Rod Mycobacterium - Obecný přehled

Study Notes

Rod bakterií, obsahující důležité patogeny pro člověka
Patogenita souvisí s tuberkulózou a leprou
Důležité druhy zahrnují komplex M. tuberculosis a M. leprae
Existují i tzv. atypická mykobakteria, které působí jako oportunní patogeny,např. komplex M. avium-intracellulare, M. kansasii, M. xenopi, M. fortuitum, M. gordonae
Infekce se manifestují různými způsoby, nejčastěji plicní tuberkulózou, která může postihovat další tkáně a orgány
Lepra postihuje nervy a kůži.

Tuberkulóza plic je vážné onemocnění, které se začíná tuberkulem
Tuberkul se postupně rozšiřuje do kaseifikace
Kaseifikace je pak následována fází kaverny
V rané fázi se tuberkulóza projevuje jako zánětlivé ložisko.
Charakteristickými buňkami jsou Langhansovy buňky
Tuberkulóza plic je nejčastěji sekundární infekce, šíří se z jiné části těla.
Častým místem nákazy jsou orofaciální oblasti jak u dříve nemocných, tak u zdravých jedinců.

Odběr materiálu: sputum, bronchoalveolární laváž (BAL), laryngeální výtěry, žaludeční výplach, moč, likvor, pleurální exsudát, hnis, stěry, menstruační krev, stolice, biopsie, pitevní materiál
- Důležité je okamžité uložení v chladu.
Mikroskopie: barvení podle Ziehl-Neelsena, fluorochromy (auramin, rhodamin) pro detekci acidorezistentních tyčinek
- Tyto barviva se používají pro detekci mykobakterií.
Kultivace: dekontaminace vzorku, homogenizace, koncentrace, inokulace na Löwenstein-Jensenova půda, Ogawova půdách,Šulově půdě, inkubace 6 - 9 týdnů 37°C (kožní mykobakteriózy: 30°C)
Moderní metody: rychlá kultivace v uzavřeném systému (detekce projevů metabolismu)
- Měření tvorby CO2 a spotřeby O2
- Změna barvy indikátoru
- Používají se speciální přístroje
Molekulárně genetická detekce: amplifikační metody (komerční soupravy), hybridizace, PCR, detekce DNA/RNA
- Použití pro specifické odlišení mykobakterií

Konvenční metody (screening):
- Odlišení komplexu M. tuberculosis od ostatních mykobakterií
- Mikromorfologie, pozorování kolonií, pigmentace
Konvenční metody (screening) - citlivost:
- Citlivost k antituberkulotikům (růst bakterií na půdách s a bez antibiotik)
Konvenční metody - druhová diferenciace: testy rezistence (k solím), teplotní tolerance, test fotochromogenity a biochemické reakce (např. průkaz arylsulfatázy, fosfatázy, d´aminooxidázy, acylamidáz, redukce železitých iontů, hydrolýza Tweenu 80, utilizace sacharidů, štěpení paraaminosalicylátu)
Nové metody (druhová diferenciace):
- Zkrácení doby identifikace
- Chromatografické metody (plynová, tenkovrstevná); analýza mykolových kyselin a metylesterů mastných kyselin
- Molekulárně genetické metody: restrikční analýza DNA, hybridizace DNA/RNA