CAMP Test Procedure

Solubilidad en Bilis

• La solubilidad en bilis se basa en la capacidad de bacterias de lisarse en presencia de sales biliares como el desoxicolato de sodio.
• Esto provoca un descenso de la tensión superficial, que unido a la acción de enzimas autolíticos, destruye la célula.
• Streptococcus pneumoniae posee autolisinas (enzimas autolíticas) que realizan esta función.

Prueba de Solubilidad en Bilis

• Se necesitan dos tubos: uno con suspension de células bacterianas y salina estéril, y otro con suspension de células bacterianas y desoxicolato de sodio al 2%.
• Se incuban a 35°C-37°C durante 2 horas y se observa la turbidez o transparencia del tubo.

Optoquina

• El clorhidrato de etilhidroxicupreína (optoquina) inhibe el crecimiento de S.pneumoniae a baja concentración (5 µg/ml o menos).
• Mide la susceptibilidad de una cepa al antibiótico Optoquina.

Prueba de Optoquina

• Se realiza un 0,5 Mc Farland y se siembra en un agar Müller Hinton-sangre con una torula de algodón.
• Se agrega un disco de Optoquina y se incuba durante 18-24 horas en ATM con Co2.
• Se observa el halo de inhibición: sensible si es mayor o igual a 14 mm, resistente si es menor a 14 mm.

Caldo NaCl al 6,5%

• Determina la capacidad de algunos microorganismos de desarrollarse en medios de cultivo con una concentración de cloruro sódico del 6,5%.
• Se inocula el caldo con un asa previamente esterilizada y se incuba durante 18-24 horas en ATM normal.
• Un resultado positivo se verá un tubo turbio, un resultado negativo se verá un tubo transparente.

Test de CAMP

• Determina la capacidad de un microorganismo para producir una proteína conocida como factor CAMP.
• La proteína produce un efecto sinérgico con la β-hemolisina (esfingomielinasa) de S.aureus 25923 sobre eritrocitos.
• Se siembra una estría con la cepa de STAU ATCC y otra estría con la colonia desconocida en agar sangre, sin que haya contacto entre ellas.

Bacitracina

• La prueba puede utilizarse como diagnóstico presuntivo en la identificación de Streptococcus beta hemolítico del grupo A de Lancefield.
• Mide la susceptibilidad de una cepa al antibiótico bacitracina.
• Se realiza un 0,5 Mc Farland de la colonia en sospecha y se siembra en agar MH-sangre con una tórula de algodón.
• Se incuban durante 18-24 horas en ATM con Co2 y se observa el halo de inhibición: sensible si hay cualquier halo, resistente si hay resistencia de contacto de 6 mm.