Histologie : Science Des Tissus

Histologie : Science Des Tissus

• L'histologie, signifiant "science des tissus", étudie la structure des tissus.
• Le concept de tissu a été introduit au XVIIIème siècle par Xavier Bichat, à partir de dissections anatomiques à l'œil nu.
• Le développement du microscope optique au XIXème siècle a permis de perfectionner les techniques histologiques.
• Le microscope électronique, apparu dans les années 1960, a révolutionné l'observation des cellules et tissus.
• L'histologie est essentielle pour les étudiants en médecine dentaire, médecine et biologie.

Techniques d'Étude en Histologie

• L'examen histologique implique l'observation et l'interprétation de structures microscopiques.
• Quatre étapes cruciales :
  • Le choix du matériel
  • La technique de visualisation des structures
  • La production d'images
  • L'interprétation des images
• Différents types de prélèvements :
  • Biopsies (tissus de petite taille)
  • Exérèse partielle ou complète (chirurgie)
  • Frottis buccaux (test de Barr et ADN)
  • Frottis cervico-utérins (dépistage)
  • Ponctions de liquides (pleural, ascite, péricardique)

Préparation des Échantillons

• Des techniques spécifiques sont utilisées pour rendre visibles les structures à observer.
• Pour l'observation en microscopie, les coupes subissent plusieurs étapes:
  • Fixation
  • Inclusion
  • Coupes
  • Étalement
  • Colorations
  • Montage

Fixation

• La fixation prévient la décomposition post mortem et la digestion tissulaire par les enzymes ou bactéries.
• Elle conserve l'architecture des tissus et doit être réalisée le plus rapidement possible.
• La quantité de fixateur utilisée doit être dix fois supérieure au volume du tissu.
• Liquides fixateurs pour microscopie optique :
  • Formol (pénètre rapidement, fixe lentement)
  • Liquide de Boin (mélange de formol et d'acide picrique, pénètre lentement, fixe rapidement)
• Liquides fixateurs pour microscopie électronique :
  • Glutaraldéhyde
  • Acide osmique

Inclusion

• Les tissus subissent ensuite une inclusion.
• Milieux d'inclusion pour microscopie optique :
  • La paraffine est le milieu le plus utilisé.
  • Le prélèvement est déshydraté par des bains d'alcool de degré croissant.
  • Après imprégnation par le toluène, le tissu est placé dans de la paraffine fondue puis refroidi pour durcissement.
• Milieux d'inclusion pour microscopie électronique :
  • Araldite
  • Épon

Coupes

• Après l'inclusion, les blocs sont coupés.
• Pour la microscopie optique, un microtome permet d'obtenir des coupes de 2 à 5 µm d'épaisseur, déposées sur des lames de verre.
• Pour la microscopie électronique, un ultramicrotome permet d'obtenir des coupes semi-fines de 0,5 à 1 µm d'épaisseur.

Colorations

• Des colorations sont appliquées pour accentuer les contrastes et distinguer les différents éléments des tissus.
• Avant la coloration, la paraffine est éliminée par:
  • Déparaffinage (bains de toluène)
  • Réhydratation (bains d'alcool à degré décroissant)
  • Rinçage à l'eau distillée
• Colorants de routine :
  • Hématéine (colore les noyaux en violet)
  • Éosine (colore le cytoplasme en rose)
  • Safran (colore les fibres de collagène en jaune)
• Les coupes colorées sont montées entre lame et lamelle avec une résine synthétique.

Observation Microscopique

• En raison de la petitesse des cellules, des microscopes sont utilisés pour l'observation:
  • Microscope optique : pouvoir séparateur de 0,2 µm.
  • Microscope électronique : pouvoir séparateur de 0,2 nm.
  • Pouvoir séparateur de l'œil humain : 0,2 mm.
• L'épaisseur des échantillons varie selon le type de microscope :
  • Microscopie optique : 2 à 5 µm.
  • Microscopie électronique : 0,5 à 1 µm.
• Types de microscopes utilisés :
  • Microscope optique (microscope photonique) avec la lumière visible.
  • Microscope électronique à transmission et à balayage (faisceaux d'électrons).
  • Microscopes électroniques à laser.
• Il est possible de produire des images des préparations microscopiques.

Classification des Tissus

• Les tissus conjonctifs sont composés de cellules et de matrice extracellulaire :
  • Fibres
  • Substance fondamentale
• Types de tissus conjonctifs :
  • Tissu conjonctif proprement dit : cellules variées, fibres, substance fondamentale semi-solide, richement vascularisé.
  • Tissu cartilagineux : consistance solide et élastique, rôle de soutien.
  • Tissu osseux : consistance solide et rigide, forme le squelette.
• Tissu sanguin : solution aqueuse (plasma) contenant des globules et des plaquettes.
• Tissus musculaires : cellules appelées fibres musculaires.
  • Tissu musculaire strié squelettique (contractions volontaires).
  • Tissu musculaire strié myocardique (contractions involontaires).
  • Tissu musculaire lisse (contractions involontaires).
• Tissu nerveux : réseau de communication spécialisé dans la perception et le transport de l'influx nerveux.

Schéma Résumé

• [Schéma inclus dans le document original]