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Questions and Answers
Qual é a principal função dos fluorocromos na citometria de fluxo?
A principal função dos fluorocromos é emitir luz de comprimentos de onda específicos quando excitados por uma fonte luminosa, permitindo a diferenciação celular.
Como a união de anticorpos monoclonais a fluorocromos beneficia a citometria de fluxo?
Essa união combina a especificidade do anticorpo com a capacidade do fluorocromo de emitir luz, permitindo a identificação precisa de células.
Qual comprimento de onda de luz azul é produzido pelo laser argônio em citômetros de fluxo?
O laser argônio produz luz azul com comprimento de onda de 488 nm.
Quais são as características iniciais dos fluorocromos antes de serem excitados?
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Quais outros comprimentos de onda podem excitar fluorocromos, além do laser argônio?
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Quais são os passos principais após a retirada de material de um tumor para sua análise?
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Qual o propósito dos ensaios com marcadores radioativos na imunologia?
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O que caracteriza o radioisótopo mais utilizado nos ensaios com marcadores radioativos?
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Liste duas categorias de ensaios imunológicos com reagentes marcados.
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Qual a diferença entre o radioimunoensaio (RIE) e o ensaio imunorradiométrico (IRMA)?
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Por que os cortes de tecido tumorais são corados antes da visualização microscópica?
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Como os resultados dos ensaios com reagentes marcados são geralmente quantificados?
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Cite um exemplo de reagente utilizado em ensaios luminescentes.
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Qual detector é responsável por fornecer informações sobre o tamanho da célula na citometria de fluxo?
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Como a luz é desviada no detector Side Scatter (SSC) e qual informação ele oferece?
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Quais os valores de desvio de luz do FSC sem e com a presença de células?
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Qual é a relação entre granulosidade e o detector SSC?
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Para que serve a barra de obscuração em um detector FSC?
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Que informações podem ser obtidas ao diferenciar células por seus tamanhos e granularidade?
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Qual é a importância de estudar a dispersão frontal e lateral em citometria de fluxo?
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Quando um desvio forte de luz ocorre, qual é seu significado no contexto do SSC?
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Por que é relevante determinar o tamanho e a granulosidade das células na citometria de fluxo?
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Como a citometria de fluxo pode ser usada para diferenciar células?
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Quais são os tipos de lasers mencionados para citometria de fluxo?
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Qual é o papel dos anticorpos monoclonais na imunofenotipagem?
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Para quais doenças a citometria de fluxo é especialmente aplicada no diagnóstico?
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Como a citometria de fluxo contribui no monitoramento de pacientes HIV positivos?
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Qual é a diferença entre imunofluorescência direta e indireta?
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O que é necessário para a detecção em imunofenotipagem por citometria de fluxo?
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Quais moléculas podem ser detectadas em solução através da citometria de fluxo?
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Qual é a função principal da citometria de fluxo na rotina clínica?
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O que caracteriza os ensaios imunológicos com reagentes marcados?
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Qual é a enzima mais comumente utilizada nos testes de ELISA e qual sua função?
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Qual a principal diferença entre o teste ELISA Indireto e o ELISA Direto-Sanduíche?
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Para que serve o ensaio ELISA de competição?
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Cite duas categorias de ensaios imunológicos mencionadas no texto.
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O que significa a presença de cor nos resultados do ensaio ELISA de competição?
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Qual o papel do substrato nos ensaios ELISA?
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Qual tipo de teste ELISA utiliza um antígeno conjugado com enzima?
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O que implica um teste ELISA positivo?
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Por que o uso de marcadores radioativos é relevante nos ensaios imunológicos?
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Study Notes
Ensaios Imunológicos com Reagentes Marcados
- Ensaios de imuno-histoquímica utilizam cortes de tecido tumoral embebidos em parafina, que são corados e visualizados ao microscópio.
Categorias de Ensaios
- As principais categorias incluem:
- Imuno-histoquímica
- Marcadores radioativos
- Luminescência
- Reagentes fluorescentes
- Marcadores enzimáticos
Ensaios com Marcadores Radioativos
- Utilizam um antígeno ou anticorpo marcado para quantificar componentes na amostra.
- Determinação do composto desconhecido realizada pela medição da radioatividade.
- "Radioimunoensaio" (RIE) é usado quando o antígeno é marcado; "ensaio imunorradiométrico" (IRMA) é usado para anticorpos.
- Iodo-125 é o radioisótopo mais comumente utilizado.
Citometria de Fluxo
- As técnicas Forward Scatter (FSC) e Side Scatter (SSC) analisam tamanho e granulosidade das células, respectivamente.
- FSC mede desvio leve de luz para determinar o tamanho celular.
- SSC mede desvio forte de luz para avaliar a granulosidade celular.
Fluorocromos e Anticorpos
- Anticorpos monoclonais frequentemente são conjugados a fluorocromos, combinando especificidade do anticorpo com a utilidade do fluorocromo.
- Fluorocromos são excitados por fontes de luz (como lasers) e emitem luz em comprimentos de onda específicos (ex: azul de 488 nm).
Aplicações Clínicas
- Imunofenotipagem assistida por citometria de fluxo auxilia na detecção de marcadores para diagnósticos de leucemias, linfomas e monitoramento de linfócitos T CD4+ em pacientes HIV positivos.
Ensaios com Reagentes Fluorescentes
- Imunofluorescência direta e indireta são utilizadas, onde a indireta envolve a detecção de anticorpos específicos em amostras do paciente.
- Utilização de anticorpos anti-anticorpos marcados com substâncias fluorescentes para visualização.
Ensaios com Reagentes Enzimáticos (ELISA)
- O ELISA é um método baseado em reações antígeno-anticorpo, onde a peroxidase é frequentemente utilizada para realizar reações enzimáticas.
- Tipos de ELISA incluem:
- Indireto: localiza anticorpos na amostra.
- Direto-sanduíche: localiza diretamente o patógeno.
- Competição: usado para confirmar presença de antígenos biotinizados na amostra. Reação cruzada indica negatividade se a amostra emitir cor.
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Description
Este quiz explora os conceitos de dispersão frontal (FSC) e lateral (SSC) na citometria de fluxo. Você vai aprender como a luz é desviada pelos detectores e como esses dados podem ser utilizados para entender características das células, como tamanho e outras propriedades. Teste seus conhecimentos sobre ensaios com reagentes fluorescentes e a importância desses detectores na pesquisa celular.