Risque Biologique: prévention et dangers

Risque Biologique

• Le risque biologique concerne les laboratoires de microbiologie, les cultures cellulaires et les animaleries en raison des risques d'exposition infectieuse.
• Il est important d'avoir une approche préventive.

Description des dangers

• La contamination peut provenir de bactéries, d'endoparasites, de virus, de champignons et d'agents transmissibles non conventionnels (prions).
• Les cultures de cellules et les organismes génétiquement modifiés (OGM) sont aussi des sources de contamination.

Notion de réservoir et de porte de sortie

• Un réservoir est le lieu où s'accumulent les agents biologiques, pouvant être vivant (humain, animal) ou inanimé (sol, eau, objet contaminé).
• Pour qu'il y ait exposition, les agents biologiques doivent pouvoir sortir du réservoir ou le travailleur doit pouvoir y avoir accès.
• La toux et les crachats sont des portes de sortie pour les infections pulmonaires, tandis qu'une infection articulaire représente un risque pour les soignants pratiquant un geste invasif.

Quelles conséquences?

• Les conséquences d'une contamination peuvent être l'infection, l'intoxication, la toxi-infection, les allergies, les maladies neurologiques (prions), et l'implantation d'une tumeur (virus ou lignées cellulaires).

Professions à risque

• Le personnel soignant, les techniciens de laboratoire de biologie, les aides à domicile, et les thanatopracteurs sont particulièrement concernés par le risque biologique.
• Sont également concernés les éleveurs, vétérinaires, personnels des abattoirs ou des centres d'équarrissage, et les gardes-chasses.
• D'autres professions à risque incluent les éboueurs, le personnel des centres de compostage, les égoutiers, le personnel de nettoyage, et le personnel de laboratoire de recherche.

Exemples de contamination

• La tuberculose a pour réservoir l'homme et se transmet par inhalation de particules en suspension dans l'air.
• La maladie de Lyme est transmise par piqûre de tique et affecte la peau, le système neurologique et les articulations.
• La légionellose, dont le réservoir est l'eau, se contracte par inhalation d'aérosols contaminés et provoque fièvre et atteinte pulmonaire.

Activités et gestes à risque en laboratoire

• Les manipulations de micro-organismes pathogènes, d'animaux et d'échantillons biologiques présentent des risques.
• Les cultures cellulaires, les OGM, les déchets, le matériel souillé, ainsi que l'entretien et la réparation des locaux et des appareils sont aussi des sources de risque.

Comment se transmettent les agents biologiques?

• La transmission des agents biologiques depuis un réservoir en milieu professionnel se fait par quatre voies principales.
• La voie respiratoire est la principale cause et correspond généralement à l'inhalation d'aérosols.
• Le pipettage, l'agitation mécanique et le broyage sont des opérations générant des aérosols.
• L'ingestion d'aérosols ou le fait de ronger ses ongles sont les causes de la voie digestive.
• Les coupures, les morsures, le contact avec des produits chimiques et les projections sont des causes de la voie cutanée et oculaire.

Classification des pathogènes

• Les agents biologiques sont classés en quatre groupes selon le risque d'infection.
• Le groupe 1 comprend les agents non susceptibles de provoquer une maladie chez l'homme.
• Le groupe 2 comprend les agents pouvant provoquer une maladie chez l'homme et qui présentent un danger pour les travailleurs, mais dont la propagation dans la collectivité est peu probable.
• Le groupe 3 comprend les agents pouvant provoquer une maladie grave, mais avec une prophylaxie ou un traitement efficace.
• Le groupe 4 comprend les agents qui provoquent des maladies graves chez l'homme et qui constituent un danger sérieux pour les travailleurs et pour lesquels il n'existe généralement pas de prophylaxie.

Liste des agents biologiques pathogènes

• Suite aux directives du Parlement européen, un arrêté du 16 novembre 2021 fixe la liste des agents biologiques pathogènes.
• L'astérisque (*) indique que l'agent peut présenter un risque limité car il n'est normalement pas infectieux par l'air.
• "A" indique un agent biologique pathogène qui peut avoir des effets allergisants, et"T" un agent susceptible de produire des toxines.
• "V" indique un vaccin est disponible en France et "spp" renvoie aux autres espèces connues comme pathogènes chez l'homme.

Prévention du risque – Exercice

• Lors d'un accident d'exposition au sang (AES), il est essentiel d'évaluer et de prévenir les risques.
• Un AES est défini comme un contact avec du sang ou un liquide biologique par piqûre, coupure ou contact sur une plaie et expose aux virus des hépatites B et C (VHB, VHC) et du sida (VIH)
• La chaîne de transmission lors d'un AES part d'un réservoir (homme infecté), passe par une porte de sortie (blessure), une transmission (par contact sanguin) et une porte d'entrée (peau lésée).
• Des mesures comme soutenir la charge virale des patients, respecter les précautions standard, utiliser du matériel de sécurité et éviter le recapuchonnage sont cruciales.

Moyens de prévention

• Le PSM, le local et une bonne hygiène sont parmi les moyens de prévention.

Utilisation d'un PSM

• Le travail sous PSM est obligatoire dès qu'un agent biologique pathogène est manipulé (groupes 2, 3 ou 4).
• Le type de PSM dépend du risque associé à l'agent manipulé, et le choix se tourne vers les PSM de type II ou III pour des manipulations stériles.

Une bonne gestuelle – Code des bonnes pratiques

• Le port de combinaisons, de blouses ou d'uniformes est obligatoire en laboratoire.
• Le port de gants appropriés est obligatoire lors de contact potentiel avec du sang, du matériel infectieux ou des animaux infectés.
• Le lavage des mains est requis après avoir manipulé du matériel infectieux et avant de quitter le laboratoire.
• Le port de lunettes de sécurité est obligatoire pour assurer la protection contre les projections.
• Les vêtements de protection doivent rester dans le laboratoire, et des chaussures à bout ouvert sont interdites.
• Manger, boire, fumer, se maquiller ou manipuler des lentilles de contact est interdit.
• Les vêtements de protection ne doivent pas être rangés avec les vêtements de ville.

Une bonne gestuelle – Modes opératoires

• Le pipettage à la bouche est rigoureusement interdit.
• Il faut réduire la formation d'aérosols et de gouttelettes au minimum
• L'emploi d'aiguilles et de seringues hypodermiques doit être limité et ne doivent pas servir à remplacer les dispositifs de pipettage.
• Tout liquide répandu doit être immédiatement signalé au chef de laboratoire.
• Une marche à suivre écrite pour le nettoyage des produits répandus doit être établie, et les liquides contaminés doivent être décontaminés avant d'être jetés.

Une bonne gestuelle - Port des gants

• Les gants doivent être pincés et retournés sans toucher la peau pour être retirés.

Le local ou la définition des niveaux de confinement

• L'organisation d'un laboratoire doit inclure des zones distinctes comme des paillasses, une centrale, un réfrigérateur, un sas, un PSM et un couloir, chacun avec des niveaux de pression spécifiques.

Niveaux de confinement

• Le niveau de confinement L1 requiert un laboratoire standard avec des plans lisses, des vêtements différents, un vestiaire et un autoclave dans le même bâtiment.
• Le niveau L2 exige, au minimum, un local fermé avec accès réservé, une ventilation mécanique, des paillasses décontaminables, et le respect de la norme EN 374 pour les gants.
• Le niveau L3 requiert des filtres HEPA, un système de ventilation permettant la fumigation et un local en dépression.

Décontamination

• Les plans de travail doivent être nettoyés quotidiennement en L2 et après chaque manipulation en L3.
• Les locaux sont décontaminés en cas d'incident ou de maintenance, la vaisselle souillée avant d'être lavée et le gros matériel avant d'être réparé.
• La chaleur humide (autoclave à 134°C) et les produits chimiques (éthanol à 70%, eau de Javel à 0,4%, glutaraldéhyde à 2%) sont utilisés pour la décontamination.

Efficacité des décontaminants

• Les halogénés iodés (Bétadine), les halogénés chlorés (Eau de Javel) et l'Ammonium quaternaire (Chlorure de benzalkonium) sont des décontaminants efficaces sur les bactéries.
• L'eau de Javel est inhibée par les protéines, les acides forts, et les détergents cationiques.
• Pour les prions, il faut associer un traitement chimique (soude 1N pendant une heure) au traitement thermique (autoclave).

Elimination des déchets

• Les Déchets d'Activité de Soins à Risques Infectieux (DASRI) sont définis par le décret n°2016-1590 du 24 novembre 2016.
• Les DASRI incluent les objets piquants/coupants, les produits sanguins, les déchets anatomiques humains ou animales et les équipements de protection individuelle (EPI).
• C'est le producteur qui est responsable de l'élimination, mais la tâche peut être confiée à un prestataire de service.
• Le tri des déchets doit se faire selon leurs propriétés physiques (perforants, solides, liquides). Les emballages doivent prévenir la propagation et respecter les normes NF X.
• Les emballages utilisés doivent être résistants, imperméables, de couleur jaune dominante, avec un repère horizontal, un symbole de danger biologique et le nom du producteur.
• Le transport des déchets doit se faire dans des GRV (Grands Récipients en Vrac) avec contrôle de la fermeture hermétique des emballages et port de gants.
• La durée d'entreposage des déchets dépend de la quantité produite.
• Le producteur est responsable de l'élimination des déchets et le décret 2021-321 impose d'utiliser la plateforme Trackdéchets pour la traçabilité des déchets dangereux.

Organismes génétiquement modifiés (OGM)

• Un OGM est un organisme dont le matériel génétique a été modifié autrement que par multiplication ou recombinaison naturelle.
• Cela inclut les micro-organismes, virus, agents transmissibles non conventionnels et cultures de cellules végétales et animales.
• L'évaluation du danger d'un OGM doit tenir compte de organisme récepteur, du vecteur et de l'insert.
• L'évaluation du danger doit être menée par l'entreprise et transmise aux autorités compétentes, en fonction des caractéristiques de l'organisme hôte, du vecteur et de l'insert.
• Le rejet accidentel ou intentionnel d'OGM liés aux maladies infectieuses, l'exposition à des patho allergènes ou carcinogènes.
• Par le niveau les dangers dans l’environnement sont des atteintes graves, des dangers socio-économiques avec les risques liés aux brevets.

Evaluation du risque OGM

• Risque lié à l'organisme récepteur (hôte)
  • Un organisme receveur non pathogène peut présenter un danger après l'introduction d'une séquence exogène.
    • Exemples: l'expression d'une toxine modification de l'augmentant la prolifération ou la survival
• Risque lié au vecteur
  • Représenté par la capacité des vecteurs viraux à s'intégrer dans le génome de la cellule hôte, à se recombiner avec l'hôte et des séquences présentes.
• Risque lié à l'insert
  • A séquence non problématique et B séquence problématique avec agent pathogène ou mécanisme d' immortalisation

Règlementation des OGM

• Un décret du 30 décembre 2021 remplace le Haut Conseil des Biotechnologies (HCB) par le Comité d'Expertise des Utilisations Confinées d'Organismes Génétiquement Modifiés (CEUCO).
• Les membres du CEUCO sont chargés de délivrer des autorisations.
• Deux demandes d'autorisation sont nécessaires : une pour les installations où les OGM sont manipulés et une autre pour l'utilisation des OGM.
• L'autorisation d'utilisation est délivrée pour une durée maximale de cinq ans et doit mentionner le numéro d'agrément de l'installation.
• La déclaration de l'installation doit toujours précéder la demande d'utilisation.

Grossesse, maternité et risque biologique

• Grossesse et risque infectieux:
• Des situations professionnelles peuvent exposer à des agents biologique pose des enjeux pour l' enceinte ou qui souhaite le devenir.
  • Certaines infections bactériennes (listériose, fièvre Q), parasitaires (toxoplasmose..) ou virales (varicelle..) à des défauts congénitaux de l’enfant, dans ce cas il faut une évaluation des risques.
  • Ce qui limite vaccin et antibiotique pour femme enceinte
• Il est important de faire des suivis médicaux et prendre la bonne décision puis ne pas hésiter de demander de l'aide.