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Questions and Answers
Quel est l'objectif de la fixation d'un échantillon?
Quel est l'objectif de la fixation d'un échantillon?
- Rendre l'échantillon transparent
- Augmenter le volume de l'échantillon
- Conserver l'échantillon dans un état proche de l'état vivant (correct)
- Déshydrater complètement l'échantillon
Quel solvant est utilisé pour remplacer l'eau durant la déshydratation dans la méthode de la microscopie électronique à transmission (MET)?
Quel solvant est utilisé pour remplacer l'eau durant la déshydratation dans la méthode de la microscopie électronique à transmission (MET)?
- Métanol
- Chloroforme
- Éthanol
- Acétone (correct)
Quel type de résine est utilisé pour l'inclusion dans MET?
Quel type de résine est utilisé pour l'inclusion dans MET?
- Paraffine uniquement
- Résine naturelle
- Cire d'abeille
- Résine synthétique (correct)
Quelle est l'épaisseur des coupes fines réalisées pour la MET?
Quelle est l'épaisseur des coupes fines réalisées pour la MET?
Quelle technique est employée pour rendre certaines structures visibles dans la microscopie optique?
Quelle technique est employée pour rendre certaines structures visibles dans la microscopie optique?
Quel type de contraste est créé par les sels de métaux lourds dans la MET?
Quel type de contraste est créé par les sels de métaux lourds dans la MET?
Quel est l'objectif principal de l'ombrage métallique?
Quel est l'objectif principal de l'ombrage métallique?
Quel est le rôle des acides phosphotungstiques dans la préparation des échantillons?
Quel est le rôle des acides phosphotungstiques dans la préparation des échantillons?
Quelle méthode de déshydratation utilise la méthode physique désignée?
Quelle méthode de déshydratation utilise la méthode physique désignée?
Quelle technique utilise la méthode d’électronographie?
Quelle technique utilise la méthode d’électronographie?
Quel est le but principal de l'inclusion d'un échantillon dans un milieu solide?
Quel est le but principal de l'inclusion d'un échantillon dans un milieu solide?
Quel est l'effet des atomes de masse élevée associés aux structures cellulaires?
Quel est l'effet des atomes de masse élevée associés aux structures cellulaires?
Dans la preparation d'échantillons pour la MET, quelle est la méthode de 'coloration' négative?
Dans la preparation d'échantillons pour la MET, quelle est la méthode de 'coloration' négative?
Quel est l'usage principal des électrons dans la microscopie électronique?
Quel est l'usage principal des électrons dans la microscopie électronique?
Quelle est la résolution maximale d'un microscope électronique?
Quelle est la résolution maximale d'un microscope électronique?
Quel composant est utilisé pour émettre des électrons dans un microscope électronique?
Quel composant est utilisé pour émettre des électrons dans un microscope électronique?
Quelle est la principale différence entre le microscope électronique à transmission (MET) et le microscope électronique à balayage (MEB)?
Quelle est la principale différence entre le microscope électronique à transmission (MET) et le microscope électronique à balayage (MEB)?
Pourquoi l'échantillon est-il émis sous vide dans un microscope électronique?
Pourquoi l'échantillon est-il émis sous vide dans un microscope électronique?
Quel est le grosissement maximum qu'un microscope électronique peut atteindre?
Quel est le grosissement maximum qu'un microscope électronique peut atteindre?
Dans quel but les images générées par un microscope électronique sont-elles observées?
Dans quel but les images générées par un microscope électronique sont-elles observées?
Quelle étape est nécessaire pour préparer un échantillon pour la microscopie électronique?
Quelle étape est nécessaire pour préparer un échantillon pour la microscopie électronique?
Quel est le rôle des lentilles électromagnétiques dans un microscope électronique?
Quel est le rôle des lentilles électromagnétiques dans un microscope électronique?
Quel est l'effet de la métallisation de la surface de l'échantillon dans un MEB?
Quel est l'effet de la métallisation de la surface de l'échantillon dans un MEB?
Quelle est l'une des principales caractéristiques des images obtenues par MEB?
Quelle est l'une des principales caractéristiques des images obtenues par MEB?
Pourquoi la fixation est-elle une étape cruciale dans la préparation des échantillons pour MET?
Pourquoi la fixation est-elle une étape cruciale dans la préparation des échantillons pour MET?
Quelle est la vitesse d'accélération des électrons dans un microscope électronique?
Quelle est la vitesse d'accélération des électrons dans un microscope électronique?
Quel type d'échantillon est nécessaire pour la microscopie électronique à balayage?
Quel type d'échantillon est nécessaire pour la microscopie électronique à balayage?
Flashcards
Fixation
Fixation
Préserver l’échantillon en état quasi-vivant tout en l’empêchant de se décomposer.
Déshydratation
Déshydratation
Remplacer l’eau de l’échantillon par un solvant compatible avec le milieu d’inclusion.
Inclusion
Inclusion
Durcir et enrober l’échantillon dans un milieu solide pour le couper.
Coupes
Coupes
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Imprégnation de sels de métaux lourds
Imprégnation de sels de métaux lourds
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Coloration négative
Coloration négative
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Préparation d’échantillons pour l’observation microscopique
Préparation d’échantillons pour l’observation microscopique
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Contraste en microscopie électronique
Contraste en microscopie électronique
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Ombrage métallique
Ombrage métallique
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Ombrage par projection
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Microscopie électronique en transmission
Microscopie électronique en transmission
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Microscopie électronique à balayage
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Microscopie optique
Microscopie optique
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Microscopie électronique à transmission tridimensionnelle
Microscopie électronique à transmission tridimensionnelle
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Techniques de microscopie électronique
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Microscopie électronique
Microscopie électronique
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Résolution
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Grossissement
Grossissement
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Canon à électrons
Canon à électrons
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Cathode
Cathode
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Cylindre de Wehnelt
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Anode
Anode
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Pompe à vide
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Lentilles électromagnétiques
Lentilles électromagnétiques
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Microscope électronique à transmission (MET)
Microscope électronique à transmission (MET)
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Microscope électronique à balayage (MEB)
Microscope électronique à balayage (MEB)
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Faisceau focalisé en 1 point de l’échantillon
Faisceau focalisé en 1 point de l’échantillon
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Balayage du faisceau sur toute la surface de l’échantillon
Balayage du faisceau sur toute la surface de l’échantillon
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Cartographie de la zone balayée
Cartographie de la zone balayée
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Image pseudo 3D
Image pseudo 3D
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Study Notes
TD5: La Microscopie Electronique
- La microscopie électronique utilise des électrons (dont la longueur d'onde est inférieure à celle du photon, 0,04 Å), permettant une plus haute résolution que la microscopie optique.
- La résolution est de 0,1 à 0,2 nm, avec un grossissement allant de 200 000 à 500 000 fois.
- Un canon à électrons émet des électrons à partir d'un filament de tungstène chauffé à haute température.
- Les électrons sont accélérés par une anode à une tension de 164 000 km/s.
- Le vide empêche les collisions des électrons avec les molécules d'air.
- Les électrons sont focalisés par des lentilles électromagnétiques.
- L'observation n'est pas directe, l'image étant projetée sur un écran.
- On distingue deux types de microscopie électronique : à transmission (MET) et à balayage (MEB).
Principe Généraux de la ME
- La ME utilise des électrons au lieu de photons pour former une image.
- La résolution est bien meilleure qu'avec la microscopie optique.
- Le canon à électrons émet des électrons.
- Les électrons sont focalisés par des lentilles électromagnétiques.
- L'échantillon est éclairé par un faisceau d'électrons.
- Les électrons traversent (ME à transmission) ou frappent (ME à balayage) l'échantillon.
- Des différences de comportement des électrons selon les constituants de l'échantillon créent l'image.
- L'image est projetée sur un écran fluorescent.
Microscope Electronique à Transmission (MET)
- Les électrons traversent l'échantillon.
- L'échantillon doit être très fin pour que les électrons puissent le traverser.
- L'image résultante montre l'organisation interne de l'échantillon.
Microscope Electronique à Balayage (MEB)
- Les électrons frappent la surface de l'échantillon.
- L'échantillon doit être recouvert d'une couche de métal (or, platine).
- L'image résultante montre la surface de l'échantillon à grande résolution.
Préparation de l'échantillon pour l'observation en MET
- Fixation: Pour préserver la structure de l'échantillon dans un état proche de l'état vivant, tout en le rendant imputrescible.
- Méthodes physiques : Congélation;
- Méthodes chimiques : Fixateurs comme le glutaraldéhyde et le tétraoxyde d'osmium.
- Déshydratation: Remplacer l'eau par un solvant compatible avec le milieu d'inclusion.
- Utilisation d'éthanol (MP) ou acétone (MET).
- Inclusion: Durcir l'échantillon pour pouvoir le couper en fines sections.
- Pour MP : Résultant sur un bloc de paraffine.
- Pour MET : Utilisation de résines synthétiques comme l'époxyde ou le méthacrylate.
- Coupes: Couper l'échantillon en sections très fines pour permettre le passage des photons ou électrons.
- Pour MP : Microtome, coupes de 3 à 10 micromètres.
- Pour MET : Ultramicrotome, coupes de 50 à 80 nanomètres.
- Contrastes: Pour rendre visibles certaines structures.
- MP : Coloration topographique, cytochimique ou fluorochromes.
- MET : Utilisation de sels de métaux lourds pour augmenter le contraste, opaques aux électrons
- Coloration/Ombrage (MET): Méthodes spécifiques pour mettre en évidence des structures spécifiques.
- Ombrage métallique (directionnel): Une vaporisation d'atomes métalliques sur l'échantillon pour créer du relief.
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