Calibración y Control de Equipos

Calibración y Control de Equipos

• Calibración: Conjunto de operaciones para establecer la relación entre los valores de una magnitud de materiales de referencia y las señales que generan en un analizador o sistema de medida. Garantiza la exactitud de las especificaciones del equipo.
• Calibrador: Material de referencia usado para calibrar.
• Error de Calibración: Un error en la calibración (gráfica azul) origina un error sistemático.
• Rango de Medida: Es el intervalo de valores en los que se puede dar un resultado, generalmente en el intervalo de linealidad de la curva de calibración.
  • Si el valor sobrepasa el rango, se debe diluir la muestra para obtener un resultado.
  • Si el valor es muy bajo, se debe expresar como indetectable o concentrar la muestra para ganar sensibilidad analítica.

Tipos de Calibraciones

• Método de Mínimos Cuadrados: Es el método tradicional en el que se introducen calibradores de concentración conocida en el equipo y se traza la recta de calibración. Es el más utilizado.
• Método de Adición Estándar: Se utiliza cuando la matriz de la muestra contribuye a la señal analítica (efecto matriz). Consiste en añadir concentraciones crecientes de un estándar a diferentes alícuotas de la muestra para valorar su comportamiento.
• Método del Patrón Interno: Un patrón interno se añade a todas las muestras, incluidos el blanco y los calibradores, en una cantidad fija. Se usa para corregir la pérdida de analito durante la preparación o la entrada al equipo. El estándar interno es similar pero no idéntico al analito, asegurando que los efectos de la preparación sean los mismos para ambos. Es menos utilizado que los métodos anteriores.

Control de Calidad

• Control de Calidad: Aplicación de técnicas operativas para mantener la fiabilidad de un proceso y eliminar causas de defecto. Se utilizan materiales con la misma matriz que las muestras.
• Control de Calidad Interno (INTRAlaboratorio):
  • Se conoce el valor esperado.
  • Se deben usar controles que cubran toda la curva de calibración.
  • Es recomendable usar un control de calidad de un proveedor independiente del equipo.
  • Se realiza de forma regular, especialmente al inicio y durante el trabajo.
  • Si se obtiene un resultado erróneo, se debe investigar la causa.
  • Permite conocer la exactitud, precisión y error total a lo largo del tiempo.
• Control de Calidad Externo (INTERlaboratorio) o Ensayo de Aptitud:
• El valor esperado es desconocido.
• Se compara el valor obtenido con el de otros laboratorios con condiciones similares.
• Evalúa el programa de calidad interno y la dispersión de resultados entre laboratorios, y ayuda a seleccionar nuevas metodologías.
• Permite conocer el error total en un momento determinado.

Técnicas de Evaluación del Control de Calidad

• Evaluación del Control Interno:
  • Gráfica de Control de Levey-Jennings.
  • Gráfica de Radar.
  • Multirreglas de Westgard.
  • Técnica de Suma Acumulativa (CuSum).
• Evaluación del Control Externo:
  • Gráficas de Youden.

Gráfica de Control de Levey-Jennings

• Es la más utilizada.
• Representa los valores de los controles en un gráfico que muestra el valor esperado y las desviaciones estándar (1s, 2s, 3s).
• Se acepta el control si está dentro del rango de la media ± dos desviaciones estándar.

Gráfica de Radar

• Es similar a la de Levey-Jennings, pero permite representar varios parámetros en un mismo gráfico (ej., hemograma con Hb, leucocitos, hematíes).

Multirreglas de Westgard

• Complementan otros sistemas de evaluación de control de calidad, como la gráfica de Levey-Jennings.
• Sirven para detectar errores aleatorios y sistemáticos.
• Regla 12s: Se rechaza el control si el resultado excede las dos desviaciones estándar.
• Regla 13s: Se rechaza el control si el resultado excede las tres desviaciones estándar.
• Regla 22s: Se rechaza el control si dos medidas consecutivas exceden las dos desviaciones estándar.
• Regla R4s: Se rechaza el control si dos valores consecutivos se alejan entre sí cuatro desviaciones estándar.
• Regla 41s: Se rechaza el control si cuatro valores consecutivos exceden una desviación estándar por encima o por debajo de la media.
• Regla 10x: Se rechaza el control si 10 valores consecutivos están alejados de la media menos de 1 DE en el mismo sentido.

Gráfico de Suma Acumulada (CuSum)

• Se basa en sumar las diferencias entre el valor del control y el valor diana.
• Lo ideal es que el control oscile de forma igual por encima y por debajo del valor diana, de manera que la tendencia a largo plazo sea cero.
• Si la tendencia no es cero, sugiere un error sistemático.
• Se utiliza una plantilla V para estandarizar las desviaciones respecto al valor objetivo y determinar los puntos fuera de control.

Gráfico de Youden

• Se utiliza para evaluar el control externo.
• Se evalúan los valores de dos controles en diferentes laboratorios.

Errores en las Medidas

• Atendiendo a la Causa:
  • Error Aleatorio o Indeterminado:
    • Variaciones impredecibles temporales y espaciales, inevitables y de causas difíciles de determinar.
    • Resulta en falta de precisión (reproducibilidad).
    • Se evalúa mediante el coeficiente de variación o la desviación estándar.
  • Error Sistemático o Determinado:
    • Efecto reconocido, cuantificable y corregible mediante calibración.
    • Resulta en resultados precisos pero inexactos.
    • Se evalúa mediante el sesgo (error relativo y absoluto).
• Atendiendo a la Desviación Respecto al Valor Verdadero:
  • Error Absoluto (Ea): Diferencia entre el valor verdadero y el valor medido. Se expresa en valores absolutos (sin signo).
  • Error Relativo (Er): (X verdadero - X medido) / X verdadero * 100

Error Total

• Suma de los errores aleatorios (coeficiente de variación) y sistemáticos (sesgo).

Características de las Pruebas Diagnósticas

• Generales:
  • Sensibilidad Analítica: Capacidad del método para detectar el mínimo valor posible de la magnitud a determinar. La gráfica con mayor pendiente tiene mayor sensibilidad.
  • Selectividad: Capacidad de un método para distinguir una sustancia de otras similares, o para detectar específicamente cada componente de una muestra.
  • Exactitud: Concordancia entre el resultado de una medida y su valor verdadero o real. La inexactitud se relaciona con errores sistemáticos.
  • Precisión: Concordancia entre los valores de mediciones repetidas, es decir, REPRODUCIBILIDAD. La imprecisión está relacionada con errores aleatorios. Se valora con la desviación estándar y el coeficiente de variación.
  • Repetibilidad: Variación en condiciones INVARIABLES.
  • Reproducibilidad: Varician si se realiza algun cambio.
  • Robustez: Capacidad de un método para permanecer invariable ante pequeñas modificaciones ambientales o de procedimiento.

Características de las Pruebas Diagnósticas (Epidemiológicas)

• Características que no varían con la población:
  • Sensibilidad: Capacidad de la prueba para detectar la enfermedad en sujetos enfermos. Sensibilidad = VP / (VP + FN)
  • Especificidad: Capacidad de la prueba para detectar a los sanos. Especificidad = VN / (VN + FP)
• Regla Nemotécnica: Regla SE: Sensibilidad -> Enfermos, Sanos -> Especificidad
• Características que varían con la población:
  • Valor Predictivo Positivo (VPP): Probabilidad de tener la enfermedad si la prueba es positiva. VPP = VP / (FP + VP)
  • Valor Predictivo Negativo (VPN): Probabilidad de no tener la enfermedad si la prueba es negativa. VPN = VN / (FN + VN) -Al aumentar la prevalencia de la enfermedad, aumenta el valor predictivo positivo y disminuye el valor predictivo negativo -Para el cribado suele ser preferible usar pruebas de alta sensibilidad (pocos falsos negativos) y para la confirmación pruebas más específicas (pocos falsos positivos)

Curvas ROC

• Las curvas ROC relacionan la sensibilidad de la prueba frente a (1 – Especificidad).
• Permiten evaluar el rendimiento diagnóstico y el poder discriminatorio de un test.
• Área Bajo la Curva (AUC): Indica la probabilidad de clasificar correctamente a individuos sanos y enfermos seleccionados al azar.
  • [0.5, 0.6): Test malo
  • [0.6, 0.75): Test regular
  • [0.75, 0.9): Test bueno
  • [0.9, 0.97): Test muy bueno
  • [0.97, 1]: Test excelente
  • Valores AUC: entre 0 y 1

Intervalos de Referencia

• Conjunto de valores incluidos entre límites superior e inferior, basados en valores obtenidos de una población de referencia definida (sana, sexo, edad, etc.). Sirven para interpretar los resultados.
• Se calculan:
  • a) Los percentiles (si la distribución no es normal) o
  • b) La media +/- 2 veces la desviación estándar (si la distribución es normal).
• Luego se toma el 95% de los valores centrales (desechando los extremos, 2.5% por abajo y arriba)
• Los valores de referencia dependen de: -Método usado -Características de la población (edad, raza, sexo, etc) -Número de individuos que se cogen para realizarlo
• Se debe aprender un intervalo de referencia y marcar en el examen el que más se asemeje. Cuidado con ser poco flexible.
• Si el valor del paciente está en el intervalo de referencia no indica que esté sano, o viceversa.

Variabilidad Biológica

• Es la fluctuación fisiológica de los constituyentes de los fluidos humanos alrededor del punto homeostático.
• La variabilidad analítica de la medida debe mantenerse por debajo de la variabilidad biológica.
• Valor de Referencia de un Cambio (VRC) o Delta Check: Es la diferencia entre dos resultados consecutivos de un mismo individuo que es clínicamente relevante, indicando un cambio en su estado de salud o enfermedad no atribuible a la variación analítica y biológica.

Sistema Internacional de Unidades (SI)

• Unidades Básicas:
  • Longitud: metro (m)
  • Tiempo: segundo (s) 1 lambda = 1 µL = 1 mm3
  • Masa: kilogramo (kg)
  • Intensidad de corriente eléctrica: amperio (A)
  • Temperatura: kelvin (K)
  • Cantidad de sustancia: mol (mol)
  • Intensidad luminosa: candela (cd)
• Unidades Derivadas: Obtenidas mediante la combinación de unidades básicas.
  • Volumen: m³
  • Densidad: kg/m³
  • Fuerza: Newton (N)
  • Frecuencia: Hertz (Hz)
  • Presión: Pascal (Pa)
  • Potencia: vatio (W)
  • Carga eléctrica: Culombio (C)
  • Potencial eléctrico y fuerza electromotriz: Voltio (V)
  • Actividad catalítica: katal (kat) kat=mol/s
  • Velocidad: m/s
  • Trabajo y energía: Julio (J)
  • Temperatura: Kelvin (K)
  • Actividad de radiación: Becquerel
  • Exposición a radiación: Roentgen
• Múltiplos y Submúltiplos:
  • Tera (T): 10^12
  • Giga (G): 10^9
  • Mega (M): 10^6
  • Kilo (K): 10^3
  • Hecto (H): 10^2
  • Deca (D): 10^1
  • Deci (d): 10^-1
  • Centi (c): 10^-2
  • Mili (m): 10^-3
  • Micro (µ): 10^-6
  • Nano (n): 10^-9
  • Pico (p): 10^-12
  • Femto (f): 10^-15
  • Atto (a): 10^-18

Formas de Expresar la Concentración

• Masa Atómica
• Moléculas: H2O, C2O, H2SO4
• Masa Molecular
• Número de Avogadro: 6.023 x 10^23 entidades elementales (átomos o moléculas) en un mol Mol = gr_sustancia / Peso molecular

Clasificación de Sustancias

• Sustancias Puras: Elementos químicos.
• Compuestos Puros: Fórmulas moleculares (ej. ácido sulfúrico: H2SO4, 2 átomos de H, 1 átomo de S, 4 átomos de O).
• Mezclas: Material formado por dos o más sustancias puras, no combinadas químicamente. -Heterogéneas (agua y arena) -Homogeneas (agua y sal)
• Los Factores que afectan la solubilidad son:
  • Temperatura
  • Superficie de contacto
  • Agitación

Formas de Expresar la Concentración

• Molaridad: Es el número de moles de soluto por litro de disolución. no moles soluto Molaridad= volumen_disolución (1)

• Molalidad: Es el número de moles de solutos por kg de disolvente. Molalidad= n° moles_de_soluto kg_disolvente

• Normalidad: Es el número de equivalentes -gramo de soluto por un litro de disolución Normalidad = N°_equivalentes_gramos Litros disolución

• Relación entre Molaridad y Normalidad:

  • Para un ácido N = M x H+ (H+ protones)
  • Para una base N= M x ОН- (OH hidroxilos)

• Ejemplo:* Pasar 0,05 N de H2SO4 0,05 a M = 0,05M = 0,05 / 2 = 0,025M

• % en Peso = peso solutos / peso disolución x100

• % volumen = volumen soluto / volumen disolución x 100

• Partes por millón (ppm): gramos de soluto por cada millón de gramos de disolución Ejemplo: ¿A cuántas partes por millón equivale una disolución de NaCl al 13%? = 130000 ppm

Diluciones

• Procedimiento para preparar una disolución menos concentrada a partir de una más concentrada. Vi x Ci = Vf x Cf

Fases del Proceso Analítico y sus Posibles Errores

• Son: fases preanalítica, fase analítica y fase postanalítica
• Proceso de la muestra: actividades llevadas a cabo en el período comprendido entre su obtención y su análisis real
• Los errores más cometidos se dan la fase preanalítica
• Validacion técnica de resultados: es comprobar que la medida se realizó correctamente

Preanalítica

• Tipos de muestras
  • SUERO: Sin anticoagulante
  • PLASMA: Con anticoagulante
• Normativa ISO 6710:2018 la que unificó los colores de los tapones de los tubos de extracción laboratorio. - Tapón rojo: Con activador de coagulación aplicado por aspersión - Tapón oro: Con gel separador - Tapón azul: Con citrato de sodio OJO: citrato azul la relación es 1 anticoagulante : 9 sangre - Tapón lila: Con EDTA-K - Tapón negro: Citrato - Tapón rosa: Tiene com anticoagulante el EDTA y contiene aprotinina
• Requisitos: ORDEN DE EXTRACCION y Ayuno -HEMOCULTIVO -CITRATO DE SODIO/CTAD -SUERO CON Y SIN GEL SEPARADOR -HEPARINA CON Y SIN GEL SEPARADOR -EDTA CON Y SIN GEL SEPARADOR -INHIBIDOR GLICOLÍTICO -Para la extracción la aguja debe tener un ángulo de 15o -Evitar hemólisis

Interferencia

• Es la presencia de sustancias que alteran la determinación de un analito específico. Causas: -Extracción dificultosa, -Permanencia prolongada de la muestra sin centrifugar, choque térmico (exceso calor o frío), -Agitación excesiva de las muestras en el transporte, -Contaminación por detergentes, antisépticos, agua o reactivos residuales, Vaciar la muestra de sangre en tubo a través de la aguja de jeringa

Laboratorio de urgencias

Son aquellos que trabajan con PLASMA (HEPARINA DE LITIO) Prioridades:

• urgentes
• recién ingresados o situaciones concretas programadas (preoperatorios.
• pacientes hospitalizados

Transporte de mustras

• En el transporte se busca: LA TRAZABILIDAD, EL TIEMPO max: 6 horas y LA TEMPERATURA
• las categorías se dividen en: Categoría A: son Muestras biológicas, materia infecciosa que se transporta de manera que es capaz de causar incapacidad. Categoría A: Muestras biológicas que no cumplen con el categoría A

Calidad

Donabedian: Modelo tridimensional, con los pilares de LA ESTRUCTURA, DEL PROCESO, y DE LOS RESULTADOS

• Ciclo de Deming para la mejora continua Planear Hacer Verificar Actuar
• Normas ISO: normas internacionales sobre calidad y gestión. Son voluntarias Certificacion 9001 Acreditación 15189 Norma 17025
• los CRITERIOS son el objetivo. Los INDICADORES : medir el valor que mide. Y ESTÁNDAR: determina el nivel mínimo.

Mas Conceptos

• Eficiencia:Capacidad de reducir el mínimo los recursosusados para alcanzar los objetivos esta relacionado con costo economico
• Eficacia:: Capacidad de determinar los objetivos. la medida de eficacia de una intervención diagnóstica. cuando ésta se aplica EN CONDICIONES IDEALES.
• Efectividad: Capacidad de impactar favorablemente a través de los resultados:EN CONDICIONES HABITUALES DE USO.

Estadística

1. Medidas de centralización -Media Aritmética: la media da el promedio -Mediana: es la puntación que separa la mitad inferior y la superior -Moda : es el valor que mas se repite

2. Medidades de posición

   -Cuartiles: divide la serie de datos en 4 partes equitativas -Deciles: divide la serie de datos en 10 partes equitativas -Percentiles: divide la serie de datos en 100 partes equitativas

3. Medidas de dispersión

   - **Rango o recorrido:** El rango es la diferencia entre el mayor y el menor de los datos de
   

una distribución estadística. - Desviación media La desviación media es la media aritmética de los valores absolutos de las desviaciones respecto a la media. - Varianza La varianza es la media aritmética del cuadrado de las desviaciones respecto a la media. - Desviación estándar (DS) es la raíz cuadrada de la varianza. -Coeficiente de variación (CV) expresa la desviación estándar como porcentaje de la media aritmética, mostrando una mejor interpretación porcentual del grado de variabilidad que la desviación típica o estándar. Se calcula dividiendo la desviación típica entre la media x 100 . También es la extrapolación de la desviación típica de una serie de resultados cuando la media de esta serie se lleva desde su concentración a una concentración de 100

Osmosis vs dialis

• Osmosis: el agua pasa solo donde hay mas concentracion a traves de una membrana semipermeable
• Osmosis inversa: lo mismo a la osmosis pero hay presión provocando que el agua pase a donde hay menos concentración
• Diálisis: filtro selectivo que permite se salga el agua dependiendo de su función, usando membrana selectiva

Tipos de transporte celular

• TRANSPORTE DE MOLECULAS DE ELEVADA : Es endocitosis (va dentro ) , exocitosis ( hacia fuera del área celular) y transcitosis ( desde un espacio extracelular al otro espacio extracelular)