Instrumentele DEEL 4

Het scheiden van mengsels in hun verschillende componenten, gevolgd door een kwalitatieve of kwantitatieve bepaling.

Een vaste stof of vloeistof die vastzit in een kolom, plaat of papier.

Een gas of vloeistof die zich over de stationaire fase beweegt.

<p>De verschillende componenten hebben verschillende affiniteiten voor zowel de stationaire als de mobiele fase, waardoor ze gescheiden worden.</p> Signup and view all the answers

<ul> <li>Sneller, scheiden van complexe mengsels, - Vluchtige stoffen: staal moet omgezet worden naar gasfase.</li> </ul> Signup and view all the answers

<p>Analytische chromatografie wordt gebruikt voor minimale hoeveelheden staal, terwijl preparatieve chromatografie wordt gebruikt voor grotere hoeveelheden en opzuivering.</p> Signup and view all the answers

<p>Het principe van TLC is vloeistof-vast chromatografie, waarbij de vloeibare mobiele fase migreert doorheen een kolom gepakt met een vast dragermateriaal.</p> Signup and view all the answers

<p>Conventionele LSC maakt gebruik van vloeistof kolom chromatografie, terwijl HPLC een hoge druk oplegt om redelijke stroomsnelheid te garanderen en dunne kolommen gebruikt voor snelle scheiding in enkele minuten.</p> Signup and view all the answers

<p>HPLC wordt gebruikt voor toepassingen zoals serum en urine-analyse, alsook voor het onderzoeken van geneesmiddelen, drugs, vitamines, hormonen, en metabolieten in lage concentraties.</p> Signup and view all the answers

<p>Gaschromatografie maakt gebruik van een gas als mobiele fase en een kolom waar een gas doorheen stroomt, terwijl vloeistofchromatografie vloeistoffen gebruikt als mobiele fase die door een kolom met een vast dragermateriaal migreren.</p> Signup and view all the answers

<p>Het solventenreservoir zorgt ervoor dat de mobiele fase continu op de kolom wordt aangebracht.</p> Signup and view all the answers

<p>DHPLC wordt gebruikt voor het opsporen van mutaties in DNA.</p> Signup and view all the answers

<p>De kolom bij DHPLC bestaat uit een apolaire stationaire fase (reversed phase) en een polaire mobiele fase. Het staal zelf bevat DNA (polair) en TEAA (tris-ethyleenaminon), wat apolair is.</p> Signup and view all the answers

<p>Gradiëntelutie, of solventprogrammatie, wordt gebruikt voor complexe scheidingen met verschillende oplosmiddelen.</p> Signup and view all the answers

<p>Hoge druk wordt toegepast bij HPLC om een redelijke stroomsnelheid te garanderen.</p> Signup and view all the answers

<p>Bij gaschromatografie kunnen verschillende gassen gebruikt worden als mobiele fase. Deze gassen moeten voldoen aan strenge eisen op het gebied van zuiverheid om storende nevenreacties te beperken.</p> Signup and view all the answers

<p>Het injectiesysteem bij gaschromatografie is de zwakste schakel in het systeem, waarbij de reproduceerbaarheid afhankelijk is van de analist. Vaak wordt een autosampler gebruikt om de injectie te standaardiseren.</p> Signup and view all the answers

<p>De vloeistofinjector bij HPLC kan vloeistoffen rechtstreeks injecteren, terwijl vaste stoffen eerst moeten worden opgelost en gefilterd/centrifugeerd voordat ze geïnjecteerd kunnen worden.</p> Signup and view all the answers

<p>Adsorptiechromatografie is gebaseerd op adsorptie, waarbij stoffen aan een vast oppervlak binden.</p> Signup and view all the answers

<p>Bij normal phase chromatografie is de stationaire fase polair en de mobiele fase apolair, terwijl bij reversed phase chromatografie de stationaire fase apolair is en de mobiele fase polair.</p> Signup and view all the answers

<p>Ionenuitwisselingschromatografie is gebaseerd op de affiniteit van ionen in oplossing voor positief/negatief geladen ionen op de stationaire fase.</p> Signup and view all the answers

<p>Een kation-uitwisselaar heeft negatief geladen functionele groepen op de stationaire fase en houdt positief geladen kationen het beste vast, terwijl een anion-uitwisselaar positief geladen functionele groepen heeft en negatief geladen anionen het beste vasthoudt.</p> Signup and view all the answers

<p>Gel filtratie is gebaseerd op de afmeting van het molecuul, waarbij de stationaire fase een macromoleculaire gel met poriën van bepaalde afmeting is.</p> Signup and view all the answers

<p>Bepalen van moleculaire gewichten, scheiden van grote en kleine moleculen, ontzouten van eiwitoplossingen.</p> Signup and view all the answers

<p>De meeste stalen moeten worden geëxtraheerd om doelwitcomponenten te isoleren, concentreren en interfererende componenten (eiwitten, vetten, conjugaten) te verwijderen.</p> Signup and view all the answers

<p>Selectie van de kolom, conditionering van de kolom.</p> Signup and view all the answers

<p>Klinische chemie, minikolommen voor zuivering van DNA, RNA, GM, standaardisatie.</p> Signup and view all the answers

<p>Eiwitten, vetten, conjugaten.</p> Signup and view all the answers

<p>Lading van het staal, wasstap, elutiestap, droogdampen, eventueel derivatisatie.</p> Signup and view all the answers

<p>Isoleren en zuiveren van doelwitcomponenten, concentreren, verwijderen van interfererende componenten.</p> Signup and view all the answers

<p>Stationaire fase en mobiele fase</p> Signup and view all the answers

<p>Vloeistofchromatografie (LC) en gaschromatografie (GC)</p> Signup and view all the answers

<p>Scheiden van mengsels in hun verschillende componenten, gevolgd door kwalitatieve of kwantitatieve bepaling</p> Signup and view all the answers

<p>Preparatieve chromatografie is voor grotere hoeveelheden en opzuivering, terwijl analytische chromatografie minimale hoeveelheden betreft</p> Signup and view all the answers

<ul> <li>Sneller, scheiden van complexe mengsels, - Vluchtige stoffen vereisen omzetting naar gasfase</li> </ul> Signup and view all the answers

<p>Vloeistof (GLC) en vast (GSC)</p> Signup and view all the answers

<p>Normal phase chromatografie heeft een polaire stationaire fase en een apolaire mobiele fase, terwijl reversed phase chromatografie een apolaire stationaire fase en een polaire mobiele fase heeft.</p> Signup and view all the answers

<p>Het principe van ionenuitwisselingschromatografie is gebaseerd op de affiniteit van ionen in de mobiele fase voor positief/negatief geladen ionen op de stationaire fase.</p> Signup and view all the answers

<p>Enkele toepassingen van gel filtratie zijn het bepalen van moleculaire gewichten, het scheiden van grote en kleine moleculen, en het ontzouten van eiwitoplossingen.</p> Signup and view all the answers

<p>De rol van stalen voorbereiding in chromatografie is om de doelwitcomponenten te isoleren, concentreren en interfererende componenten (eiwitten, vetten, conjugaten) te verwijderen.</p> Signup and view all the answers

<p>De stappen in het proces van chromatografie zijn selectie van de kolom, conditionering van de kolom, laden van het staal, wasstap, elutiestap, droogdampen, en eventueel derivatisatie.</p> Signup and view all the answers

<p>De toepassingen van normal phase, reversed phase, en ionenuitwisselingschromatografie zijn respectievelijk klinische chemie, standaardisatie, en zuivering van DNA, RNA en GM.</p> Signup and view all the answers

<p>Het verschil tussen conventionele LSC en HPLC is dat HPLC een verbeterde versie is van LSC met hogere druk en snellere analyse.</p> Signup and view all the answers

<p>Het doel van de gradiëntelutie bij HPLC is om een geleidelijke verandering in samenstelling van de mobiele fase te creëren, waardoor een betere scheiding van componenten mogelijk is.</p> Signup and view all the answers

<p>Analytische chromatografie wordt gebruikt om de samenstelling van een monster te bepalen, terwijl preparatieve chromatografie wordt gebruikt om de componenten van een monster te isoleren en zuiveren.</p> Signup and view all the answers

<p>Gaschromatografie gebruikt een gasvormige mobiele fase en is geschikt voor vluchtige verbindingen, terwijl vloeistofchromatografie een vloeibare mobiele fase gebruikt en geschikt is voor niet-vluchtige verbindingen.</p> Signup and view all the answers

<p>Het principe van TLC is gebaseerd op de scheiding van componenten van een mengsel door hun verschillende affiniteit voor de stationaire en mobiele fase op een dunne laag adsorberend materiaal.</p> Signup and view all the answers

<p>Scheiding van mengsel in verschillende componenten, kwantitatieve én kwalitatieve bepaling, deskundige scheidingstechniek voor een zeer grote verscheidenheid aan uitwisselingprincipes</p> Signup and view all the answers

<p>De mobiele fase migreert doorheen een kolom gepakt met een vast dragermateriaal onder hoge druk om een redelijke stroomsnelheid te garanderen.</p> Signup and view all the answers

<p>Oplossen en scheiden van verschillende componenten in een gasstroom, waarbij bestanddelen één voor één uit de kolom komen langs de detector.</p> Signup and view all the answers

<p>TLC is een snelle screening om een mengsel te scheiden en semikwantitatief, terwijl HPLC een scheidingstechniek is waarbij een vloeibare mobiele fase migreert doorheen een kolom gepakt met een vast dragermateriaal onder hoge druk.</p> Signup and view all the answers

<p>DHPLC maakt gebruik van een apolaire stationaire fase (reversed phase) en een polaire mobiele fase, waarbij het staal zelf DNA(polair) + TEAA → apolair is.</p> Signup and view all the answers

<p>De gradiëntelutie wordt gebruikt voor complexe scheidingen met verschillende oplosmiddelen.</p> Signup and view all the answers

<p>De vloeistofinjector bij HPLC kan stalen van ng-2mg injecteren, of vloeistof rechtstreeks of via oplossen en filtreren/centrifugeren injecteren.</p> Signup and view all the answers

<p>Het injectiesysteem bij gaschromatografie omvat inlaten van het staal, verdamping van het staal en menging met draaggas.</p> Signup and view all the answers

<p>HPLC wordt gebruikt voor analyse van serum, urine, geneesmiddelen, drugs, vitamines, hormonen, en metabolieten in lage concentraties.</p> Signup and view all the answers

<p>Het solventenreservoir zorgt ervoor dat de mobiele fase continu op de kolom wordt aangebracht.</p> Signup and view all the answers

<p>De kolom bij DHPLC maakt gebruik van een apolaire stationaire fase (reversed phase) en een polaire mobiele fase, waarbij het staal zelf DNA(polair) + TEAA → apolair is.</p> Signup and view all the answers

<p>Gaschromatografie wordt gebruikt voor het oplossen en scheiden van verschillende componenten in een gasstroom, waarbij de bestanddelen één voor één uit de kolom komen langs de detector.</p> Signup and view all the answers