Herpes Simplex: Recurrent Infection Mechanisms

Cultura cellulare

• La cultura cellulare primaria può durare 30-50 passaggi, poi le cellule entrano in senescenza replicativa o muoiono.
• Le cellule della coltura primaria cessano di moltiplicarsi e vengono prelevate dopo 48-72h per ottenere la coltura secondaria.
• Le linee cellulari continue sono un unico ceppo di riproduzione illimitata in vitro, come ad esempio le HELA.

Riconoscimento della moltiplicazione virale

• La moltiplicazione virale nelle colture di cellule può essere riconosciuta attraverso:
  • ECP (effetti citopatici): cambiamenti cellulari, lisi, formazione di inclusioni, formazione di sincizi, vacuolizzazione citoplasmatica.
  • Comparsa di proteine codificate dai virus, come ad esempio emoagglutine del virus influenzale, rivelate mediante antisieri.
  • Interferenza, evidenziazione di acido nucleico virus-specifico, formazione di corpi inclusi.

Purificazione e identificazione dei virus

• La purificazione e identificazione dei virus avviene attraverso tre passaggi:
  1. Concentrazione delle particelle virali da grandi volumi di materiale da analizzare.
  2. Precipitazione con solfati di ammonio, etanolo, polietilenglicole o ultrafiltrazione.
  3. Riattivazione del virus latente attraverso stress immunosoppressione, raggi UV o fattori ormonali.

Patogenesi dell'Herpes Simplex

• L'ingresso del virus avviene tramite contatto diretto attraverso le ferite, infettando cellule epiteliali e mucose o linfociti.
• La patogenesi dell'Herpes Simplex comprende:
  • Alterazioni anatomo-patologiche: necrosi delle cellule, azione citolitica del virus.
  • Modificazioni istopatologiche: rigonfiamento delle cellule infette, produzione di corpi inclusi intranucleari, condensazione della cromatina nucleare.
  • Guarigione: riassorbimento del liquido con formazione di croste, sostituzione delle vescicole con ulceri poco profondi.

Diagnosi

• La diagnosi dell'Herpes Simplex può essere effettuata attraverso:
  • Colorazione istochimica su cellule prelevate alla base della lesione.
  • Immunofluorescenza con anticorpi tipo-specifici.
  • Isolamento del virus dalle lesioni virali mediante crescita in coltura cellulare.
  • PCR/Real Time PCR.
  • Sierologia: ricerca di anticorpi anti-HSV nel sangue.

Terapia

• La terapia dell'Herpes Simplex può essere effettuata attraverso l'uso di antibiotici analoghi dei nucleosidi, come ad esempio l'Aciclovir, che è selettivo per il virus e non tossico.
• Altri farmaci con meccanismo d'azione simile all'Aciclovir sono il Valaciclovir, il Penciclovir e il Famciclovir.

Immunità e anticorpi

• Gli anticorpi sono importanti per limitare l'infezione durante la fase viremica.
• L'immunità cellulo-mediata è importante per controllare il decorso dell'infezione e la risoluzione della malattia.

Manifestazioni cliniche della Varicella e dell'Herpes Zoster

• La Varicella è una malattia non grave dell'infanzia, con incubazione di 1-3 settimane.
• La forma subclinica è rara, ma la diffusione dell'infezione asintomatica può essere influenzata da vari fattori.
• L'infezione attiva può manteneri per lunghi periodi con eliminazione del virus attraverso la saliva e le urine.

Proprietà del virus

• L'Herpesvirus ha un diametro maggiore (fino a 250 nm) e un genoma più grande (240 Kbp).
• La capsula è isosaedrica di 162 capsomeri, con un tegumento elettrodenso e un envelope con le glicoproteine gB e gH.
• Il virus si replica solo in fibroblasti umani molto lentamente (8-14 giorni).

Epidemiologia

• Il CMV può essere trasmesso per via congenita, orale, sessuale, per trasfusioni o trapianti d'organo.
• Il virus può essere presente in urine, sangue, saliva, lacrime, feci, liquido seminale, liquido amniotico e tessuti utilizzati per trapianti.

Il quiz spiega come si interrompe la latenza e si ha riattivazione dell'Herpes Simplex e i meccanismi patogenetici dell'HSV-1 e HSV-2. Vengono trattati anche i cambiamenti anatomici e le lesioni nella cute.