Istologia - Lezione 08/10/2024

Istologia - Lezione 08/10/2024

• L'organismo umano e animale è organizzato gerarchicamente, partendo dalle cellule, poi tessuti, organi e apparati per arrivare all'organismo completo.
• Oggetti inferiori a 1 mm sono visibili al microscopio ottico (immagini colorate).
• Oggetti inferiori a 100 nm sono visibili al microscopio elettronico (immagini in bianco e nero).
• Il potere di risoluzione è la minima distanza tra due punti che possono essere distinti, e variano a seconda dello strumento utilizzato (occhio umano, microscopio ottico, microscopio elettronico).
• La formula di Abbe per il potere di risoluzione (R) è: R = λ / (n sin α), dove λ è la lunghezza d'onda della luce, n è l'indice di rifrazione del mezzo tra la lente e il preparato e α è l'apertura della lente.
• La profondità di campo è la distanza tra due piani a fuoco.
• Lo spessore della membrana plasmatica è di 7-10 nm.

Altri tipi di microscopi

• Stereomicroscopio: la luce viene trasmessa o riflessa per visualizzare campioni.
• Microscopio in campo scuro: evidenzia oggetti che diffondono la luce.
• Microscopio a contrasto di fase: sfrutta le differenze di rifrazione per visualizzare oggetti a basso contrasto.
• Microscopio a fluorescenza: mostra le sostanze fluorescenti.
• Microscopio confocale: ricostruisce tridimensionalmente l'immagine utilizzando un fascio laser.
• Microscopio elettronico a trasmissione: usa elettroni per visualizzare campioni sottili, colorati con oro o osmio.

Le varie fasi di preparazione dei tessuti

• Prelievo di tessuto: prelevare il materiale biologico il più velocemente possibile.
• Fissazione: bloccare la degenerazione dei tessuti utilizzando alte/basse temperature o sostanze chimiche.
• Disidratazione: sostituire l'acqua nel tessuto con un solvente.
• Inclusione: indre il tessuto in paraffina o resina.
• Taglio: tagliare il campione in sezioni sottili usando un microtomo o criostato.
• Colorazione: colorare il campione in soluzione acquosa per migliori evidenze.

Scala per sparaffinare

• Esoina: colorante acido per il citoplasma
• Ematossilina: colorante per i componenti acidi
• Alcool etilico
• Xilolo

Colorazioni

• Chimiche: il colorante si lega al substrato.
• Fisiche: precipitazione metalli su strutture biologiche.
• Chimico-fisiche: assorbimento elettrico.
• Carboidrati: (P.A.S)
• Lipidi: (O.R.O)

La cellula

• La membrana plasmatica è un doppio strato fosfolipidico che delimita la cellula.
• I lipidi di membrana includono i fosfolipidi e il colesterolo per regolarne la fluidità.
• Le proteine di membrana possono essere intrinseche o estrinseche, e hanno varie funzioni come il trasporto, il collegamento o i recettori.

Trasporti transmembranari

• La membrana è permeabile a molecole non cariche come O2, CO2 e steroidi.
• La membrana è debolmente permeabile a molecole come H2O e urea.
• La membrana è impermeabile a molecole cariche come ioni e glucosio.
• Il trasporto di sostanze secondo gradiente di concentrazione non richiede energia.
• Diffusione semplice e facilitata
• Osmosi