Histologie: Chapitre 3

• Chapitre 3 présente une introduction à l'histologie.
• L'index comprend la définition et les types de tissus, l'étude des tissus, l'obtention, la fixation, la coloration et l'observation.

Niveaux D'organisation

• Le niveau chimique implique des atomes qui se combinent pour former des molécules.
• Au niveau cellulaire, les molécules forment des organites.
• Au niveau tissulaire, des cellules similaires et les matériaux environnants forment des tissus.
• Au niveau des organes, différents tissus se combinent pour former des organes, comme la vessie.
• Le niveau du système organique implique des organes qui constituent un système organique.
• Le niveau organisme implique des systèmes organiques constituant un organisme.

Définition et Types de Tissus

• L'histologie cherche à comprendre la structure (microanatomie) des cellules, des tissus et des organes, et à corréler la structure avec la fonction.
• Les tissus consistent en des groupes organisés de cellules qui fonctionnent collectivement pour remplir des fonctions spécifiques.
• Les tissus sont composés de cellules et d'une matrice extracellulaire (MEC), entre lesquelles il existe une interaction importante.
• L'épithélium se compose de cellules juxtaposées avec une MEC minimale (+), assurant le revêtement et la sécrétion.
• Le tissu conjonctif, avec une grande variété de cellules et une MEC abondante (++++), offre soutien et protection.
• Le tissu musculaire, avec des cellules allongées et contractiles et une MEC modérée (+++), permet le mouvement.
• Le tissu nerveux, avec des cellules à prolongements et une faible MEC (+), transmet les influx nerveux.
• Les tissus épithéliaux, conjonctifs, musculaires et nerveux sont définis par leurs caractéristiques morphologiques et fonctionnelles.

L'Étude des Tissus

• Les phases de traitement des échantillons comprennent l'obtention du matériel, la fixation, la coloration et l'observation.
• L'obtention du matériel se fait par biopsie, nécropsie ou prélèvement sanguin, et nécessite parfois de couper le tissu avec un microtome.
• La fixation vise à éviter la dégradation du tissu, par exemple avec des alcools en microscopie optique.
• La coloration permet de générer des contrastes et de mettre en valeur les différentes parties du tissu observé, utilisant des colorants qui colorent différemment les structures tissulaires.
• L'observation se fait par microscopie optique (OM) ou électronique (EM), où le pouvoir de résolution est le facteur le plus important.
• Pour observer au microscope, il faut obtenir des coupes fines, infiltrer les échantillons dans des matrices comme la paraffine par un processus d'inclusion.
• On sectionne ensuite dans des équipements tels que le microtome/cryostat.
• La fixation est effectuée pour empêcher la digestion des tissus par les enzymes et les bactéries, et pour maintenir la structure et la composition moléculaire des tissus.
• Elle est réalisée avec des fixateurs chimiques tels que le méthanol, le formaldehyde, le glutaraldéhyde, le tétroxyde d'osmium.
• Une coloration histologique est une technique utilisée pour mettre en évidence les structures cellulaires et tissulaires, améliorant la visibilité au microscope et fondamentale en histologie, pathologie et recherche biomédicale.

Coloration, suite

• La classification des colorations comprend les colorations générales ou basiques, différentielles, spécifiques, et les colorants fluorescents.
• Les colorations basiques, comme l'hématoxyline, ont une charge positive et colorent les structures cellulaires acides, comme les phosphates des acides nucléiques (noyau), en bleu (basophiles).
• Les colorations acides, comme l'éosine, ont une charge négative et colorent les structures cellulaires basiques, comme le cytoplasme, en rose (acidophiles); elles sont utilisées pour le diagnostic de maladies et les études structurelles.
• La coloration de Gram différencie les bactéries en Gram positif (violet) et Gram négatif (rouge), ce qui est important en microbiologie clinique.
• La coloration de Ziehl-Neelsen identifie les bactéries acido-résistantes, comme Mycobacterium tuberculosis.
• La coloration PAS (Acide Périodique-Schiff) met en évidence les glucides et le glycogène dans les tissus, utile pour diagnostiquer les maladies du foie et des reins.
• Le trichrome de Masson différencie le collagène (vert ou bleu) et les muscles (rouge), utilisé pour les études de fibrose et de tissu conjonctif.
• L'immunofluorescence utilise des anticorps marqués au fluorochrome pour le diagnostic des maladies auto-immunes et la virologie.
• La coloration DAPI colore l'ADN nucléaire en bleu, se liant fortement aux régions riches en adénine et en thymine, utilisée dans les études cellulaires et génétiques.

Observation au Microscope

• Le pouvoir de résolution est la capacité d'un objectif ou d'un système optique à produire des images distinctes d'objets proches, équivalente à la distance minimale pour les individualiser.
• Un pouvoir de résolution élevé signifie une plus grande richesse des détails, et dépend du système optique, de la longueur d'onde de la source lumineuse, de l'épaisseur de l'échantillon, et de la fixation/coloration.
• La microscopie optique utilise la lumière visible, l'air comme milieu, le verre pour les lentilles, et l'absorption différentielle de la lumière pour le contraste, avec un grossissement maximal de 1 000 à 1 500 fois et une résolution de 0,2 µm.
• La microscopie électronique utilise un faisceau d'électrons, le vide comme milieu, des lentilles électromagnétiques, et la dispersion des électrons pour le contraste, avec un grossissement maximal de 150 000 fois (MET) ou 20 000 fois (MEB) et une résolution de 0,1 nm (MET) ou 10 nm (MEB).