Extracción y Purificación de Ácidos Nucleicos

Proceso de aislar y obtener ácidos nucleicos (ADN y ARN) de una muestra biológica, como sangre, tejidos o cultivos celulares

Eliminación de impurezas o contaminantes no deseados y no requeridos en la muestra de ácidos nucleicos, permitiendo su aislamiento puro.

Paso inicial y necesario para la extracción de ácidos nucleicos, que depende del tipo de muestra (sangre, tejido, etc.).

Rompimiento de los glóbulos rojos (eritrocitos) para liberar el material contenido en su interior; es una etapa crucial en el pretratamiento de la sangre, especialmente para extracción de ADN.

Muestra de sangre a la que se le ha añadido un anticoagulante (EDTA, heparina o citrato de sodio) para evitar la coagulación.

Para evitar la degradación óptima del ADN, es necesario extraer el ADN de sangre totalmente anticoagulada dentro de las 24 h posteriores a su obtención.

Proteína de la sangre, que transporta oxígeno. Puede interferir en posteriores estudios por ejemplo de ADN.

Proceso para remover parafina de tejidos FFPE (Formalin-Fixed Paraffin-Embedded) para extraer ácidos nucleicos.

Obtener ácidos nucleicos (DNA y RNA) de células o tejidos, liberándolos de las estructuras celulares.

Tejidos preservados en formalina y embebidos en parafina.

Proceso que fragmenta y mezcla las muestras biológicas para la extracción de ADN.

Metodología para recolectar muestras de bacterias y levaduras para extracción de acido nucleico.

Solución tampón para bacterias y levaduras (TRIS, EDTA, glucosa).

Obtención de células de la mucosa oral para análisis, por raspado, enjuague o saliva.

Muco secretado por las vías respiratorias que se usa como muestra

Agente mucolítico usado para fluidificar el esputo.

Utilizado para descontaminar muestras de micobacterias.

Proceso de lograr una distribución uniforme de los componentes en una muestra.

Desintegración de las células para liberar su contenido.

Enzima que degrada el ARN.

Proceso de separación de ácidos nucleicos (ADN y ARN) de otras sustancias en un lisado.

Líquidos que sirven para separar proteínas, lípidos y otros compuestos del ADN en la purificación.

Parte superior de la mezcla de solventes que contiene ácidos nucleicos.

Parte inferior de la mezcla que contiene lípidos y proteínas.

Método para separar y purificar ADN, usando alcohol para precipitar el ADN.

Sal que ayuda en la neutralización de la carga negativa del ADN para la precipitación.

Solución de etanol utilizada para lavar el ADN precipitado y eliminar impurezas.

Técnica para separar ADN plasmídico de ADN cromosómico bacteriano mediante desnaturalización y renaturalización selectiva.

Proceso que sigue a la lisis alcalina, donde se agrega una solución ácida para separar el ADN plasmídico del cromosómico e inactivar el detergente.

Molécula circular de ADN extracromosómico en bacterias, usada para clonar genes y que se renaturaliza.

Enzima que degrada el ARN, necesaria para purificar el ADN de la contaminación por ARN.

Proceso para aislar plásmidos del resto de ADN en una muestra bacteriana.

Solución que rompe la membrana celular bacteriana, incluyendo SDS e hidróxido sódico, para acceder al ADN, rompe las membranas permitiendo el acceso al ADN.

Compuestos que inactivan ARNasas mediante la ruptura de los enlaces de hidrógeno de las moléculas de enzimas.

Son sustancias que se disuelven en etanol, y se eliminan del ADN usando el sobrenadante.

Proceso de disolver el ADN en un líquido después de su precipitación.

Dejar el pellet de ADN secar al aire, en un tubo abierto.

Técnica para separar proteínas del ADN, usando una solución salina concentrada.

Metodo de separación del ADN a través de la adición de isopropanol.

Elimina impurezas del ADN usando etanol.

Técnica de separación basada en la unión reversible de iones a grupos funcionales cargados.

Fases estacionarias con carga positiva, que atrapan iones negativos.

Fases estacionarias con carga negativa, que atrapan iones positivos.

Usar la cromatrografía para purificar ácidos nucleicos, utilizando intercambiadores aniónicos.

Proceso de ruptura de la membrana celular para liberar el material intracelular, como ácidos nucleicos.

Proceso de evitar la degradación de los ácidos nucleicos (ADN y ARN) por enzimas llamadas nucleasas.

Compuestos que rompen la membrana celular al desestabilizar la bicapa lipídica y desnaturalizar proteínas, liberando el contenido celular.

Detergente aniónico comúnmente usado en lisis celulares, especialmente en muestras humanas y animales.

Quelante que secuestra iones como calcio y magnesio, inhibiendo la acción de enzimas ADN-asas que necesitan estos iones para funcionar.

Enzimas que digieren proteínas de la membrana y citoplasma celular, como las nucleasas, facilitando la liberación del material dentro de la célula.

Tipo de proteasa usada en la lisis, útil para tejidos frescos y fijados en formaldehído.

Compuestos que desnaturalizan macromoléculas, inhibiendo su actividad, como el guanidina, usado para inhibir ARN-asas.

Uso de enzimas específicas para degradar componentes de la pared celular de bacterias, hongos, levaduras y células vegetales.

Enzimas para degradar la pared celular de bacterias gram-positivas.

Enzimas utilizadas para degradar la pared celular de vegetales, levaduras y hongos.

Métodos físicos para romper la pared celular, como ebullición, ciclos de congelación-descongelación, sonicación.

Compuesto que facilita la eliminación de polisacáridos y compuestos polifenólicos, que interfieren en la purificación de ácidos nucleicos de células con pared celular compleja.

Inspección visual para determinar la efectividad de la ruptura de las células, buscando ausencia de grumos o restos celulares, indicando una lisis completa.