agua, identificación de narcóticos y análisis de pesticidas.
Usos del HPLC
- Ideal para investigación en química y bioquímica, y monitoreo de materiales de salud.
- También es efectivo en la purificación de compuestos químicos y análisis de alimentos.
- Rango de trabajo incluye muestras líquidas (𝛍g L-1 a mg L-1) y sólidas (𝛍g kg-1 a 𝛍g g-1).
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Description
Explora los conceptos fundamentales de la técnica de cromatografía líquida de alta presión (HPLC). Aprende sobre la fase móvil, el proceso de separación de analitos y los tiempos involucrados en este método. Ideal para estudiantes interesados en la química analítica y métodos de separación.
