Extendido Sanguíneo: Técnicas y Consideraciones

Study Notes

La muestra debe ser capilar o venosa, pero se prefiere sangre venosa sin aditivo o con EDTA.
La tinción debe realizarse dentro de las 3 horas del procedimiento.
La gota de sangre debe ser de 10-12 μL y se utiliza un ángulo de 45º.
El ángulo y la velocidad del extendido pueden afectar la apariencia del frotis.

Un reticulocito es un estadio previo a la maduración total del eritrocito.
Se utilizan fluorocromos como naranja de tiazol y auramina en el método automatizado.
La policromatofilia se informa sobre un 4%.
El intervalo de referencia reticulocitario es del 0.5 a 1.5% en adultos.

Método manual: tinción supravital, con 20% de variación en lectores experimentados.
Método automatizado: fluorocromo, con 8% de variación y se cuentan entre 30.000 a 50.000 células.

La VHS se ve afectada por factores como VCM, diferencia de densidad, viscosidad plasmática y temperatura.
La etapa de hemoaglutinación depende de los tres primeros factores.
La VHS se ve afectada por condiciones fisiológicas como embarazo, envejecimiento y crecimiento.
La VHS se ve afectada por factores laboratoriales como la verticalidad de la pipeta, temperatura y dilución.

La FOE se mide mediante una solución stock de pH 7.4 y concentración del 10% de NaCl.
La prueba se realiza con la muestra recién obtenida y se lee en espectrofotómetro a 540nm.

El método de Singer se basa en la desnaturalización proteica de la hemoglobina a través de la mezcla con KOH.
La muestra debe ser sangre venosa anticoagulada con EDTA-K2.
La Hb fetal se calcula mediante la dilución de la Hb total y la Hb fetal.
La Hb fetal en recién nacido es del 55-88%.

La muestra de sangre debe ser obtenida dentro de las 3 horas del procedimiento
La muestra ideal es sangre venosa sin aditivo, pero si no es posible, puede ser sangre venosa anticoagulada con EDTA
La heparina no es adecuada para frotis porque favorece la agregación plaquetaria y aumenta la basofilia del frotis

La gota de sangre debe ser de 10 a 12 uL
Se utiliza un ángulo de 45º para la extensión
La extensión debe cubrir 2/4 del portaobjeto
Un ángulo mayor a 45º produce un frotis grueso y corto, mientras que un ángulo menor a 45º produce un frotis largo y delgado
Si se utiliza muy alta velocidad, el frotis queda grueso y corto, mientras que si se utiliza muy baja velocidad, el frotis queda largo y delgado
Para muestras anémicas o con HTO bajo, se debe aumentar el ángulo o subir la velocidad
Para muestras con poliglobulia, se debe disminuir el ángulo o velocidad

Si el frotis es delgado, hay una sobreestimación de monocitos y neutrófilos, mientras que si es muy grueso, hay una sobreestimación de linfocitos
Lipemia se soluciona centrifugando la muestra, eliminando la grasa y reemplazándola por un diluyente isotónico
Rouleaux se produce cuando la VHS está muy alta, lo que corresponde a la formación de pilas de moneda de eritrocitos
Crioaglutininas se producen cuando hay anticuerpos que aglutinan a baja temperatura, haciendo que los GR se "coagulen" en ciertas partes de la muestra

La primera etapa es con May Grunwald para precipitar y fijar la muestra
La segunda etapa utiliza un buffer de pH 7.2 a 7.4 para disolver las células y teñir el May Grunwald
La tercera etapa utiliza Giemsa diluido, que tiñe la cromatina del núcleo y sustancias azurófilas