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Questions and Answers
Qual é a principal função dos fluorocromos na citometria de fluxo?
Qual é a principal função dos fluorocromos na citometria de fluxo?
A principal função dos fluorocromos é emitir luz de comprimentos de onda específicos quando excitados por uma fonte luminosa, permitindo a diferenciação celular.
Como a união de anticorpos monoclonais a fluorocromos beneficia a citometria de fluxo?
Como a união de anticorpos monoclonais a fluorocromos beneficia a citometria de fluxo?
Essa união combina a especificidade do anticorpo com a capacidade do fluorocromo de emitir luz, permitindo a identificação precisa de células.
Qual comprimento de onda de luz azul é produzido pelo laser argônio em citômetros de fluxo?
Qual comprimento de onda de luz azul é produzido pelo laser argônio em citômetros de fluxo?
O laser argônio produz luz azul com comprimento de onda de 488 nm.
Quais são as características iniciais dos fluorocromos antes de serem excitados?
Quais são as características iniciais dos fluorocromos antes de serem excitados?
Quais outros comprimentos de onda podem excitar fluorocromos, além do laser argônio?
Quais outros comprimentos de onda podem excitar fluorocromos, além do laser argônio?
Quais são os passos principais após a retirada de material de um tumor para sua análise?
Quais são os passos principais após a retirada de material de um tumor para sua análise?
Qual o propósito dos ensaios com marcadores radioativos na imunologia?
Qual o propósito dos ensaios com marcadores radioativos na imunologia?
O que caracteriza o radioisótopo mais utilizado nos ensaios com marcadores radioativos?
O que caracteriza o radioisótopo mais utilizado nos ensaios com marcadores radioativos?
Liste duas categorias de ensaios imunológicos com reagentes marcados.
Liste duas categorias de ensaios imunológicos com reagentes marcados.
Qual a diferença entre o radioimunoensaio (RIE) e o ensaio imunorradiométrico (IRMA)?
Qual a diferença entre o radioimunoensaio (RIE) e o ensaio imunorradiométrico (IRMA)?
Por que os cortes de tecido tumorais são corados antes da visualização microscópica?
Por que os cortes de tecido tumorais são corados antes da visualização microscópica?
Como os resultados dos ensaios com reagentes marcados são geralmente quantificados?
Como os resultados dos ensaios com reagentes marcados são geralmente quantificados?
Cite um exemplo de reagente utilizado em ensaios luminescentes.
Cite um exemplo de reagente utilizado em ensaios luminescentes.
Qual detector é responsável por fornecer informações sobre o tamanho da célula na citometria de fluxo?
Qual detector é responsável por fornecer informações sobre o tamanho da célula na citometria de fluxo?
Como a luz é desviada no detector Side Scatter (SSC) e qual informação ele oferece?
Como a luz é desviada no detector Side Scatter (SSC) e qual informação ele oferece?
Quais os valores de desvio de luz do FSC sem e com a presença de células?
Quais os valores de desvio de luz do FSC sem e com a presença de células?
Qual é a relação entre granulosidade e o detector SSC?
Qual é a relação entre granulosidade e o detector SSC?
Para que serve a barra de obscuração em um detector FSC?
Para que serve a barra de obscuração em um detector FSC?
Que informações podem ser obtidas ao diferenciar células por seus tamanhos e granularidade?
Que informações podem ser obtidas ao diferenciar células por seus tamanhos e granularidade?
Qual é a importância de estudar a dispersão frontal e lateral em citometria de fluxo?
Qual é a importância de estudar a dispersão frontal e lateral em citometria de fluxo?
Quando um desvio forte de luz ocorre, qual é seu significado no contexto do SSC?
Quando um desvio forte de luz ocorre, qual é seu significado no contexto do SSC?
Por que é relevante determinar o tamanho e a granulosidade das células na citometria de fluxo?
Por que é relevante determinar o tamanho e a granulosidade das células na citometria de fluxo?
Como a citometria de fluxo pode ser usada para diferenciar células?
Como a citometria de fluxo pode ser usada para diferenciar células?
Quais são os tipos de lasers mencionados para citometria de fluxo?
Quais são os tipos de lasers mencionados para citometria de fluxo?
Qual é o papel dos anticorpos monoclonais na imunofenotipagem?
Qual é o papel dos anticorpos monoclonais na imunofenotipagem?
Para quais doenças a citometria de fluxo é especialmente aplicada no diagnóstico?
Para quais doenças a citometria de fluxo é especialmente aplicada no diagnóstico?
Como a citometria de fluxo contribui no monitoramento de pacientes HIV positivos?
Como a citometria de fluxo contribui no monitoramento de pacientes HIV positivos?
Qual é a diferença entre imunofluorescência direta e indireta?
Qual é a diferença entre imunofluorescência direta e indireta?
O que é necessário para a detecção em imunofenotipagem por citometria de fluxo?
O que é necessário para a detecção em imunofenotipagem por citometria de fluxo?
Quais moléculas podem ser detectadas em solução através da citometria de fluxo?
Quais moléculas podem ser detectadas em solução através da citometria de fluxo?
Qual é a função principal da citometria de fluxo na rotina clínica?
Qual é a função principal da citometria de fluxo na rotina clínica?
O que caracteriza os ensaios imunológicos com reagentes marcados?
O que caracteriza os ensaios imunológicos com reagentes marcados?
Qual é a enzima mais comumente utilizada nos testes de ELISA e qual sua função?
Qual é a enzima mais comumente utilizada nos testes de ELISA e qual sua função?
Qual a principal diferença entre o teste ELISA Indireto e o ELISA Direto-Sanduíche?
Qual a principal diferença entre o teste ELISA Indireto e o ELISA Direto-Sanduíche?
Para que serve o ensaio ELISA de competição?
Para que serve o ensaio ELISA de competição?
Cite duas categorias de ensaios imunológicos mencionadas no texto.
Cite duas categorias de ensaios imunológicos mencionadas no texto.
O que significa a presença de cor nos resultados do ensaio ELISA de competição?
O que significa a presença de cor nos resultados do ensaio ELISA de competição?
Qual o papel do substrato nos ensaios ELISA?
Qual o papel do substrato nos ensaios ELISA?
Qual tipo de teste ELISA utiliza um antígeno conjugado com enzima?
Qual tipo de teste ELISA utiliza um antígeno conjugado com enzima?
O que implica um teste ELISA positivo?
O que implica um teste ELISA positivo?
Por que o uso de marcadores radioativos é relevante nos ensaios imunológicos?
Por que o uso de marcadores radioativos é relevante nos ensaios imunológicos?
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Study Notes
Ensaios Imunológicos com Reagentes Marcados
- Ensaios de imuno-histoquímica utilizam cortes de tecido tumoral embebidos em parafina, que são corados e visualizados ao microscópio.
Categorias de Ensaios
- As principais categorias incluem:
- Imuno-histoquímica
- Marcadores radioativos
- Luminescência
- Reagentes fluorescentes
- Marcadores enzimáticos
Ensaios com Marcadores Radioativos
- Utilizam um antígeno ou anticorpo marcado para quantificar componentes na amostra.
- Determinação do composto desconhecido realizada pela medição da radioatividade.
- "Radioimunoensaio" (RIE) é usado quando o antígeno é marcado; "ensaio imunorradiométrico" (IRMA) é usado para anticorpos.
- Iodo-125 é o radioisótopo mais comumente utilizado.
Citometria de Fluxo
- As técnicas Forward Scatter (FSC) e Side Scatter (SSC) analisam tamanho e granulosidade das células, respectivamente.
- FSC mede desvio leve de luz para determinar o tamanho celular.
- SSC mede desvio forte de luz para avaliar a granulosidade celular.
Fluorocromos e Anticorpos
- Anticorpos monoclonais frequentemente são conjugados a fluorocromos, combinando especificidade do anticorpo com a utilidade do fluorocromo.
- Fluorocromos são excitados por fontes de luz (como lasers) e emitem luz em comprimentos de onda específicos (ex: azul de 488 nm).
Aplicações Clínicas
- Imunofenotipagem assistida por citometria de fluxo auxilia na detecção de marcadores para diagnósticos de leucemias, linfomas e monitoramento de linfócitos T CD4+ em pacientes HIV positivos.
Ensaios com Reagentes Fluorescentes
- Imunofluorescência direta e indireta são utilizadas, onde a indireta envolve a detecção de anticorpos específicos em amostras do paciente.
- Utilização de anticorpos anti-anticorpos marcados com substâncias fluorescentes para visualização.
Ensaios com Reagentes Enzimáticos (ELISA)
- O ELISA é um método baseado em reações antígeno-anticorpo, onde a peroxidase é frequentemente utilizada para realizar reações enzimáticas.
- Tipos de ELISA incluem:
- Indireto: localiza anticorpos na amostra.
- Direto-sanduíche: localiza diretamente o patógeno.
- Competição: usado para confirmar presença de antígenos biotinizados na amostra. Reação cruzada indica negatividade se a amostra emitir cor.
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