Rod Mycobacterium - Obecný přehled

Rod Mycobacterium - Obecný přehled

• Rod bakterií, obsahující důležité patogeny pro člověka
• Patogenita souvisí s tuberkulózou a leprou
• Důležité druhy zahrnují komplex M. tuberculosis a M. leprae
• Existují i tzv. atypická mykobakteria, které působí jako oportunní patogeny,např. komplex M. avium-intracellulare, M. kansasii, M. xenopi, M. fortuitum, M. gordonae
• Infekce se manifestují různými způsoby, nejčastěji plicní tuberkulózou, která může postihovat další tkáně a orgány
• Lepra postihuje nervy a kůži.

Rod Mycobacterium - Tuberkulóza plic

• Tuberkulóza plic je vážné onemocnění, které se začíná tuberkulem
• Tuberkul se postupně rozšiřuje do kaseifikace
• Kaseifikace je pak následována fází kaverny
• V rané fázi se tuberkulóza projevuje jako zánětlivé ložisko.
• Charakteristickými buňkami jsou Langhansovy buňky
• Tuberkulóza plic je nejčastěji sekundární infekce, šíří se z jiné části těla.
• Častým místem nákazy jsou orofaciální oblasti jak u dříve nemocných, tak u zdravých jedinců.

Rod Mycobacterium - Diagnostika

• Odběr materiálu: sputum, bronchoalveolární laváž (BAL), laryngeální výtěry, žaludeční výplach, moč, likvor, pleurální exsudát, hnis, stěry, menstruační krev, stolice, biopsie, pitevní materiál

  • Důležité je okamžité uložení v chladu.

• Mikroskopie: barvení podle Ziehl-Neelsena, fluorochromy (auramin, rhodamin) pro detekci acidorezistentních tyčinek

  • Tyto barviva se používají pro detekci mykobakterií.

• Kultivace: dekontaminace vzorku, homogenizace, koncentrace, inokulace na Löwenstein-Jensenova půda, Ogawova půdách,Šulově půdě, inkubace 6 - 9 týdnů 37°C (kožní mykobakteriózy: 30°C)

• Moderní metody: rychlá kultivace v uzavřeném systému (detekce projevů metabolismu)

  • Měření tvorby CO2 a spotřeby O2
  • Změna barvy indikátoru
  • Používají se speciální přístroje

• Molekulárně genetická detekce: amplifikační metody (komerční soupravy), hybridizace, PCR, detekce DNA/RNA

  • Použití pro specifické odlišení mykobakterií

Rod Mycobacterium - Identifikace

• Konvenční metody (screening):

  • Odlišení komplexu M. tuberculosis od ostatních mykobakterií
  • Mikromorfologie, pozorování kolonií, pigmentace

• Konvenční metody (screening) - citlivost:

  • Citlivost k antituberkulotikům (růst bakterií na půdách s a bez antibiotik)

• Konvenční metody - druhová diferenciace: testy rezistence (k solím), teplotní tolerance, test fotochromogenity a biochemické reakce (např. průkaz arylsulfatázy, fosfatázy, d´aminooxidázy, acylamidáz, redukce železitých iontů, hydrolýza Tweenu 80, utilizace sacharidů, štěpení paraaminosalicylátu)

• Nové metody (druhová diferenciace):

  • Zkrácení doby identifikace
  • Chromatografické metody (plynová, tenkovrstevná); analýza mykolových kyselin a metylesterů mastných kyselin
  • Molekulárně genetické metody: restrikční analýza DNA, hybridizace DNA/RNA