T15Muestras Histológicas y Citológicas

Introducción a las Muestras Histológicas y Citológicas

• La evaluación citológica implica el análisis microscópico de células corporales para determinar su apariencia, formación y función.
• Se utiliza comúnmente para detectar cánceres, cambios precancerosos e infecciones virales.
• A diferencia de una biopsia, examina solo células en lugar de tejidos.
• Un frotis de Papanicolaou es una muestra citológica por excelencia.
• Otras muestras son de líquido pleural, orina o esputo.
• El enfoque principal de estudio son las muestras histológicas.

Muestras Histológicas y Biopsias

• Las muestras histológicas son tejidos de un órgano específico, preparados para análisis morfológico y molecular, incluyendo microscopía.
• Una biopsia es la extracción y análisis de una muestra de tejido con fines diagnósticos.
• El término biopsia se suele utilizar para hablar del propio tejido extraído.
• Tipos de biopsias clasificados por estructura anatómica y método de recogida son:
  • Incisional: Recoge una sección de la lesión.
  • Excisional: Extrae la lesión completa.
  • Mamaria.
  • Por aspiración con aguja fina o gruesa.
  • Ósea, pleural y punch.
  • Preoperatoria, intraoperatoria y postoperatoria.
• Zonas anatómicas comunes incluyen piel, mama, tiroides, médula ósea, ganglios linfáticos, tracto gastrointestinal, hígado y pulmón.
• Las biopsias tienen técnicas de recogida y análisis específicas, requiriendo conocer la muestra necesaria para representar la lesión o zona de estudio.

Técnicas de Toma de Muestras

• Las técnicas usadas en la toma de muestras para biopsias son invasivas.
• Se diferencian según la zona anatómica de extracción.
• En lesiones visibles en piel o mucosa, se usan bisturí con anestesia local (biopsia incisional) o un instrumento cilíndrico cortante (biopsia punch).
• El afeitado o raspado (shave) se usa para diagnosticar cáncer de piel, como el melanoma.
• Los endoscopios facilitan la extracción de muestras de superficies internas mediante canales:
  • Endoscopia digestiva alta: permite la toma de muestra de la mucosa de esófago, estómago o duodeno.
  • Rectosigmoidoscopia: permite la toma de muestra de la mucosa del colon, el recto y el sigmoide.
  • Endoscopia respiratoria: Permite la recogida de muestras de las fosas nasales, faringe, laringe, tráquea, mucosa branquial y parénquima pulmonar.
  • Endoscopia urológica: Hace posible la toma de muestras en la vejiga.
  • Laparoscopia: Usada para muestras peritoneales.
  • Mediastinoscopia y pleuroscopia: Empleadas para biopsiar órganos torácicos.
• Agujas cortantes, como la tru-cut, para muestras percutáneas de hígado, tumores mamarios, riñón, próstata y tiroides.
• En ginecología, se usa el curetaje (raspado o legrado) con curetas para muestras de endocérvix y endometrio.
• También se usa en cavidades óseas y peridentarias maxilares.
• El ayuno o la toma de medicamentos por el paciente antes de la obtención de la muestra pueden alterar los resultados.

Biopsia Incisional

• Consiste en la extracción quirúrgica de un trozo de tejido de la lesión generalmente para diagnosticar tumores malignos mediante análisis histopatológico.
• Se recurre a este tipo de biopsia si la lesión es muy grande.
• Se recurre a este tipo de biopsia si afecta a un órgano no extirpable.
• Se utiliza en lesiones del aparato digestivo, ginecológico, respiratorio, dermatológicas inflamatorias y tumorales, y de la cavidad bucal.
• Los pacientes deben seguir las indicaciones del médico sobre anestesia general o local.
• Se requieren de seis a ocho horas de ayuno previas al proceso en casos de sedación
• El protocolo a seguir es menos estricto cuando se trate de anestesia local.

Biopsia Excisional

• Implica la extracción de la lesión completa y tejido circundante.
• Se aplica a lesiones nodulares o a la extirpación en quirófano de órganos como el bazo o ganglios linfáticos.
• Requiere hospitalización corta y anestesia local o general.
• El paciente debe seguir pautas de preparación indicadas.
• A veces implica la extracción de piezas grandes como amputaciones, esplenectomías o lobectomías.
• El procesamiento puede seguir los siguientes métodos:
  • Enviar la pieza refrigerada si el procesamiento no supera las 24 horas.
  • Fijar las piezas previamente (48-72 horas) y enviar envueltas en bolsas de plástico y contenedor rígido, seccionar la pieza alrededor de 1 cm de grosor ayuda.
  • Seccionar la pieza en partes separadas y enviarlas en diferentes contenedores identificados, con un esquema para reconstrucción.
  • Enviar solo una parte de la pieza y conservar el resto hasta concluir el estudio.

Biopsia por Punción Aspiración con Aguja Fina y Gruesa

• La PAAF usa aguja fina y jeringa para extraer pequeñas partes de un tumor, por lo general sin gran molestia ni cicatriz.
• Se usa en ganglios linfáticos grandes para detectar metástasis de melanoma y ante indicios de cáncer de mama o tiroides.
• La radiología guía la aguja en órganos internos como pulmón o hígado, mediante imágenes de cortes transversales del cuerpo.
• También se puede usar ultrasonido o fluoroscopia.
• La biopsia por punción aspiración con aguja gruesa es similar a la PAAF, pero usa una la aguja más grande
• Está guiada por ecografía y es muy empleada en el diagnóstico del cáncer de mama.

Biopsia Ósea, Pleural y Punch

• La biopsia ósea extrae hueso o médula ósea para análisis siguiendo estos pasos:
  • Radiografía, tomografía o resonancia para guiar la colocación del instrumento.
  • Anestesia para insensibilizar la zona.
  • Incisión pequeña en la piel.
  • Inserción de aguja de taladro especial empujando y girando dentro del hueso.
  • Retirar la aguja después de obtener muestra.
  • Se hace presión para evitar el sangrado, además se hará uso de suturas y vendaje.
• La biopsia pleural determina las causas de un derrame pleural exudativo, si la toracocentesis no es efectiva.
• Solo la realiza un neumólogo o cirujano experto si el paciente no tiene alteraciones de coagulación.
• Es recomendable la realización de una radiografía de tórax tras la biopsia para controlar que hay ausencia de complicaciones.
• La biopsia punch (sacabocados) para enfermedades cutáneas vinculadas a la dermatología.
• Se usa un bisturí circular con mango de plástico que se rota sobre la piel penetrando epidermis, dermis e hipodermis para obtener una muestra cilíndrica.
• Las cicatrices se pueden cerrar con sutura.

Otros Tipos de Biopsia

• La biopsia intraoperatoria se realiza en cirugía para obtener un diagnóstico y ajustar el procedimiento quirúrgico.
• Es útil en la biopsia del nódulo tiroideo para decidir la extensión de la tiroidectomía programada, en patología oncológica urológica y en cirugía torácica.
• El cirujano extrae la muestra y la envía urgentemente al servicio de anatomía patológica.
• El patólogo analiza la muestra según lo solicitado tras la preparación del técnico.
• Para su estudio, se usan kits de inmunoteñidores rápidos, inmunoglobulinas marcadas u OSNA para estudios de mRNA.
• El estudio histológico en profundidad debe realizarse después.
• La biopsia intraoperatoria más frecuente es la del ganglio linfático centinela.
• Es donde suele surgir el tumor maligno.
• Se extirpa y somete a análisis para determinar su estado y adecuar el tratamiento posterior en cáncer de mama y melanoma.
• Cabe destacar la biopsia intraoperatoria para el diagnóstico y la aceptación de órganos de donantes, con un equipo de patología del trasplante disponible las 24 horas.
• Las biopsias preoperatorias o postoperatorias evalúan la eficacia de un tratamiento.

Procesamiento Previo para el Análisis

• El servicio de patología emplea técnicos en Anatomía Patológica para procesar muestras y que el patólogo las evalúe y emita un informe.
• La fijación es el primer paso para preservar el contenido celular de las muestras, evitando su degradación.
• En anatomía patológica, el fijador de rutina empleado es el formol, que genera puentes intra e intermoleculares, fijando estructuras celulares, enzimas y microorganismos.
• Esta fijación debe realizarse de forma inmediata.

Procesamiento Posterior al Análisis

• Las muestras procesadas de biopsias se manda al laboratorio de patología, para ser analizadas.
• Los resultados se le entregan al paciente a partir del informe final.
• Las muestras de tejido de la biopsia deben cortarse delgadas y ser colocadas en portas para tinciones y microscopía.
• Estas muestras pueden ser cortes permanentes o congelados:
  • Cortes permanentes: El tejido se fija en formol y se incluye en parafina para endurecerlo para poder cortarlo en secciones delgadas, colocarlo en el portaobjetos y teñirlo.
  • Cortes congelados: Las muestras se congelan y cortan para su análisis rápido durante la operación. - Si la muestra líquida tiene pequeños trozos de tejido; se prepara diferente. El técnico frota la muestra y deja secar, luego se rocía con fijador o se coloca en un líquido para fijarlo, luego se tiñen y observan.
• A este tipo de preparación habitual para muestras citológicas se llama frotis.
• Los técnicos tardan en procesar y que el patólogo emita un diagnóstico entre entre uno y tres días en un diagnóstico de punción con aguja fina
• Los técnicos tardan entre tres y cinco días en el caso de biopsias.

Observación al Microscopio

• El técnico o patólogo observa cortes de muestra y realiza informes de patología que deben estar firmados por un patólogo usando términos específicos.
• En general, el técnico o patólogo describe :
  • Los tipos de células.
  • Cómo están organizadas las células.
  • Si las células son anormales.
  • Otras características importantes para un diagnóstico.
• Si el patólogo necesita más información, se solicitará en el informe.

Resumen

• Las biopsias implican la extracción y análisis de tejidos para diagnosticar lesiones mediante examen histológico.
• La biopsia incisional extrae una parte de la lesión
• La biopsia excisional implica la extirpación completa.
• Las biopsias pueden ser por punción aspiración con aguja fina o gruesa, punch, o raspado.
• Las biopsias intraoperatorias dan diagnóstico inmediato durante la cirugía
• Las biopsias postoperatorias comprueban la validez de un tratamiento.
• Las muestras de biopsia son analizadas en el servicio de patología.
• Los técnicos preparan las muestras para que el patólogo realice un estudio microscópico.

Resolución del caso práctico de la unidad

• La prueba requerida para el estudio de una lesión cutánea tras anamnesis y examen físico no esclarecedores es la biopsia.
• Dicha biopsia consiste en la toma de muestras y su posterior análisis.
• Existen diferentes técnicas:
  • Por raspado.
  • Por punción.
  • Por escisión.