Microbioma Humano - Esterilização e Desinfecção

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Questions and Answers

Qual dos seguintes meios é considerado um meio seletivo?

  • Ágar sangue
  • Meio BHI
  • Meio MacConkey (correct)
  • Meio nutritivo

Os meios líquidos contêm agentes solidificantes.

False (B)

Qual método é utilizado para esterilizar materiais que não suportam altas temperaturas?

  • Filtração com filtro (correct)
  • Estufa
  • Autoclave
  • Radição ultravioleta

Qual é o principal uso dos meios gerais?

<p>Permitir o crescimento de uma ampla variedade de microrganismos.</p> Signup and view all the answers

O antisséptico é mais agressivo que o desinfetante.

<p>False (B)</p> Signup and view all the answers

O meio _______ é um exemplo de meio diferencial que muda de cor dependendo da capacidade de fermentação de lactose.

<p>MacConkey</p> Signup and view all the answers

Qual é a função principal da pasteurização?

<p>Reduzir microrganismos no leite.</p> Signup and view all the answers

Associe os tipos de hemólise com suas características:

<p>Sem hemólise = Colônia visível sem alterações na cor Hemólise parcial (alfa-hemólise) = Área ao redor da colônia com coloração esverdeada Hemólise completa (beta-hemólise) = Área ao redor da colônia torna-se transparente</p> Signup and view all the answers

A _____ é usada para criar um ambiente estéril, esterilizando a superfície e filtrando o ar que entra.

<p>câmara de fluxo de ar laminar</p> Signup and view all the answers

Associe os métodos de esterilização com suas características:

<p>Autoclave = Usa calor e pressão para esterilizar Radiação gama = Penetra superfícies Tindalização = Alterna aquecimento e arrefecimento Ultrapasteurização = Aquece a altas temperaturas brevemente</p> Signup and view all the answers

Como é feita a transferência de meio sólido para meio líquido?

<p>Mergulhando uma ansa esterilizada (A)</p> Signup and view all the answers

Os meios específicos sempre têm a mesma composição nutricional.

<p>False (B)</p> Signup and view all the answers

Qual é a principal diferença entre desinfetante e antisséptico?

<p>O desinfetante é utilizado em superfícies, o antisséptico em tecidos vivos. (A)</p> Signup and view all the answers

A radiação ultravioleta é eficaz na esterilização de superfícies.

<p>True (A)</p> Signup and view all the answers

O que caracteriza um meio geral como o ágar-sangue?

<p>É enriquecido com sangue e fornece nutrientes adicionais.</p> Signup and view all the answers

O método de _____ utiliza altas pressões para esterilizar alimentos enquanto preserva sabor e nutrientes.

<p>altas pressões</p> Signup and view all the answers

Qual é o primeiro corante utilizado no processo de coloração de Gram?

<p>Violeta cristal (B)</p> Signup and view all the answers

O álcool ou a acetona afetam as bactérias Gram-positivas durante a coloração de Gram.

<p>False (B)</p> Signup and view all the answers

Quais são os dois corantes usados na coloração de Ziehl-Neelsen?

<p>Fucsina e azul de metileno</p> Signup and view all the answers

O teste de catalase é usado para identificar bactérias ________.

<p>Gram positivas</p> Signup and view all the answers

Associe os corantes e mordentes às suas funções no processo de coloração de Gram:

<p>Violeta cristal = Corante primário Lugol = Mordente Álcool ou acetona = Diferenciador Safranina = Corante secundário</p> Signup and view all the answers

Que tipo de bactérias cresce no meio Mac Conkey?

<p>Somente Gram-negativas (B)</p> Signup and view all the answers

As bactérias ficam incolores após a aplicação de safranina.

<p>False (B)</p> Signup and view all the answers

A diferenciação entre bactérias Gram-positivas e Gram-negativas ocorre devido à presença da camada de ________ nas Gram-negativas.

<p>lipopolissacarídeo</p> Signup and view all the answers

Qual é a função do gene do RNA ribossomal 16S na identificação de bactérias?

<p>Identifica microrganismos e antimicrobianos (B)</p> Signup and view all the answers

A amplificação de DNA usando PCR envolve a utilização de catiões monovalentes.

<p>False (B)</p> Signup and view all the answers

Qual é o primeiro passo na extração de DNA?

<p>Lise das células</p> Signup and view all the answers

O gene do RNA ribossomal 16S é utilizado para identificar __________.

<p>bactérias</p> Signup and view all the answers

Associe os componentes das reações moleculares com suas funções:

<p>MgCl2 = Catião essencial para a DNA polimerase dATP = Desoxinucleotídeo que passa a adenina dCTP = Desoxinucleotídeo que passa a citosina dTTP = Desoxinucleotídeo que passa a timina</p> Signup and view all the answers

Qual das seguintes etapas não faz parte da extração de DNA?

<p>Sequenciação metagenômica (A)</p> Signup and view all the answers

O tratamento com RNase é utilizado para remover proteínas da amostra de DNA.

<p>False (B)</p> Signup and view all the answers

Qual método é especificado para verificar a pureza do DNA?

<p>Cálculo do rácio</p> Signup and view all the answers

Qual das opções abaixo descreve o papel da DNA polimerase termostável?

<p>Replicação do DNA a altas temperaturas (B)</p> Signup and view all the answers

Os primers forward e reverse têm a mesma direção durante a replicação do DNA.

<p>False (B)</p> Signup and view all the answers

Qual é o componente que serve como ponto de partida para a replicação do DNA?

<p>Primer</p> Signup and view all the answers

A concentração mínima inibitória (CMI) é a menor quantidade de antimicrobiano necessária para __________ o crescimento da bactéria.

<p>inibir</p> Signup and view all the answers

Associe os métodos de teste de suscetibilidade aos antimicrobianos com suas descrições:

<p>Método de Difusão em Disco = Zona de inibição ao redor dos discos com antimicrobianos Microdiluições = Diluições sucessivas para determinar a CMI Método das fitas (E-test) = Fitas com gradientes para determinar a CMI e a CMB</p> Signup and view all the answers

Qual das opções define corretamente um bactericida?

<p>Um antimicrobiano que mata as bactérias (D)</p> Signup and view all the answers

Antibióticos e antimicrobianos são sinônimos, significando a mesma coisa.

<p>False (B)</p> Signup and view all the answers

Os métodos de teste de suscetibilidade ajudam a determinar a __________ de antibióticos contra microrganismos.

<p>eficácia</p> Signup and view all the answers

O que é uma cultura pura?

<p>Uma cultura composta por um único tipo de microrganismo. (A)</p> Signup and view all the answers

A coloração de Gram é usada para identificar e classificar fungos.

<p>False (B)</p> Signup and view all the answers

Qual é a principal diferença entre bactérias Gram-positivas e Gram-negativas?

<p>A camada da parede celular.</p> Signup and view all the answers

As bactérias Gram-positivas aparecem na coloração de Gram com a cor __________.

<p>roxas</p> Signup and view all the answers

Qual método de sementeira envolve o uso de uma zaragatoa para cobrir a superfície do meio de cultura?

<p>Em toalha (D)</p> Signup and view all the answers

O método de esgotamento por estria usa toda a cultura para separar as células.

<p>True (A)</p> Signup and view all the answers

Associe os tipos de bactérias à sua característica principal:

<p>Gram-positivas = Camada espessa de peptidoglicano Gram-negativas = Camada fina de peptidoglicano e membrana externa</p> Signup and view all the answers

O primeiro passo para obter uma cultura pura é __________ a partir de uma colónia individualizada.

<p>isolar</p> Signup and view all the answers

Flashcards

Meios sólidos

Meios de cultura que contêm agentes solidificantes, como o ágar, permitindo o crescimento de colônias visíveis.

Meios líquidos

Meios de cultura que não possuem agentes solidificantes e são usados para o cultivo em suspensão.

Meios gerais

Meios de cultura ricos em nutrientes que permitem o crescimento de uma ampla variedade de microrganismos.

Meios seletivos

Meios de cultura que contêm substâncias que favorecem o crescimento de certos microrganismos enquanto inibem outros.

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Meios diferenciais

Meios de cultura que permitem distinguir entre microrganismos com base nas suas características metabólicas.

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Ágar-sangue

Meio que fornece nutrientes adicionais para o cultivo de microrganismos, especialmente os de crescimento lento e difíceis de cultivar.

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Hemólise

Capacidade de algumas bactérias de quebrar glóbulos vermelhos.

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Alfa-hemólise

Hemólise que causa uma coloração esverdeada ao redor da colônia.

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Cultura pura

Cultura composta por um único tipo de microrganismo, todos originários da mesma célula, com características idênticas.

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Isolamento de colónias

Processo de separar as células da amostra para obter colónias individuais.

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Sementeira

Transferir uma cultura microbiana para um novo meio de cultura.

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ESGOTAMENTO - Por estria

Método de semeadura que espalha a amostra em traços sucessivos para criar colónias individuais.

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ESGOTAMENTO - Com espalhador de vidro

Método de semeadura que utiliza um espalhador de vidro para espalhar a amostra uniformemente no meio de cultura.

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Em toalha (com zaragatoa)

Método de semeadura que utiliza uma zaragatoa para cobrir a superfície do meio com células, criando um tapete de células.

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Coloração de Gram

Método de coloração que identifica e classifica bactérias com base na estrutura da parede celular.

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Camada espessa de peptidoglicano (Gram-positivas)

Camada espessa de peptidoglicano nas bactérias Gram-positivas que retém o corante violeta cristal.

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Esterilização

Eliminar completamente todos os microrganismos, tornando um objeto ou ambiente estéril.

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Desinfecção

Reduzir a população de microrganismos a um nível seguro e controlado.

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Autoclave

Um método de esterilização que utiliza vapor de água sob alta pressão e temperatura.

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Estufa

Um método de esterilização que utiliza ar quente seco para eliminar microrganismos.

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Pasteurização

Um processo que utiliza calor para reduzir a carga microbiana no leite, melhorando sua segurança e conservabilidade.

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Ultrapasteurização (UHT)

Um método de esterilização que utiliza altas temperaturas por curtos períodos para eliminar todos os microrganismos e prolongar a validade do produto.

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Radiação Gama

Um método de esterilização que utiliza radiação gama para eliminar microrganismos e esporos, ideal para materiais plásticos.

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Altas Pressões

Um método para reduzir a carga microbiana em alimentos, principalmente líquidos, utilizando altas pressões e temperatura ambiente.

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Bactérias Gram-positivas

As bactérias Gram-positivas retêm a cor roxa do violeta cristal durante o processo de descoloração com álcool, devido à presença de uma espessa camada de peptidoglicano na sua parede celular.

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Bactérias Gram-negativas

As bactérias Gram-negativas perdem a cor roxa do violeta cristal durante o processo de descoloração com álcool, devido à presença de uma camada fina de peptidoglicano na sua parede celular e de uma membrana externa de lipopolissacarídeos.

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Mordente (Lugol)

O mordente é um composto químico que ajuda a fixar o primeiro corante (violeta cristal) à parede celular das bactérias.

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Diferenciador (Álcool ou Acetona)

O diferenciador é um composto químico que remove o primeiro corante (violeta cristal) das bactérias Gram-negativas, mas não das Gram-positivas.

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Segundo Corante (Safranina)

O segundo corante, a safranina, cora as bactérias Gram-negativas de rosa, enquanto as Gram-positivas permanecem roxas.

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Teste da Catalase

O teste da catalase é um teste bioquímico usado para identificar se as bactérias produzem a enzima catalase, que decompõe o peróxido de hidrogénio em água e oxigénio.

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Meio de Cultura Mac Conkey

O meio de cultura Mac Conkey é seletivo para o crescimento de bactérias Gram-negativas e diferencial para a fermentação da lactose.

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DNA polimerase termostável

É uma enzima que copia DNA e pode funcionar em temperaturas elevadas, essenciais para a Reação em Cadeia da Polimerase (PCR).

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Primer forward e reverse

Pequenos pedaços de DNA que servem como pontos de partida para a replicação do DNA. O primer forward se move em uma direção, enquanto o reverse se move na direção oposta.

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DNA molde

É o DNA que será copiado durante a reação.

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Testes de suscetibilidade aos antimicrobianos

Método para determinar a eficácia de antibióticos e outros agentes antimicrobianos contra microrganismos.

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Método de Difusão em Disco (Kirby-Bauer)

Método que utiliza discos com antimicrobianos para determinar a sensibilidade de uma bactéria. A área ao redor do disco onde as bactérias não crescem indica se a bactéria é sensível ou resistente.

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Microdiluições

Método que utiliza diluições sucessivas do antibiótico para determinar a menor quantidade necessária para inibir o crescimento da bactéria (CMI).

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Método das fitas (E-test)

Método que utiliza fitas com gradientes de antimicrobianos para determinar a concentração mínima inibitória (CMI) e, em alguns casos, a concentração mínima bactericida (CMB).

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Antibióticos

Substâncias produzidas por organismos vivos para matar ou inibir o crescimento de outros microrganismos.

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Teste Oxidase

Um teste que identifica a presença da enzima citocromo c oxidase, presente em bactérias aeróbias. As bactérias Gram negativas oxidase-positivas são capazes de reduzir o citocromo c, na sua forma oxidada, usando oxigénio molecular.

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Galeria API

Um sistema de identificação bacteriana que utiliza uma série de testes bioquímicos para determinar o perfil metabólico das bactérias.

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Sequenciação do gene 16S

A técnica de sequenciação do gene do RNA ribossomal 16S é uma ferramenta essencial na identificação de bactérias. Este gene é altamente conservado entre as bactérias, mas com regiões variáveis que permitem a diferenciação entre espécies.

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Identificação Molecular

Método de identificação de microrganismos e antimicrobianos que utiliza a amplificação de DNA através da técnica de PCR (Reação em Cadeia da Polimerase).

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Reação em Cadeia da Polimerase (PCR)

Reação em cadeia da polimerase (PCR) é uma técnica que copia e amplifica seletivamente sequências específicas de DNA. Permite a criação de milhões de cópias de uma sequência de DNA específica, tornando possível o estudo e identificação de microrganismos.

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dNTPs

Os dNTPs, ou desoxinucleotídeos trifosfato, são os blocos de construção do DNA. Eles são os monómeros que se ligam para formar a cadeia de DNA.

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MgCl2

O MgCl2 é um íon metálico essencial na PCR. Ele estabiliza a estrutura do DNA e é necessário para a atividade da DNA polimerase durante a replicação do DNA.

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DNA Polimerase

A DNA polimerase é uma enzima chave na PCR. Ela sintetiza novas cadeias de DNA usando os dNTPs e um molde de DNA. Ela copia a sequência de DNA original, criando milhões de cópias.

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Study Notes

Prática de Microbioma Humano - Esterilização e Desinfecção

  • Esterilização: Eliminação todos os microorganismos, incluindo esporos. Métodos incluem:

    • Autoclave: Usado para esterilizar, mas não pode ser usado com plásticos.
    • Estufa: Usa-se para esterilizar soluções.
    • Filtração: Utilizada para soluções não resistentes a altas temperaturas.
    • Câmara de fluxo laminar com UV: Criada ambientes estéreis, esteriliza superfícies e filtra o ar. Substitui-se o fluxo laminar com bico de bunsen sem a câmara.
    • Radiação Gama: Usado para esterilizar plásticos, penetra as superfícies e elimina microorganismos.
    • Radiação UV: Esteriliza apenas superfícies, não penetra.
  • Desinfecção: A redução do número de microorganismos. Métodos incluem:

    • Álcool: Serve como antisséptico para tecidos vivos e desinfetante para superfícies. É menos agressivo que desinfetantes para garantir não causar danos aos tecidos. Não esteriliza completamente.

Métodos de Preservação de Alimentos

  • Pasteurização: Aquecimento do leite a temperaturas moderadas para reduzir os microrganismos, mas não elimina todas as bactérias. O leite pode contaminar caso fique exposto ao ar por muitos dias ou não esteja em condições estéreis.
  • Ultrapasteurização (UHT): Aquece o leite a altas temperaturas por alguns segundos, eliminando quase todos os microrganismos, e prolongando a validade.
  • Tindalização: Aquecimento e arrefecimento em ciclos para eliminar microrganismos e esporos. Usada em conservas.
  • Altas Pressões: Usado para esterilizar alimentos como sumos, preservando o sabor e nutrientes, reduz os microrganismos sem o uso de calor.

Meios de Cultura

  • Meios sólidos: Contém agentes solidificantes (como ágar) para o crescimento de colônias visíveis.
  • Meios líquidos: Não contêm agentes solidificantes, usados para cultivos em suspensão.

Meios Específicos

  • Meios seletivos: Contêm substâncias que favorecem o crescimento de certos microrganismos enquanto inibem outros (ex: MacConkey para enterobactérias).
  • Meios diferenciais: Permitem distinguir entre microrganismos com base nos seus metabolismos (ex: ágar sangue, que mostra a hemólise).

Coloração de Gram

  • Gram Positivo: Possui uma parede celular espessa, mantendo o violeta cristal, deixando a bactéria roxa.
  • Gram Negativo: A parede celular é mais fina, permitindo que o corante saia, e então a coloração torna-se rosa após a safranina.

Identificação Bioquímica

  • Gram Positivo (Teste Catalase): Usa-se enzima catalase para descobrir se a bactéria desdobra o peróxido de hidrogênio em água e oxigênio.
  • Gram Negativo (Teste Oxidase): Usado para identificar bactérias que usam oxigênio como aceptor final de elétrons.

Extração e Amplificação de DNA

  • Extração de DNA: Processo para isolar o DNA das células.
  • Amplificação de DNA (PCR): Técnica para copiar segmentos específicos de DNA para análise posteriores. Necessário de um molde de DNA, primers forward e reverse, DNA polimerase termostável e dNTPs (componentes básicos do DNA).

Testes de Suscetibilidade aos Antimicrobianos

  • Método de Difusão em Disco (Kirby-Bauer): Discos de antimicrobianos são colocados na placa e a zona de inibição (onde não crescem bactérias) indica a sensibilidade ou resistência da bactéria ao antibiótico.

  • Microdiluições: Determinação da concentração mínima inibitória (CMI) ou concentração mínima bactericida (CMB) de um antimicrobiano.

  • Método das fitas: Utiliza fitas com gradientes de antibióticos para determinar a CMI.

  • Antimicrobianos: Substâncias que destroem ou inibem o crescimento de outros microrganismos. Podem ser bactericidas ou bacteriostáticos.

  • Bactericidas: Matam as bactérias.

  • Bacteriostáticos: Inibem o crescimento das bactérias.

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