PCR Technique and 16S rDNA Gene Detection

Amplificar la cantidad de DNA de una muestra

94°C, 60°C y 72°C

1.07 x 10^9

<p>Un Thermal Cycler (termociclador)</p> Signup and view all the answers

<p>Detectar la presencia de bacterias o virus como HIV y COVID-19</p> Signup and view all the answers

<p>Detección de mutaciones en genes relacionados a enfermedades como fibrosis quística y anemia falciforme</p> Signup and view all the answers

<p>Componentes como DNA, primers, nucleótidos y polimerasa</p> Signup and view all the answers

<p>El gen 16S rDNA del genoma de la cepa DH5α de Escherichia coli</p> Signup and view all the answers

<p>47-60oC</p> Signup and view all the answers

<p>dNTPs</p> Signup and view all the answers

<p>Determinar la presencia de productos específicos y no específicos, y detectar contaminación de DNA exógeno</p> Signup and view all the answers

<p>1.5 kb</p> Signup and view all the answers

<p>Detectar contaminación de DNA exógeno</p> Signup and view all the answers

<p>Los extremos de los productos son completamente extendidos.</p> Signup and view all the answers

<p>72oC</p> Signup and view all the answers

<p>No se espera ver bandas</p> Signup and view all the answers

<p>Células epiteliales de manos, brazos y cara del estudiante o personas realizando la amplificación.</p> Signup and view all the answers

<p>Un 'primer dimer' es la unión de 'primers' FW con FW, RV con RV o FW con RV, que se forma cuando hay cierta complementariedad de bases debido al diseño incorrecto de los mismos o cuando se trabaja con altas concentraciones de los 'primers'.</p> Signup and view all the answers

<p>El gen 16S rDNA codifica para el rRNA que forma parte de la subunidad más pequeña del ribosoma procariota.</p> Signup and view all the answers

<p>El gen 16S rDNA contiene secuencias conservadas de DNA común en todas las bacterias y secuencias variables únicas para cada especie de bacteria (polimorfismo).</p> Signup and view all the answers

<p>El objetivo es amplificar una región conservada del gen 16S rDNA.</p> Signup and view all the answers

<p>1.5 kilobases (kb) o 1500 pares de bases (bp).</p> Signup and view all the answers

<p>El TM (Temperature de Melt) es la temperatura a la que se produce la unión del 'primer' con el DNA. Su utilidad es determinar la temperatura óptima para la amplificación.</p> Signup and view all the answers

<p>M = A, C; W = G, T; R = Purinas (A y G)</p> Signup and view all the answers

<p>Unirse al extremo 3' del DNA de interés y proporcionar un sitio de inicio para la síntesis de DNA</p> Signup and view all the answers

<p>72°C</p> Signup and view all the answers

<p>Un componente necesario para que la enzima DNA polimerasa pueda trabajar en forma óptima</p> Signup and view all the answers

<p>Actúa como un cofactor necesario para que la DNA polimerasa pueda sintetizar DNA en forma óptima</p> Signup and view all the answers

<p>La separación de la doble hebra de DNA y la formación de las hebras sencillas</p> Signup and view all the answers

<p>Sintetizar DNA en forma óptima</p> Signup and view all the answers

<p>94-97°C</p> Signup and view all the answers

<p>Permitir la síntesis de DNA a partir de los iniciadores y los nucleótidos trifosfatados</p> Signup and view all the answers

<p>8 µL</p> Signup and view all the answers

<p>Visualizar la migración de las muestras</p> Signup and view all the answers

<p>Contiene el 'loading dye' necesario para visualizar la migración de las muestras</p> Signup and view all the answers

<p>Identificar cada carril como M, 1, 2, 3, 4, etc.</p> Signup and view all the answers

<p>Productos no específicos</p> Signup and view all the answers

<p>Visualizar los resultados de la reacción de PCR</p> Signup and view all the answers

<p>Se forma un 'primer dimer'</p> Signup and view all the answers

<p>2^30 = 1,073,741,824 copias</p> Signup and view all the answers

<p>16S rDNA de 1.5 kb</p> Signup and view all the answers

<p>Analizar y interpretar los resultados de la reacción de PCR</p> Signup and view all the answers