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Questions and Answers
¿Cuál es la función principal de la ATPasa en las fibras musculares?
¿Cuál es la función principal de la ATPasa en las fibras musculares?
La ATPasa cataliza la hidrólisis del ATP en ADP y un ión fosfato.
¿Cómo influye el pH en la actividad de la ATPasa?
¿Cómo influye el pH en la actividad de la ATPasa?
El pH determina la estabilidad de la ATPasa, variando su actividad en soluciones ácidas y alcalinas.
¿Qué tipos de fibras musculares se pueden distinguir mediante la reacción histoquímica de ATPasa?
¿Qué tipos de fibras musculares se pueden distinguir mediante la reacción histoquímica de ATPasa?
Se pueden distinguir entre fibras musculares de tipo I y tipo II (IIa, IIb y IIc).
¿Qué caracteriza a las fibras musculares de tipo I en términos de metabolismo?
¿Qué caracteriza a las fibras musculares de tipo I en términos de metabolismo?
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¿Qué efecto tiene un medio ácido en las fibras musculares tipo II durante el tratamiento del tejido?
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Describe el uso de las sales de tetrazolium en la histoquímica.
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¿Cuál es la diferencia entre las sales de monotetrazolium y ditetrazolium?
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¿Qué sucede a las miosinas de las fibras tipo I cuando se colocan en un medio alcalino?
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¿Qué precipitado se forma a partir de las sales de dittetrazolium al ser oxidado?
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¿Cómo se relaciona la estructura de las fibras musculares con su actividad enzimática?
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¿Qué es el diformazán y cómo se genera en el tejido?
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¿Cómo se utilizan el NADH-TR y la deshidrogenasa succínica (SDH) en la diferenciación de fibras musculares?
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¿Cuál es el papel del oxígeno molecular en la acción de la citocromo oxidasa?
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¿Qué sustrato donante de electrones se usa comúnmente en el análisis de la actividad de la citocromo oxidasa?
¿Qué sustrato donante de electrones se usa comúnmente en el análisis de la actividad de la citocromo oxidasa?
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Explica la relación entre el flujo de electrones y la producción de ATP en la mitocondria.
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Describe el efecto de la SDH en la formación del diformazán en el tejido.
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¿Por qué el diformazán es considerado un compuesto estable e insoluble en análisis histológicos?
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¿Cuál es el resultado de la acción enzimática del NADH en una miopatía centronuclear?
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Comenta sobre el papel de la CoQ en la cadena transportadora de electrones.
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¿Qué implicaciones tiene la formación de un precipitado insoluble en el diagnóstico histológico?
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Study Notes
Demostración histoquímica de enzimas - 2
- Un subconjunto de enzimas (Ez) son capaces de producir hidrólisis del ATP en ADP y liberar un ión fosfato libre.
- La ATPasa: El fundamento histoquímico se basa en la sensibilidad de la enzima a soluciones ácidas y alcalinas, y en la detección de fosfato liberado por la acción enzimática de la ATPasa. La variación de isoformas determina la sensibilidad a diferentes pH.
ATPasa: Tipos de fibras
- El músculo esquelético está compuesto por una mezcla de fibras con diferentes propiedades bioquímicas y fisiológicas.
- Fibras tipo I: Roja-Lenta. Poseen estabilidad enzimática en soluciones ácidas (pH 4.3). También se las relaciona con NADH-SDH-COX y lípidos
- Fibras tipo II: Blanca-Rápida. Poseen estabilidad enzimática en soluciones alcalinas (pH 9.4).
ATPasa: Continuación
- El tejido se pre-trata en medio ácido o básico.
- Medio ácido inactiva miosinas de las fibras tipo IIa y IIb.
- Medio alcalino inactiva miosina de las fibras tipo I.
Resumen de reacción ATPasa según fibra (Bancroft)
- (Tabla con datos de diferentes tipos de fibras y reacciones enzimáticas con diferentes pH)
- En la tabla, los valores "+" indican la intensidad de la reacción.
- Las fibras pequeñas en regeneración suelen ser positivas a NADH, independientemente del tipo de fibra.
Imágenes: Microscopías de ATPasa
- Imágenes con las descripciones de ATPasa a pH 9.4 y pH 4.3 mostrando diferentes patrones de tinción en las fibras musculares.
ATPasa: Fundamento histoquímico (Reacciones químicas)
- (Diagrama químico mostrando reacciones químicas involucradas en la detección de la actividad de la enzima ATPasa).
- Se incluyen reactivos involucrados como el fosfato de calcio, cloruro de cobalto, sulfuro de amonio etc.
ATPasa a pH 9.4 y pH 4.3 (Imágenes)
- Imágenes con las descripciones indicando patrones de tinción ATPasa a pH 9.4 y pH 4.3.
Resultados SDH
- El aceptor artificial de electrones (NBT) genera un diformazán (compuesto estable, insoluble y coloreado) al momento de reducirse.
- El diformazán ofrece un patrón fibrilar característico de las fibras tipo I.
Citocromo oxidasa
- Recibe electrones circulantes y los lleva al aceptor final (oxígeno molecular).
- Reduce el oxígeno a agua, eliminando radicales de oxígeno.
- Este proceso forma un gradiente de electrones y produce ATP.
Citocromo oxidasa (Fundamento histoquímico)
- Se utiliza un donador artificial de electrones (como la 3,3'-Diaminobencidina Tetrahidrocloruro (DAB)).
- La unión del donante a la enzima genera un precipitado coloreado (pardo) que marca la zona con actividad enzimática.
Citocromo oxidasa (Consideraciones adicionales)
- El precipitado de citocromo oxidasa es insoluble en compuestos orgánicos (alcohol y xilol).
- El tejido puede contener H2O2, lo que puede causar falsos positivos con miopatías mitocondriales con déficit de COX, debido a actividad endógena de peroxidasas.
- La catalasa se usa para controlar H2O2 en la solución de trabajo.
Deshidrogenasa succínica
- Al igual que NADH, la succinato deshidrogenasa (SDH) utiliza la ubiquinona (CoQ) como aceptor final.
- Los electrones se desplazan a través de la membrana lipídica mitocondrial hasta el complejo III.
- El objetivo final es la producción de ATP y la eliminación de radicales de oxígeno.
Fundamento histoquímico (Deshidrogenasa succínica)
- La enzima actúa sobre el sustrato donador de electrones (succinato).
- Los electrones no fluyen a través del complejo enzimático.
- Se utilizan aceptores artificiales para atrapar los electrones y generar un precipitado coloreado.
Resultados SDH (continuación)
- El aceptor artificial utilizado es NBT, que genera un diformazán insoluble y coloreado.
- Proporciona un patrón fibrilar característico (fibras tipo I).
Citocromo oxidasa
- (Descripción general sobre el papel de esta enzima durante las reacciones bioquímicas)
- Recibe electrones en la cadena transportadora y produce agua.
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Description
Este cuestionario explora la histoquímica de la ATPasa y los tipos de fibras musculares. Se analizan las diferencias en la acción enzimática en medios ácidos y básicos, así como las características de las fibras tipo I y II. Prepárate para profundizar en la relación entre la bioquímica y la fisiología del músculo esquelético.