PCR ve Kullanım Alanları
10 Questions
1 Views

Choose a study mode

Play Quiz
Study Flashcards
Spaced Repetition
Chat to lesson

Podcast

Play an AI-generated podcast conversation about this lesson

Questions and Answers

PCR nedir?

Polimeraz zincir reaksiyonu (PCR), DNA'da belirli bir bölgenin tüp içinde ve kısa sürede çoğaltılması metodudur.

PCR'nin kullanıldığı alanlar nelerdir?

PCR, temel bilimde genom haritalama, gen klonlama ve gen ekspresyonu gibi çalışmaların yanı sıra, klinikte genetik hastalıkların tanısında, prenatal tanı ve enfeksiyon hastalıklarının teşhisinde, adli tıpta suçlu tespitinde, tarım ve gıda sanayisinde bitki ve hayvan ırklarının tespitinde ve evrimsel araştırmalarda fosil DNA'larının incelenmesinde kullanılmaktadır.

PCR amplifikasyonu için hedef DNA dizisinin bilinmesi gerekli değildir.

False

PCR çalışmalarında hangi enzim kullanılır?

<p>PCR'da kullanılan enzim, Thermus aquaticus bakterisinden izole edilmiş, ısıya dayanıklı bir DNA polimeraz olan Taq DNA polimerazdır.</p> Signup and view all the answers

PCR cihazında kaç aşama vardır?

<p>PCR cihazında üç aşama vardır. Bunlar; denatürasyon, bağlanma ve uzama aşamalarıdır.</p> Signup and view all the answers

Elektroforez tekniğinin geliştirilmesiyle ilgili Nobel Kimya Ödülünü kim kazanmıştır?

<p>Elektroforez tekniğinin geliştirilmesiyle ilgili Nobel Kimya Ödülü 1948 yılında İsveçli biyokimyacı Arne Tiselius'a verilmiştir.</p> Signup and view all the answers

Agaroz jel elektroforezinde DNA parçalarının jeldeki hareketi neye bağlıdır?

<p>DNA parçalarının jeldeki hareketi, uygulanan akım şiddetine, moleküllerin büyüklüğüne ve şekline bağlıdır.</p> Signup and view all the answers

Agaroz elde edilen bitkinin adı nedir?

<p>Agaroz, kırmızı bir alg türü olan Agar agar'dan izole edilir.</p> Signup and view all the answers

PCR ürünleri nasıl görüntülenir?

<p>PCR ürünleri, Ethidium Bromid (EtBr) gibi floresan boyalarla renklendirildikten sonra UV lambası altında incelenerek görüntülenir.</p> Signup and view all the answers

Real Time PCR nedir?

<p>Real Time PCR, geleneksel PCR'den farklı olarak, reaksiyon tüpü içinde çoğaltılan DNA miktarının eş zamanlı olarak tespitine ve ölçülmesine olanak veren bir PCR yöntemidir.</p> Signup and view all the answers

Study Notes

Genel Bakış

  • PCR, Polimeraz Zincir Reaksiyonu'dur.
  • DNA'da hedef bir bölgeyi tüp içinde hızlıca çoğaltan bir yöntemdir.
  • Hücresel DNA replikasyonunun in vitro bir şeklidir.
  • Tür çeşitli DNA'ları (örneğin, fosil DNA'sı) çoğaltmak için kullanılır.
  • Moleküler Biyolojide çığır açan bir buluştur.
  • 1985'te Kary Mullis ve arkadaşları tarafından geliştirilmiştir.
  • 1993 Nobel Kimya Ödülü'ne layık görülmüştür.

PCR'ın Kullanım Alanları

  • Temel Biyoloji: Genom haritalama, gen klonlama ve gen ekspresyonu
  • Tıpta: Genetik hastalık tanısı (hasta ve taşıyıcı), prenatal tanı, viral/bakteriyel patojenlerin doğrudan tanısı, antibiyotik direnci ve virülans genlerinin tespit edilmesi
  • Adli Tıp: Cinayet/suç mahallinde kan, doku veya spermden elde edilen DNA ile suçlu tespiti, babalık tayini.
  • Tarım/Gıda: Bitki ve hayvan ırklarının tayini, GDO'lu ürün tespiti
  • Evrimsel Biyoloji: Fosil DNA'ların incelenmesi (donmuş/40.000 yaşındaki mamut DNA'sı gibi)

PCR'da DNA Amplifikasyonu

  • Hedef DNA dizisinin bilinmesi önemlidir.
  • 18-25 baz uzunluğunda iki primer dizisi gereklidir; bu primerler bölgeye özgü olmalı ve genoma başka bir yerde bağlanmamalıdır.
  • Primerlerin bağlanma bölgesi hedef DNA dizisi üzerinde belirlenir; primerler arası kalan DNA bölge çoğaltılır.

PCR için Gerekli Reaktifler

  • Isıya dayanıklı bir DNA polimeraz enzimi (örneğin, Taq DNA polimeraz)
  • 4 çeşit nükleotid baz (dNTP)
  • İki primer dizisi
  • Reaktifler yeterli miktarda ve kalitede olmalıdır.

PCR için Gerekli Cihazlar

  • Termal sikler cihazı, ısı döngü cihazı, PCR cihazı

PCR Döngüsü Aşamaları

  • Denatürasyon: Çift zincirli DNA 90-95°C'de açılır.
  • Bağlanma: Denatüre DNA zincirlerine, primerler 50-60°C'de bağlanır.
  • Uzama: Taq DNA polimeraz 72°C'de dNTP'ları primerlerin 3'-OH ucuna ekleyerek yeni DNA zincirlerini sentezler.
  • Bu 3 aşama 30-35 kez tekrarlanır ve belirli DNA parçasının çok sayıda kopyası oluşturulur.

PCR Ürünlerinin Saptanması

  • Elektroforez: Yüklü moleküllerin (DNA parçaları) elektrik akımıyla jel matrisinden (agar jel) geçirilerek ayrılması yöntemi.
  • Agaroz Jel: DNA parçalarının ayrılmasında kullanılan jel matris.
  • Boya: DNA parçacıkları floresan boya (EtBr) ile boyanır ve UV lambası altında görünür hale gelir.

Çoklu PCR (Multipleks PCR)

  • Birden fazla ve farklı hedef DNA dizilerinin aynı anda çoğaltılması tek bir reaksiyonda

Gerçek Zamanlı PCR

  • PCR ürünü oluşumuyla birlikte miktarının anında tespiti.
  • Floresan problar amplifikasyon süreci boyunca eklenir ve DNA miktarı grafiğe alınır; jel elektroforezine ihtiyaç duyulmaz.

Studying That Suits You

Use AI to generate personalized quizzes and flashcards to suit your learning preferences.

Quiz Team

Related Documents

PCR ve Kullanım Alanları PDF

Description

Bu quiz, Polimeraz Zincir Reaksiyonu (PCR) ve kullanım alanlarını keşfetmenize yardımcı olacaktır. DNA'nın çoğaltılması ve moleküler biyolojideki önemi hakkında daha fazla bilgi edineceksiniz. Ayrıca, PCR'nın tıp, adli tıp ve tarımdaki uygulamalarını da öğrenin.

More Like This

PCR and DNA Amplification Quizzes
44 questions
PCR Technique in Molecular Biology
10 questions
6-Polymerase Chain Reaction (PCR)
16 questions

6-Polymerase Chain Reaction (PCR)

UnquestionableNarrative779 avatar
UnquestionableNarrative779
Use Quizgecko on...
Browser
Browser