Questions and Answers
La chromatographie en phase gazeuse est l'un des principaux types de chromatographie.
True
Dans la chromatographie, la phase mobile est toujours un solide.
False
Les constituants d'un mélange séparés par chromatographie se déplacent tous à la même vitesse.
False
Le 'temps de rétention' d'un composé est constant indépendamment des conditions chromatographiques.
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Un chromatogramme est le résultat visuel de l'enregistrement des signaux des solutés séparés.
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La chromatographie en couche mince est une méthode de séparation impliquant une phase mobile solide.
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Les colonnes chromatographiques ne peuvent contenir que des granulés poreux.
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La rétention des solutés est un phénomène néfaste dans le processus de chromatographie.
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Avec une phase greffée, un composé polaire migre plus lentement qu'un composé apolaire.
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La combinaison d'eau et d'acétonitrile crée une polarité croissante au cours de l'élution.
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Pour qu'un détecteur UV-visible soit utile, le produit doit avoir un coefficient d'absorption ε très faible.
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La lampe Deuterium est utilisée pour mesurer des longueurs d'onde comprises entre 200 et 400 nm.
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L'aire limitée par les pics dans un chromatogramme permet de quantifier la concentration de chaque soluté.
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Le temps de rétention est la durée totale de l'analyse chromatographique.
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Les hydrocarbures sont retenus fortement dans une phase greffée avec un éluant polaire.
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Le chromatogramme est un graphique représentant la concentration de l'analyte par rapport à la température.
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La phase normale en chromatographie utilise un éluant polaire.
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Dans une colonne HPLC, les produits polaires sont retenus tandis que les produits apolaires sortent en tête lors de l'injection d'une solution dans une phase normale.
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La phase inverse nécessite un éluant apolaire pour fonctionner efficacement.
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La silice utilisée dans la phase inverse est greffée par des chaînes de carbone de 8 ou 18 atomes.
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Dans une phase normale, les temps de rétention des solutés ne sont pas influencés par la polarité de la phase mobile.
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La détérioration du gel de silice dans une phase normale entraîne une meilleure reproductibilité des séparations.
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En chromatographie, si la phase stationnaire est polaire, une phase mobile peu polaire doit être utilisée.
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Les silices greffées augmentent généralement la polarité de la phase stationnaire.
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Study Notes
Principes de la chromatographie
- La chromatographie permet de séparer les constituants d'un mélange complexe.
- Trois types principaux : chromatographie en phase gazeuse (CPG), chromatographie en phase liquide à haute performance (HPLC), chromatographie en couche mince (CCM).
- La phase mobile est un fluide qui traverse une colonne contenant une phase stationnaire.
Phase stationnaire
- Phase normale : constituée de gel de silice, très polaire, utilisant un éluant apolaire. Les composés apolaires sortent en premier, mais la silice se détériore rapidement, affectant la reproductibilité.
- Phase inverse : composée de silice greffée avec des chaînes de 8 ou 18 carbones (C8, C18), elle est apolaire et nécessite un éluant polaire (méthanol, acétonitrile, eau). Les composés polaires sont élus en premier, avec une stabilité de séparation sur le long terme.
Phase mobile
- Interactions entre phase mobile et phase stationnaire influencent les temps de rétention des solutés.
- Chromatographie en phase normale : phase stationnaire polaire avec phase mobile peu polaire.
- Chromatographie en phase inverse : phase stationnaire apolaire avec phase mobile polaire.
Temps de rétention
- Détermine qualitativement une substance avec un éluant dont la polarité peut être modifiée, influençant les facteurs de rétention des composés.
- En phase greffée, l'ordre d'élution est inversé; un composé polaire migre plus rapidement qu'un apolaire.
Gradients d'élution
- Utilisation de mélanges de solvants pour ajuster le pouvoir d’élution de la phase mobile, par exemple : augmentation de la concentration en acétonitrile dans un mélange eau/acétonitrile pendant l'élution.
Détecteurs
- Détecteur UV-visible : mesure l'absorption de la lumière par le produit à la sortie de la colonne, opérant à une longueur d'onde constante.
- Utilisation de lampes adaptées (Deuterium pour 190-350 nm et vapeur de mercure pour 254 nm).
- Conditions pour l'utilisation : le produit doit absorber à une longueur d'onde accessible et la phase mobile ne doit pas absorber à cette longueur.
Analyse chromatographique
- Un chromatogramme représente la concentration de l'analyte en fonction du temps d'élution.
- L'amplitude et l'aire des pics déterminent la concentration de chaque soluté dans le mélange injecté.
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Description
Ce quiz explore la phase stationnaire de la chromatographie en phase liquide à haute performance (HPLC). Vous apprendrez les principes fondamentaux de l'interaction entre les phases polaire et apolaire ainsi que les implications pour les résultats des analyses. Testez vos connaissances sur le gel de silice et son rôle critique dans le processus.
