Podcast
Questions and Answers
PCR nedir?
PCR nedir?
Polimeraz zincir reaksiyonu (PCR), DNA'da belirli bir bölgenin tüp içinde ve kısa sürede çoğaltılması metodudur.
PCR'nin kullanıldığı alanlar nelerdir?
PCR'nin kullanıldığı alanlar nelerdir?
PCR, temel bilimde genom haritalama, gen klonlama ve gen ekspresyonu gibi çalışmaların yanı sıra, klinikte genetik hastalıkların tanısında, prenatal tanı ve enfeksiyon hastalıklarının teşhisinde, adli tıpta suçlu tespitinde, tarım ve gıda sanayisinde bitki ve hayvan ırklarının tespitinde ve evrimsel araştırmalarda fosil DNA'larının incelenmesinde kullanılmaktadır.
PCR amplifikasyonu için hedef DNA dizisinin bilinmesi gerekli değildir.
PCR amplifikasyonu için hedef DNA dizisinin bilinmesi gerekli değildir.
False
PCR çalışmalarında hangi enzim kullanılır?
PCR çalışmalarında hangi enzim kullanılır?
Signup and view all the answers
PCR cihazında kaç aşama vardır?
PCR cihazında kaç aşama vardır?
Signup and view all the answers
Elektroforez tekniğinin geliştirilmesiyle ilgili Nobel Kimya Ödülünü kim kazanmıştır?
Elektroforez tekniğinin geliştirilmesiyle ilgili Nobel Kimya Ödülünü kim kazanmıştır?
Signup and view all the answers
Agaroz jel elektroforezinde DNA parçalarının jeldeki hareketi neye bağlıdır?
Agaroz jel elektroforezinde DNA parçalarının jeldeki hareketi neye bağlıdır?
Signup and view all the answers
Agaroz elde edilen bitkinin adı nedir?
Agaroz elde edilen bitkinin adı nedir?
Signup and view all the answers
PCR ürünleri nasıl görüntülenir?
PCR ürünleri nasıl görüntülenir?
Signup and view all the answers
Real Time PCR nedir?
Real Time PCR nedir?
Signup and view all the answers
Study Notes
Genel Bakış
- PCR, Polimeraz Zincir Reaksiyonu'dur.
- DNA'da hedef bir bölgeyi tüp içinde hızlıca çoğaltan bir yöntemdir.
- Hücresel DNA replikasyonunun in vitro bir şeklidir.
- Tür çeşitli DNA'ları (örneğin, fosil DNA'sı) çoğaltmak için kullanılır.
- Moleküler Biyolojide çığır açan bir buluştur.
- 1985'te Kary Mullis ve arkadaşları tarafından geliştirilmiştir.
- 1993 Nobel Kimya Ödülü'ne layık görülmüştür.
PCR'ın Kullanım Alanları
- Temel Biyoloji: Genom haritalama, gen klonlama ve gen ekspresyonu
- Tıpta: Genetik hastalık tanısı (hasta ve taşıyıcı), prenatal tanı, viral/bakteriyel patojenlerin doğrudan tanısı, antibiyotik direnci ve virülans genlerinin tespit edilmesi
- Adli Tıp: Cinayet/suç mahallinde kan, doku veya spermden elde edilen DNA ile suçlu tespiti, babalık tayini.
- Tarım/Gıda: Bitki ve hayvan ırklarının tayini, GDO'lu ürün tespiti
- Evrimsel Biyoloji: Fosil DNA'ların incelenmesi (donmuş/40.000 yaşındaki mamut DNA'sı gibi)
PCR'da DNA Amplifikasyonu
- Hedef DNA dizisinin bilinmesi önemlidir.
- 18-25 baz uzunluğunda iki primer dizisi gereklidir; bu primerler bölgeye özgü olmalı ve genoma başka bir yerde bağlanmamalıdır.
- Primerlerin bağlanma bölgesi hedef DNA dizisi üzerinde belirlenir; primerler arası kalan DNA bölge çoğaltılır.
PCR için Gerekli Reaktifler
- Isıya dayanıklı bir DNA polimeraz enzimi (örneğin, Taq DNA polimeraz)
- 4 çeşit nükleotid baz (dNTP)
- İki primer dizisi
- Reaktifler yeterli miktarda ve kalitede olmalıdır.
PCR için Gerekli Cihazlar
- Termal sikler cihazı, ısı döngü cihazı, PCR cihazı
PCR Döngüsü Aşamaları
- Denatürasyon: Çift zincirli DNA 90-95°C'de açılır.
- Bağlanma: Denatüre DNA zincirlerine, primerler 50-60°C'de bağlanır.
- Uzama: Taq DNA polimeraz 72°C'de dNTP'ları primerlerin 3'-OH ucuna ekleyerek yeni DNA zincirlerini sentezler.
- Bu 3 aşama 30-35 kez tekrarlanır ve belirli DNA parçasının çok sayıda kopyası oluşturulur.
PCR Ürünlerinin Saptanması
- Elektroforez: Yüklü moleküllerin (DNA parçaları) elektrik akımıyla jel matrisinden (agar jel) geçirilerek ayrılması yöntemi.
- Agaroz Jel: DNA parçalarının ayrılmasında kullanılan jel matris.
- Boya: DNA parçacıkları floresan boya (EtBr) ile boyanır ve UV lambası altında görünür hale gelir.
Çoklu PCR (Multipleks PCR)
- Birden fazla ve farklı hedef DNA dizilerinin aynı anda çoğaltılması tek bir reaksiyonda
Gerçek Zamanlı PCR
- PCR ürünü oluşumuyla birlikte miktarının anında tespiti.
- Floresan problar amplifikasyon süreci boyunca eklenir ve DNA miktarı grafiğe alınır; jel elektroforezine ihtiyaç duyulmaz.
Studying That Suits You
Use AI to generate personalized quizzes and flashcards to suit your learning preferences.
Related Documents
Description
Bu quiz, Polimeraz Zincir Reaksiyonu (PCR) ve kullanım alanlarını keşfetmenize yardımcı olacaktır. DNA'nın çoğaltılması ve moleküler biyolojideki önemi hakkında daha fazla bilgi edineceksiniz. Ayrıca, PCR'nın tıp, adli tıp ve tarımdaki uygulamalarını da öğrenin.