TD5: La Microscopie Electronique
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Questions and Answers

Quel est l'objectif de la fixation d'un échantillon?

  • Rendre l'échantillon transparent
  • Augmenter le volume de l'échantillon
  • Conserver l'échantillon dans un état proche de l'état vivant (correct)
  • Déshydrater complètement l'échantillon
  • Quel solvant est utilisé pour remplacer l'eau durant la déshydratation dans la méthode de la microscopie électronique à transmission (MET)?

  • Métanol
  • Chloroforme
  • Éthanol
  • Acétone (correct)
  • Quel type de résine est utilisé pour l'inclusion dans MET?

  • Paraffine uniquement
  • Résine naturelle
  • Cire d'abeille
  • Résine synthétique (correct)
  • Quelle est l'épaisseur des coupes fines réalisées pour la MET?

    <p>3-10 µm</p> Signup and view all the answers

    Quelle technique est employée pour rendre certaines structures visibles dans la microscopie optique?

    <p>Coloration par fluorescence</p> Signup and view all the answers

    Quel type de contraste est créé par les sels de métaux lourds dans la MET?

    <p>Contraste chimique</p> Signup and view all the answers

    Quel est l'objectif principal de l'ombrage métallique?

    <p>Créer une impression de relief sur l'échantillon</p> Signup and view all the answers

    Quel est le rôle des acides phosphotungstiques dans la préparation des échantillons?

    <p>Ils permettent une observation brillante sur fond opaque</p> Signup and view all the answers

    Quelle méthode de déshydratation utilise la méthode physique désignée?

    <p>Congélation dans l'azote liquide</p> Signup and view all the answers

    Quelle technique utilise la méthode d’électronographie?

    <p>Coupe longitudinale</p> Signup and view all the answers

    Quel est le but principal de l'inclusion d'un échantillon dans un milieu solide?

    <p>Faciliter la coupe de l'échantillon</p> Signup and view all the answers

    Quel est l'effet des atomes de masse élevée associés aux structures cellulaires?

    <p>Ils augmentent le contraste lors de l'observation des cellules</p> Signup and view all the answers

    Dans la preparation d'échantillons pour la MET, quelle est la méthode de 'coloration' négative?

    <p>Le montage dans un liquide dense aux e-</p> Signup and view all the answers

    Quel est l'usage principal des électrons dans la microscopie électronique?

    <p>Pour obtenir une résolution supérieure à celle des photons</p> Signup and view all the answers

    Quelle est la résolution maximale d'un microscope électronique?

    <p>0,2 nm</p> Signup and view all the answers

    Quel composant est utilisé pour émettre des électrons dans un microscope électronique?

    <p>Filament de tungstène</p> Signup and view all the answers

    Quelle est la principale différence entre le microscope électronique à transmission (MET) et le microscope électronique à balayage (MEB)?

    <p>Le MET observe l'échantillon entier et le MEB observe uniquement la surface</p> Signup and view all the answers

    Pourquoi l'échantillon est-il émis sous vide dans un microscope électronique?

    <p>Pour éviter la déviation des électrons</p> Signup and view all the answers

    Quel est le grosissement maximum qu'un microscope électronique peut atteindre?

    <p>500 000x</p> Signup and view all the answers

    Dans quel but les images générées par un microscope électronique sont-elles observées?

    <p>Sur un écran</p> Signup and view all the answers

    Quelle étape est nécessaire pour préparer un échantillon pour la microscopie électronique?

    <p>Coloration</p> Signup and view all the answers

    Quel est le rôle des lentilles électromagnétiques dans un microscope électronique?

    <p>Focaliser les électrons sur l'échantillon</p> Signup and view all the answers

    Quel est l'effet de la métallisation de la surface de l'échantillon dans un MEB?

    <p>Augmenter la conductivité de l'échantillon</p> Signup and view all the answers

    Quelle est l'une des principales caractéristiques des images obtenues par MEB?

    <p>Images en 3D</p> Signup and view all the answers

    Pourquoi la fixation est-elle une étape cruciale dans la préparation des échantillons pour MET?

    <p>Pour préserver la structure cellulaire</p> Signup and view all the answers

    Quelle est la vitesse d'accélération des électrons dans un microscope électronique?

    <p>164 000 km/s</p> Signup and view all the answers

    Quel type d'échantillon est nécessaire pour la microscopie électronique à balayage?

    <p>Un échantillon recouvert d'une fine couche métallique</p> Signup and view all the answers

    Study Notes

    TD5: La Microscopie Electronique

    • La microscopie électronique utilise des électrons (dont la longueur d'onde est inférieure à celle du photon, 0,04 Å), permettant une plus haute résolution que la microscopie optique.
    • La résolution est de 0,1 à 0,2 nm, avec un grossissement allant de 200 000 à 500 000 fois.
    • Un canon à électrons émet des électrons à partir d'un filament de tungstène chauffé à haute température.
    • Les électrons sont accélérés par une anode à une tension de 164 000 km/s.
    • Le vide empêche les collisions des électrons avec les molécules d'air.
    • Les électrons sont focalisés par des lentilles électromagnétiques.
    • L'observation n'est pas directe, l'image étant projetée sur un écran.
    • On distingue deux types de microscopie électronique : à transmission (MET) et à balayage (MEB).

    Principe Généraux de la ME

    • La ME utilise des électrons au lieu de photons pour former une image.
    • La résolution est bien meilleure qu'avec la microscopie optique.
    • Le canon à électrons émet des électrons.
    • Les électrons sont focalisés par des lentilles électromagnétiques.
    • L'échantillon est éclairé par un faisceau d'électrons.
    • Les électrons traversent (ME à transmission) ou frappent (ME à balayage) l'échantillon.
    • Des différences de comportement des électrons selon les constituants de l'échantillon créent l'image.
    • L'image est projetée sur un écran fluorescent.

    Microscope Electronique à Transmission (MET)

    • Les électrons traversent l'échantillon.
    • L'échantillon doit être très fin pour que les électrons puissent le traverser.
    • L'image résultante montre l'organisation interne de l'échantillon.

    Microscope Electronique à Balayage (MEB)

    • Les électrons frappent la surface de l'échantillon.
    • L'échantillon doit être recouvert d'une couche de métal (or, platine).
    • L'image résultante montre la surface de l'échantillon à grande résolution.

    Préparation de l'échantillon pour l'observation en MET

    • Fixation: Pour préserver la structure de l'échantillon dans un état proche de l'état vivant, tout en le rendant imputrescible.
      • Méthodes physiques : Congélation;
      • Méthodes chimiques : Fixateurs comme le glutaraldéhyde et le tétraoxyde d'osmium.
    • Déshydratation: Remplacer l'eau par un solvant compatible avec le milieu d'inclusion.
      • Utilisation d'éthanol (MP) ou acétone (MET).
    • Inclusion: Durcir l'échantillon pour pouvoir le couper en fines sections.
      • Pour MP : Résultant sur un bloc de paraffine.
      • Pour MET : Utilisation de résines synthétiques comme l'époxyde ou le méthacrylate.
    • Coupes: Couper l'échantillon en sections très fines pour permettre le passage des photons ou électrons.
      • Pour MP : Microtome, coupes de 3 à 10 micromètres.
      • Pour MET : Ultramicrotome, coupes de 50 à 80 nanomètres.
    • Contrastes: Pour rendre visibles certaines structures.
      • MP : Coloration topographique, cytochimique ou fluorochromes.
      • MET : Utilisation de sels de métaux lourds pour augmenter le contraste, opaques aux électrons
    • Coloration/Ombrage (MET): Méthodes spécifiques pour mettre en évidence des structures spécifiques.
    • Ombrage métallique (directionnel): Une vaporisation d'atomes métalliques sur l'échantillon pour créer du relief.

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    Description

    Cette évaluation explore les principes de la microscopie électronique, y compris ses techniques de fonctionnement et ses applications. Vous apprendrez les différences entre la microscopie électronique à transmission et à balayage, ainsi que l'importance de la résolution et du vide dans le processus. Testez vos connaissances sur les détails techniques de cet instrument crucial en science moderne.

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