Introducción a la Histología

Introducción a la Histología

• La histología es el estudio de la anatomía microscópica de las células y tejidos humanos, animales y vegetales, y cómo se organizan para la constitución de los órganos.
• La histopatología es el estudio microscópico del tejido "enfermo".

Célula

• La célula es la unidad anatómica, funcional y genética de los seres vivos.
• Posee la capacidad de realizar las funciones vitales: respiración, nutrición, relación, reproducción.
• Características de la célula:
  • Autorreplicarse, manteniendo la información genética.
  • Realizar la síntesis de macromoléculas para su propia estructura.
  • Sintetizar y secretar moléculas que le permiten interactuar con el medio.
  • Obtener energía para sus procesos vitales.
  • Digiere sustancias que toma del medio ambiente o de sus propios componentes.
  • Realizar procesos catabólicos.
  • Moverse (más notorio en ciertos tipos celulares).
  • Respirar aeróbica y anaeróbicamente.

Clasificación de las células

• La forma de la célula está determinada básicamente por su función.
• Existen variedades de formas, como:
  • Esféricas
  • Planas
  • Cúbicas
  • Prismáticas
  • Estrelladas
  • Bicóncavas u ovaladas
  • Alargadas o fusiformes
  • Filiformes

Tejidos

• Un tejido es un conjunto de células especializadas unidas para realizar una función específica.
• Poseen dos componentes: células y matriz extracelular.
• La matriz extracelular actúa como soporte de las células, contiene el fluido que transporta los nutrientes para las células, elimina los productos de secreción y desecho, y es producida localmente por las células.
• Durante el desarrollo del tejido, las células y su matriz se especializan en su función.
• Los órganos son formados por la combinación de los tejidos.

Estudio de los tejidos

• El estudio de los tejidos se puede hacer mediante:
  • Microscopía óptica
  • Microscopía electrónica
  • Métodos moleculares
• Preparación del tejido:
  1. Fijación: para conservar la estructura de los tejidos y órganos.
  2. Inclusión: inclusión en parafina para su posterior corte.
  3. Tinción: se utiliza para poder observar al microscopio.

Técnicas histológicas y citológicas

• Tinciones:
  • Fundamento: unión específica de colorantes a los tejidos.
  • La tinción más utilizada es la Hematoxilina & Eosina.
• Inmunohistoquímica:
  • Fundamento: reacción específica entre antígeno y anticuerpo.
  • Permite detectar in situ componentes celulares y extracelulares.
• Hibridación in situ:
  • Fundamento: capacidad de una molécula monocatenaria de interactuar con secuencias complementarias conocidas.
  • Permite localizar el ARN mensajero o el ADN.

Microscopía

• Microscopio óptico:
  • El poder o límite de resolución (LR) es la distancia mínima a la que se pueden discriminar dos puntos.
  • La resolución no solo depende del sistema óptico, sino también de la longitud de onda, calidad de fijación, del corte e intensidad de tinción.
• Microscopio electrónico:
  • Permite observar detalles celulares más finos que el microscopio óptico.
• Microscopía virtual:
  • Permite la observación de imágenes histológicas sin la necesidad de un microscopio tradicional.### Aumentos en Microscopía Óptica
• Los aumentos de los objetivos más comunes son 10x, 20x, 40x y 100x.
• El uso de objetivos de 100x requiere un aceite de inmersión entre el objetivo y la muestra para reducir la refracción de la luz y obtener imágenes más nítidas.

Componentes del Microscopio Óptico

• La platina es la plataforma donde se coloca el portaobjetos con el tejido, y posee un dispositivo para sujetar el portaobjetos que se puede desplazar en el plano de la platina.
• La rueda de macro y micrométrica se utiliza para variar la distancia entre la muestra y el objetivo, permitiendo el enfoque de la muestra.
• El condensador es una lente que concentra y focaliza la luz proveniente de la fuente sobre la sección de tejido.
• La lámpara proporciona la luz que atraviesa la sección del tejido.

Cálculo del Aumento

• El aumento total que permite un microscopio óptico se calcula multiplicando la magnificación que produce el objetivo por la que produce el ocular.

Artefactos en Microscopía Óptica

• Un artefacto es una imperfección en la preparación causada por alteraciones en todo el procesamiento previo.

Microscopio Electrónico

• El microscopio electrónico se utiliza para observar estructuras debajo del límite de resolución del microscopio óptico.
• Hay dos tipos de microscopio electrónico: de transmisión (MET) y de barrido (MEB).
• En histología, el microscopio electrónico permite ver la ultraestructura celular (orgánulos, membranas, etc.).

Histología y Tejidos

• El parénquima es un conjunto de células responsable de la función del tejido, mientras que el estroma se compone de células con función de soporte.
• La observación de tejidos se puede hacer mediante microscopía óptica, microscopía virtual, microscopía electrónica y métodos moleculares.

Preparación del Tejido

• La preparación del tejido implica varias etapas: fijación, inclusión, corte y tinción.
• La fijación se utiliza para conservar la estructura de los tejidos y órganos, abolir el metabolismo celular, impedir la autolisis, destruir microorganismos patógenos y endurecer el tejido.
• El fijador más común es la formalina diluida (formol) con buffers.
• La inclusión en parafina se utiliza para su posterior corte en el microtomo.
• El corte se realiza en películas delgadas (entre 3-10 μm) para microscopía óptica y menos de 1 μm para microscopía electrónica.
• La tinción se utiliza para poder observar al microscopio, y se pueden utilizar diferentes tinciones para destacar diferentes componentes del tejido.

Tinciones

• La tinción más común es la hematoxilina y eosina.
• La hematoxilina es un colorante básico que se une a estructuras ácidas de la célula (núcleo) y se colorea de morado.
• La eosina es un colorante ácido que se une a estructuras básicas de la célula (citoplasma) y se colorea de rosa.
• Otros colorantes se utilizan para destacar diferentes componentes del tejido, como lípidos, proteínas, etc.

Técnicas Histquímicas y Citoquímicas

• La técnica de inmunofosfatasa alcalina se utiliza para detectar la presencia de proteínas específicas en tejidos.
• La inmunoperoxidasa se utiliza para detectar la presencia de proteínas específicas en tejidos.
• La inmunofluorescencia se utiliza para detectar la presencia de proteínas específicas en tejidos y se pueden utilizar colorantes fluorescentes.

Hibridación in situ

• La hibridación in situ es una técnica que localiza el ARN mensajero o el ADN mediante la hibridación con sondas de nucleótidos marcadas con isótopos radioactivos o biotina.
• La técnica de hibridación in situ con fluorescencia se utiliza para detectar la presencia de ARN o ADN en tejidos.

Microscopía

• La microscopía se utiliza para observar estructuras en tejidos y se puede clasificar en microscopía óptica, microscopía electrónica y microscopía virtual.
• El microscopio óptico es el más común y se utiliza para observar estructuras en tejidos hasta un límite de resolución.
• El microscopio electrónico se utiliza para observar estructuras debajo del límite de resolución del microscopio óptico.
• La microscopía virtual se utiliza para observar estructuras en tejidos mediante imágenes digitales.