CRISPR: Sistema Imune Adaptativo

CRISPR: Sistema Imune Adaptativo

• CRISPR é um sistema imune adaptativo encontrado em cerca de 40% de todas as bactérias e 90% de arqueias.
• O sistema CRISPR é composto por repitições curta e palíndromas regulares (repeats) e frames de leitura abertos (open reading frames).

Função do CRISPR

• O sistema CRISPR detecta e corta genomas de bactériofagos e salva fragmentos desses genomas como registro de infecções anteriores.
• O sistema CRISPR corta o genoma do bactériofago e o inativa, e os fragmentos cortados (spacers) são inseridos no array de CRISPR.

Processo de CRISPR

• O array de CRISPR é transcrito como um pré-transcrito de CRISPR (pre-CRISPR transcript).
• O pré-transcrito de CRISPR é processado em vários RNA de CRISPR (crRNA) e RNA rastreador (tracrRNA).
• Cada crRNA se liga ao tracrRNA para formar uma sequência de DNA duplex.
• A enzima Cas9 se liga ao duplex de RNA e o programa para procurar por sequências específicas no genoma.
• A Cas9 procura por sequências chamadas protospacers adjacentes a motivos PAM (protospacer adjacent motif).
• Se houver um match entre o protospacer e a sequência genômica, a Cas9 corta o alvo.

Detalhes do Processo

• O sistema CRISPR natural é um sistema de classe 2, que utiliza a enzima Cas9.
• A Cas9 carrega um duplex de RNA contendo o protospacer (20 bases) que deve matchar com o genoma do bactériofago.
• A Cas9 procura por sequências PAM (três bases longas) e desenrola as fitas de DNA.
• Se houver um match, a Cas9 corta o alvo, criando uma quebra de fita dupla sem saliva.

CRISPR: Sistema Imune Adaptativo

• CRISPR é um sistema imune adaptativo encontrado em cerca de 40% de todas as bactérias e 90% de arqueias.

Função do CRISPR

• O sistema CRISPR detecta e corta genomas de bactériofagos e salva fragmentos desses genomas como registro de infecções anteriores.
• O sistema CRISPR corta o genoma do bactériofago e o inativa, e os fragmentos cortados (spacers) são inseridos no array de CRISPR.

Processo de CRISPR

• O array de CRISPR é transcrito como um pré-transcrito de CRISPR (pre-CRISPR transcript).
• O pré-transcrito de CRISPR é processado em vários RNA de CRISPR (crRNA) e RNA rastreador (tracrRNA).
• Cada crRNA se liga ao tracrRNA para formar uma sequência de DNA duplex.
• A enzima Cas9 se liga ao duplex de RNA e o programa para procurar por sequências específicas no genoma.
• A Cas9 procura por sequências chamadas protospacers adjacentes a motivos PAM (protospacer adjacent motif).
• Se houver um match entre o protospacer e a sequência genômica, a Cas9 corta o alvo.

Detalhes do Processo

• O sistema CRISPR natural é um sistema de classe 2, que utiliza a enzima Cas9.
• A Cas9 carrega um duplex de RNA contendo o protospacer (20 bases) que deve matchar com o genoma do bactériofago.
• A Cas9 procura por sequências PAM (três bases longas) e desenrola as fitas de DNA.
• Se houver um match, a Cas9 corta o alvo, criando uma quebra de fita dupla sem saliva.