Sérologické metody
84 Questions
0 Views

Choose a study mode

Play Quiz
Study Flashcards
Spaced Repetition
Chat to lesson

Podcast

Play an AI-generated podcast conversation about this lesson

Questions and Answers

Jaká je charakteristika IgG protilátek v průběhu onemocnění?

  • Jsou vždy přítomny při každé infekci.
  • Přetrvávají velmi dlouho a mají pozvolný nástup. (correct)
  • Mají vrcholné hodnoty po týdnu.
  • Objevují se rychle po začátku onemocnění.

    • Co určuje senzitivitu laboratorního testu?

  • Pravděpodobnost pozitivního výsledku u zdravých pacientů.
  • Míra falešně negativních výsledků.
  • Schopnost testu odhalit zdravé jedince.
  • Správný záchyt nemocných pacientů. (correct)

    • Jaké je vyjádření výsledků pomocí indexu pozitivity (IP)?

  • IP je bezrozměrné číslo bez jakékoliv interpretace.
  • IP mezi 0,9 a 1,1 označuje hraniční výsledek. (correct)
  • IP menší než 0,5 znamená pozitivní výsledek.
  • IP větší než 1,0 je vždy negativní.

    • Co způsobuje zvýšení senzitivity testu?

    <p>Zvyšuje se pravděpodobnost falešně pozitivních výsledků.</p> Signup and view all the answers

    Jaký je správný postup při interpretaci laboratorních nálezů?

    <p>Je nutné výsledky porovnat s klinickým stavem pacienta.</p> Signup and view all the answers

    Co zahrnuje první fáze sérologické reakce?

    <p>Specifickou vazbu mezi antigenem a protilátkou.</p> Signup and view all the answers

    Jaký je cíl sérologických metod v mikrobiologické diagnostice?

    <p>Přímý nebo nepřímý průkaz antigenů nebo protilátek.</p> Signup and view all the answers

    Která metoda není považována za sérologickou?

    <p>Polymerázová řetězová reakce (PCR)</p> Signup and view all the answers

    Jaké protilátky jsou odpovědné za rychlou vazbu během specifické fáze sérologické reakce?

    <p>IgM pentamery.</p> Signup and view all the answers

    Jaký typ antigenu představují korpuskulární antigeny?

    <p>Nerozpustné částice vyplývající z celých bakterií.</p> Signup and view all the answers

    Která z následujících metod se používá pro přímý průkaz agens?

    <p>Imunochromatografie</p> Signup and view all the answers

    Jaký je princip reakce se značenými složkami?

    <p>Značené složky pomáhají vizualizovat vazbu na protilátky.</p> Signup and view all the answers

    Co je klíčovým rysem nespecifické fáze sérologické reakce?

    <p>Možnost měření reakce pomocí analyzátorů.</p> Signup and view all the answers

    Jaká je základní vlastnost DNA, která umožňuje její stabilitu?

    <p>Komplementární párování bazí</p> Signup and view all the answers

    Jaký je výsledek denaturace DNA?

    <p>Rozdělení dsDNA na 2 ssDNA</p> Signup and view all the answers

    Jakým směrem je syntetizována DNA?

    <p>5' → 3'</p> Signup and view all the answers

    Jaký je hlavní účel PCR v mikrobiologické diagnostice?

    <p>Replikace DNA pro její amplifikaci</p> Signup and view all the answers

    Který proces přenáší informaci z DNA na RNA?

    <p>Transkripce</p> Signup and view all the answers

    Co je nutné pro správnou hybridizaci v hybridizačních metodách?

    <p>Specifická sonda pro daný druh mikroba</p> Signup and view all the answers

    Jaký typ bází se nachází v RNA místo thyminu?

    <p>Uracil</p> Signup and view all the answers

    Který z následujících procesů není krokem centrálního dogmatu molekulární biologie?

    <p>Mutace</p> Signup and view all the answers

    Jaká je role DNA polymerázy v procesu prodlužování DNA?

    <p>Syntetizuje nový DNA řetězec</p> Signup and view all the answers

    Jaký je první krok v PCR procesu?

    <p>Denaturace</p> Signup and view all the answers

    Co znamená zkratka Ct v kontextu PCR?

    <p>Cyklus prahu fluorescence</p> Signup and view all the answers

    Která teplota je typická pro připojení primerů v PCR?

    <p>50–65°C</p> Signup and view all the answers

    Jaký je účel DNA polymerázy během PCR?

    <p>Syntéza nového vlákna DNA</p> Signup and view all the answers

    Co se používá k detekci RNA při RT PCR?

    <p>Reverzní transkriptáza</p> Signup and view all the answers

    Jaký typ kvantifikace je real-time PCR?

    <p>Kvantifikace relativní</p> Signup and view all the answers

    Jaký produkt se obvykle prokazuje po amplifikaci PCR?

    <p>Amplikony</p> Signup and view all the answers

    Co je cílem procesu elongace během PCR?

    <p>Syntetizovat nové vlákno DNA</p> Signup and view all the answers

    Co představuje standardní křivka v kontextu kvantifikace PCR?

    <p>Počet kopií nukleových kyselin</p> Signup and view all the answers

    Jaký je hlavní účel neutralizační reakce v bakteriologii?

    <p>Zabranění hemolytickému účinku hemolyzinu</p> Signup and view all the answers

    Jaké značení se používá v imunoenzymatických technikách EIA?

    <p>Enzymy</p> Signup and view all the answers

    Co je výsledným produktem konjugátu v reakcích se značenými složkami?

    <p>Složka značení + protilátka</p> Signup and view all the answers

    Jaký test se používá pro průkaz antistreptolyzinu O?

    <p>ASLO</p> Signup and view all the answers

    Jaká metoda se používá pro přímou detekci antigenu pomocí imunofluorescence?

    <p>Přímá fluorescence</p> Signup and view all the answers

    Jaký je princip hemaglutinačně inhibičního testu (HIT)?

    <p>Inhibice hemaglutinační aktivity viru protilátkami</p> Signup and view all the answers

    Jaký je účel imunofluorescenčního mikroskopu?

    <p>Odečet fluorescenčních signálů</p> Signup and view all the answers

    Jaká metoda se používá k zastavení reakce v imunoenzymatických testech?

    <p>Přidání silné kyseliny</p> Signup and view all the answers

    Jak se zjistí přítomnost specifických tříd Ig v průkazech?

    <p>Vícesložkovou reakcí</p> Signup and view all the answers

    Jaký je kdysi zmiňovaný test používaný pro určení viru Herpes simplex typu 1?

    <p>Imunofluorescenční test</p> Signup and view all the answers

    Co popisuje pojem titr protilátek?

    <p>Množství protilátek v séru pacienta</p> Signup and view all the answers

    Jaký faktor ovlivňuje výsledek sérologické reakce?

    <p>Typ vyšetřovaného vzorku</p> Signup and view all the answers

    Co označuje termín specifita reakce?

    <p>Míru pravděpodobnosti falešně pozitivních výsledků</p> Signup and view all the answers

    Jaký je hlavní rozdíl mezi přímou a nepřímou diagnostikou infekčních onemocnění?

    <p>Přímá diagnostika určuje přítomnost mikroba, nepřímá měří protilátky</p> Signup and view all the answers

    Co znamená sérokonverze v kontextu infekčního agens?

    <p>Zvýšení titru protilátek po infekci</p> Signup and view all the answers

    Jaký výsledek je považován za negativní v imunochromatografickém testu?

    <p>Žádný proužek v testovací linii a proužek v kontrolní linii</p> Signup and view all the answers

    Co je klíčovým prvkem při hodnocení pozitivního výsledku v imunochromatografickém testu?

    <p>Vytvoření proužku v testovací linii</p> Signup and view all the answers

    Jaký proces je základní součástí komplement fixační reakce (KFR)?

    <p>Vytváření komplexu Ag s Ab</p> Signup and view all the answers

    Jaké složení reakce je nezbytné pro úspěšné provedení KFR?

    <p>Optimální množství antigenu</p> Signup and view all the answers

    Jaký je hlavní účel použití indikátoru v KFR?

    <p>Vizualizace pozitivních výsledků</p> Signup and view all the answers

    Jaké je doporučené zacházení s komplementem v KFR?

    <p>Udržovat v lednici po ředění</p> Signup and view all the answers

    Jaký krok následuje po vázání komplementu na komplex Ag s Ab?

    <p>Vizualizace reakce</p> Signup and view all the answers

    Jakou vlastnost musí mít testované sérum v KFR?

    <p>Nemělo by být hemolytické ani chylózní</p> Signup and view all the answers

    Jaký je hlavní problém při používání molekulárních testů v mikrobiologické diagnostice?

    <p>Příliš vysoké náklady na testy</p> Signup and view all the answers

    Jaký typ cukru se nachází v RNA?

    <p>Ribóza</p> Signup and view all the answers

    Jaký je výsledek procesu denaturace DNA?

    <p>Úplné rozdělení dsDNA na 2 ssDNA</p> Signup and view all the answers

    Jak se nazývá proces, který přenáší informaci z RNA do syntézy bílkovin?

    <p>Translace</p> Signup and view all the answers

    Jakým způsobem se DNA syntetizuje podle polaritních konců?

    <p>Od 5' do 3'</p> Signup and view all the answers

    Co se používá jako sonda v hybridizačních metodách?

    <p>Označený úsek DNA specifické pro daný druh</p> Signup and view all the answers

    Jaký je hlavní účel amplifikačních metod v mikrobiologické diagnostice?

    <p>Zvětšit množství DNA ve vzorku</p> Signup and view all the answers

    Jak jsou uspořádány dusíkaté báze v DNA?

    <p>Komplementárně k sobě navzájem</p> Signup and view all the answers

    Který z následujících procesů není součástí centrálního dogmatu molekulární biologie?

    <p>Hybridizace</p> Signup and view all the answers

    Jaký je typický prvek, který se nachází na povrchu nukleové kyseliny?

    <p>Záporný náboj</p> Signup and view all the answers

    Jaká je hlavní diferenciační vlastnost přímé ELISA?

    <p>Detekce antigenu</p> Signup and view all the answers

    Jaký je princip nepřímé ELISA?

    <p>Detekce specifických protilátek v séru</p> Signup and view all the answers

    Co znamená 'sendvičová ELISA'?

    <p>Ag je umístěn mezi dvěma protilátkami</p> Signup and view all the answers

    Co je hlavním účelem metody Elispot?

    <p>Kvantifikace jednotlivých buněk produkujících cytokiny</p> Signup and view all the answers

    Jaký je princip imunoblot (Western blot)?

    <p>Oddělení proteinů na gelu podle jejich velikosti</p> Signup and view all the answers

    Jaká je role kontrolních sér v testech ELISA?

    <p>Ověření specifity testu</p> Signup and view all the answers

    Co je znamená termín '1 reagující buňka = 1 spot' v Elispot metodě?

    <p>Každá buňka produkuje jeden viditelný bod</p> Signup and view all the answers

    Jak se liší přímá sendvičová ELISA od nepřímé sendvičové ELISA?

    <p>Nepřímá metoda zahrnuje protilátky proti antigenům</p> Signup and view all the answers

    Jaká je nevýhoda přípravy jednotlivých vyčištěných antigenů pro imunoblot?

    <p>Je finančně náročná</p> Signup and view all the answers

    Jaký je hlavní účel metody detekce pomocí ELISA?

    <p>Detekce a kvantifikace antigenů nebo protilátek</p> Signup and view all the answers

    Jaký typ nukleotidu způsobuje terminaci syntézy během sekvenování?

    <p>Dideoxynukleotid</p> Signup and view all the answers

    Jaká je maximální délka sekvence, kterou lze určit v jedné sekvenační reakci?

    <p>400-900 nukleotidů</p> Signup and view all the answers

    Která metoda se používá ke stanovení pozice nukleotidu v sekvenčním vlákne?

    <p>Kapilární elektroforéza</p> Signup and view all the answers

    K čemu se využívají sekvenační techniky v mikrobiologii?

    <p>Pro identifikaci mikroorganismů</p> Signup and view all the answers

    Jakým způsobem jsou nukleotidy označeny při sekvenování?

    <p>Fluorescenčními barvami</p> Signup and view all the answers

    Co je cílem sekvenace genomu mikroorganismů?

    <p>Popis genomu</p> Signup and view all the answers

    Jaké informace lze získat při analýze sekvenace v epidemiologii?

    <p>O genetické variabilitě kmenů</p> Signup and view all the answers

    Jak je zajištěna detekce genů pro rezistenci v mikrobiologii?

    <p>Pomocí sekvenace</p> Signup and view all the answers

    Který z následujících procesů se nepoužívá v analýze sekvencí DNA?

    <p>Syntéza proteinu</p> Signup and view all the answers

    Jaké typy výsledků lze očekávat při interpretaci mikrobiologických nálezů?

    <p>Kvalitativní a kvantitativní</p> Signup and view all the answers

    Study Notes

    ### Sérologické metody

    • Reakce protilátek (Ab) s antigeny (Ag) uvnitř těla in vitro.
    • Dvě fáze:
      • Specifická vazba: Rychlá vazba Ag determinanty a vazebného místa Ab, není viditelná.
      • Nespecifická fáze: Vizualizace reakce, vznik prostorového komplexu, viditelná reakce.
    • Použití:
      • Přímý průkaz Ag ve vzorku.
      • Nepřímý průkaz Ab v séru.
    • Rozdělení podle typu průkazu (povahy Ag):
      • Precipitace.
      • Aglutinace.
      • Vazba komplementu.
      • Neutralizace.
      • Reakce se značenými složkami.
    • Povaha Ag:
      • Rozpustný (koloidní = solubilní).
      • Korpuskulární (částicový, nerozpustný): Část nebo celá bakterie, latexová částice s Ag.
    • KFR – pozitivní & negativní reakce: Hemolýza senzibilizovaných erytrocytů v závislosti na přítomnosti komplementu.
    • Neutralizace: Protilátka blokuje biologické účinky Ag, průkaz na vhodném systému.
      • ASLO: Průkaz antistreptolyzinu O, indikátor – králičí erytrocyty.
      • Virusneutralizační test (VNT).
      • Hemaglutinačně inhibiční test (HIT).
    • Reakce se značenými složkami: Jedna složka reakce je označena, průkaz Ag & Ab.
      • Fluorescenční barvivo: Imunofluorescence.
      • Enzym: Imunoenzymatické testy (ELISA).
      • Radioizotop: Radioimunoanalýza (RIA).
      • Těžký kov: Imunoelektronoptické reakce.
    • Imunofluorescence (IF): Jedna složka je označena fluorescenčním barvivem, odeznívá pomocí fluorescenčního mikroskopu.
      • Přímá IF: Průkaz Ag.
      • Nepřímá IF: Použití Ab proti Ab.
    • Imunoenzymatické techniky (EIA): Jedna složka reakce je označena enzymem, ke znázornění výsledku se přidá substrát, který enzym rozloží za vzniku barevného nebo luminiscenčního produktu.
      • Vyhodnocení: Intenzita zbarvení - na přístroji (reader), měření tzv. optické denzity OD při specifické vlnové délce.

    Molekulární metody

    • Průkaz bakteriálních NK.
    • Velmi citlivé, specifické, rychlé, ale drahé.
    • Průkaz NK i z mrtvých buněk.
    • Náchylné na kontaminaci.
    • Stavba NK: Dusíkaté báze (A, G, C, T, U), cukr (ribóza/deoxyribóza), fosfát.
      • DNA: A, G, C, T.
      • RNA: A, G, C, U.
    • Komplementární párování bazí: C=G, A=T, A=U.
    • Hybridizační metody:
      • Přidání „sondy” – označený úsek DNA specifické pro určitý druh.
      • Vážou se k sobě DNA vzorku a sondy, pokud je ve vzorku přítomen daný druh.
      • Odeznívá se na luminometru.
    • Amplifikační metody: Zmnožení NK ve vzorku – PCR, LCR, NASBA.
      • PCR: Opakované cykly v termocykleru (denaturace, annealing, elongace).
      • Amplikony se prokazují elektroforézou nebo DNA sondou.
    • Sekvenační techniky: Určení sekvence nukleotidů (IgA, IgG).
      • IgA: Vytratí se během 1 - 2 týdnů, průkaz = čerstvá infekce.
      • IgG: Vytratí se pozvolně, vrchol za měsíc, můžou přetrvávat déle.

    Interpretace mikrobiologického nálezu

    • Index pozitivity (IP): Bezrozměrné číslo, vyjadřuje poměr naměřené hodnoty séra a hodnoty standardního séra.
      • Negativní: IP < 0,9.
      • Pozitivní: IP > 1,1.
      • Hraniční: 10% kolem hodnoty standardního séra IP = 0,9-1,1.
    • Laboratorní charakteristiky: Specificita a senzitivita:
      • Senzitivita: Správný záchyt nemocných.
      • Specifita: Správná negativita u zdravých.
    • Laboratorní chyba: Nepřesnost pomůcek, špatné výsledky měření, lidský faktor.
    • Interpretace nálezů: Vždy v souvislosti s klinickým stavem pacienta a jeho dalšími nálezy. - Nikdy se neléčí laboratorní nález, ale vždy nemoc pacienta.
    • Dynamika titrů protilátek:
      • Různý vývoj titrů protilátek v čase.
      • Důležitá pro diagnostiku.
      • Často se používá dynamika IgG a IgM.
    • Sérologické markery VHA: Důležité pro diagnostiku virové hepatitidy A, B, C.
      • Sérologické markery akutní VHB.

    ### Poznámky

    • Text je pouze shrnutím klíčových aspektů z přednášky.
    • Podrobnější informace najdete v odborné literatuře a zdrojoch uvedených v přednášce.
    • Výše uvedené informace by vám měly sloužit jako vodítko při přípravě na seminář a zkoušky.

    Imunochromatografické testy (ICH)

    • Využívají se pro rychlou a jednoduchou diagnostiku infekcí.
    • Testovací a kontrolní linie jsou umístěny na pevné fázi.
    • Vzorek se pohybuje porézní vrstvou a reaguje s testovacím a kontrolním místem.
    • Výsledek je viditelný do několika desítek minut.
    • Pozitivní výsledek: Viditelný proužek v testovací i kontrolní linii.
    • Negativní výsledek: Viditelný proužek pouze v kontrolní linii.
    • Často se používají jako POCT (testování u lůžka pacienta).

    ELISA (Enzyme-Linked Immunosorbent Assay)

    • Metoda pro detekci antigenů a protilátek.
    • Využívá specifické protilátky a enzymy vázané na protilátky.
    • Přímá ELISA: Pro detekci antigenů.
    • Nepřímá ELISA: Pro detekci specifických protilátek nebo antigenů.
    • Sendvičová ELISA: Pro detekci antigenu, kde antigen je "zasvěcen" mezi dvě protilátky.
    • Vysoká citlivost a specifita.

    Komplement fixační reakce (KFR)

    • Metoda pro detekci protilátek.
    • Vyžaduje přesné ředění všech složek a kontrol.
    • Skládá se z antigenu, protilátky, komplementu a indikátoru.
    • Princip: Komplement se váže na komplex antigenu a protilátky, čímž se aktivuje indikátor a reakce je viditelná.

    Elispot

    • Metoda pro kvantifikaci buněk produkujících cytokiny nebo imunoglobuliny.
    • Využívá se pro detekci specifických buněk imunitního systému.
    • Princip: Jedna reagující buňka vytváří jeden spot, který se dá vizualizovat.

    Imunoblot (Western blot)

    • Metoda pro identifikaci specifických proteinů v komplexní směsi.
    • Princip: Směs proteinů se separuje elektroforézou a poté se přenese na membránu.
    • Na membránu se aplikují specifické protilátky, které se váží na cílový protein.
    • Využívá se pro diagnostiku infekčních chorob a pro identifikaci proteinů s klinickým významem.

    Molekulární testy

    • Využívají se pro detekci bakteriálních nukleových kyselin.
    • Výhody: Vysoká citlivost, specifita a rychlost.
    • Nevýhody: Drahé, citlivé na kontaminaci.

    Hybridizační metody

    • Využívají se k identifikaci mikroorganismů na základě jejich specifické DNA.
    • Princip: Specifická sonda se váže na cílovou DNA ve vzorku a po detekci sondy se zjišťuje přítomnost daného mikroorganismu.
    • Výhody: Rychlé, specifické.
    • Nevýhody: Méně citlivé, potřebuje se více DNA ve vzorku.

    Amplifikační metody

    • Zmnožují cílový úsek DNA, čímž zvyšují detekční limit.
    • Nejčastější metoda: PCR (polymerázová řetězová reakce).
    • Princip: Cílová DNA se množí opakovanou replikací, čímž se zvětšuje počty replikací cílové DNA.

    Sekvenace DNA

    • Stanovení pořadí nukleotidů v DNA.
    • Využití: Diagnostika infekčních chorob, identifikace mikroorganismů, hledání mutací a diagnostika genetických onemocnění.

    Interpretace mikrobiologických nálezů

    • Zohledňuje se stav pacienta, typ vzorku, metoda analýzy a související faktory.
    • Diagnostika přímá: Prokazuje přítomnost mikroba nebo jeho částí (mikroskopie, kultivace, detekce antigenů, NK, pokus na zvířeti).
    • Diagnostika nepřímá: Prokazuje imunitu organismu (detekce protilátek, buněčná imunita).
    • Falešná negativita: Výsledek testu je negativní, i když je pacient infikován.
    • Falešná pozitivita: Výsledek testu je pozitivní, i když je pacient neinfikován.

    Pojmy

    • Titr protilátek: Koncentrace protilátek v séru.
    • Index pozitivity: Poměr titru protilátek v séru pacienta k referenční hodnotě.
    • Dynamika protilátek: Změna titru protilátek v čase.
    • Anamnestický titr: Titr protilátek po předchozí infekci.
    • Čtyřnásobný vzestup titru: Čtyřnásobné zvýšení titru protilátek v čase.
    • Sérokonverze: Změna titru protilátek z negativního na pozitivní.
    • Specifita: Schopnost metody detekovat specifické protilátky nebo antigeny.
    • Senzitivita: Schopnost metody detekovat protilátky nebo antigeny i při nízké koncentraci.
    • Laboratorní chyba: Chyba způsobená v laboratorním procesu.

    Studying That Suits You

    Use AI to generate personalized quizzes and flashcards to suit your learning preferences.

    Quiz Team

    Related Documents

    Sérologické metody, Molekulární metody, Interpretace mikrobiologického nálezu PDF

    Description

    Tento kvíz se zaměřuje na sérologické metody používané k detekci protilátek a antigenů v těle. Prozkoumáte různé fáze reakce, typy průkazů a významné testy jako je ASLO a virusneutralizační test. Tento kvíz vám pomůže porozumět podstatě sérologických technik a jejich aplikacím.

    More Like This

    Use Quizgecko on...
    Browser
    Open
    Browser
    Browser