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Questions and Answers
Qual è un vantaggio del metodo indiretto nell'uso degli anticorpi?
Qual è un vantaggio del metodo indiretto nell'uso degli anticorpi?
Qual è il ruolo dell'enzima perossidasi nell'immunoistochimica?
Qual è il ruolo dell'enzima perossidasi nell'immunoistochimica?
Qual è un metodo di rivelazione dell'anticorpo secondario oltre alla fluorescenza?
Qual è un metodo di rivelazione dell'anticorpo secondario oltre alla fluorescenza?
Cosa produce l'enzima perossidasi quando agisce su diaminobenzidina e acqua ossigenata?
Cosa produce l'enzima perossidasi quando agisce su diaminobenzidina e acqua ossigenata?
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Quale affermazione è falsa riguardo all'anticorpo secondario?
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Cosa si forma nello spazio tra i due gruppi di lenti diotttrici?
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Qual è l'ingrandimento utile per un microscopio ottico?
Qual è l'ingrandimento utile per un microscopio ottico?
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Qual è il limite di risoluzione fornito dalla formula di Abbe per un microscopio ottico?
Qual è il limite di risoluzione fornito dalla formula di Abbe per un microscopio ottico?
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Quale fattore non influisce sul potere risolutivo di un microscopio ottico?
Quale fattore non influisce sul potere risolutivo di un microscopio ottico?
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Qual è l'effetto dell'aumento dell'indice di rifrazione del mezzo interposto sulla risoluzione?
Qual è l'effetto dell'aumento dell'indice di rifrazione del mezzo interposto sulla risoluzione?
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Cosa si utilizza per migliorare il limite di risoluzione in un microscopio?
Cosa si utilizza per migliorare il limite di risoluzione in un microscopio?
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Qual è il valore dell'indice di rifrazione per l'aria?
Qual è il valore dell'indice di rifrazione per l'aria?
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Quale valore rappresenta il potentiore risolutivo di un microscopio elettronico?
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Qual è il principale scopo delle lenti in un fascio elettronico?
Qual è il principale scopo delle lenti in un fascio elettronico?
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Che cosa crea la deflessione degli elettroni durante la loro collisione con gli atomi?
Che cosa crea la deflessione degli elettroni durante la loro collisione con gli atomi?
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Quale dei seguenti è un fissativo comunemente usato in micrografia elettronica?
Quale dei seguenti è un fissativo comunemente usato in micrografia elettronica?
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Qual è la dimensione richiesta per le fettine dei campioni da esaminare?
Qual è la dimensione richiesta per le fettine dei campioni da esaminare?
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Quale sostanza è utilizzata per il processo di disidratazione in preparativi micrografici?
Quale sostanza è utilizzata per il processo di disidratazione in preparativi micrografici?
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Qual è il ruolo del colorante elettronico nella preparazione dei campioni?
Qual è il ruolo del colorante elettronico nella preparazione dei campioni?
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Quali sono i mezzi di inclusione comunemente usati per ottenere sezioni sottili?
Quali sono i mezzi di inclusione comunemente usati per ottenere sezioni sottili?
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Quale tecnica è associata allo studio delle macromolecole come DNA e RNA?
Quale tecnica è associata allo studio delle macromolecole come DNA e RNA?
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Qual è lo scopo principale dell'analisi morfologica delle cellule?
Qual è lo scopo principale dell'analisi morfologica delle cellule?
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Quali strumenti vengono comunemente utilizzati per l'analisi morfologica?
Quali strumenti vengono comunemente utilizzati per l'analisi morfologica?
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Qual è la principale differenza tra la microscopia ottica e quella elettronica?
Qual è la principale differenza tra la microscopia ottica e quella elettronica?
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Cosa determina l'integrità dell'oggetto da osservare in microscopia?
Cosa determina l'integrità dell'oggetto da osservare in microscopia?
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Quale componente dell'occhio umano ha la funzione di regolazione della luce?
Quale componente dell'occhio umano ha la funzione di regolazione della luce?
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Cosa si intende con 'aberrazione' in un microscopio ottico?
Cosa si intende con 'aberrazione' in un microscopio ottico?
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Qual è il ruolo dei coni e bastoncelli nell'occhio umano?
Qual è il ruolo dei coni e bastoncelli nell'occhio umano?
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Quali tecniche sono utilizzate per l'analisi morfologica delle cellule?
Quali tecniche sono utilizzate per l'analisi morfologica delle cellule?
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Cosa accade quando un oggetto ha un indice di rifrazione più alto del mezzo circostante in un microscopio a contrasto di fase?
Cosa accade quando un oggetto ha un indice di rifrazione più alto del mezzo circostante in un microscopio a contrasto di fase?
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Qual è l'effetto di un anello di fase che provoca un ritardo di ¼ λ?
Qual è l'effetto di un anello di fase che provoca un ritardo di ¼ λ?
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Come si comportano i raggi deviati quando colpiscono gli organelli citoplasmatici?
Come si comportano i raggi deviati quando colpiscono gli organelli citoplasmatici?
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Qual è uno degli svantaggi dell’osservazione in contrasto di fase?
Qual è uno degli svantaggi dell’osservazione in contrasto di fase?
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Cosa riduce il contrasto in un microscopio a contrasto di fase?
Cosa riduce il contrasto in un microscopio a contrasto di fase?
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Qual è la funzione di un filtro verde in un microscopio a contrasto di fase?
Qual è la funzione di un filtro verde in un microscopio a contrasto di fase?
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Cosa caratterizza il microscopio a luce polarizzata?
Cosa caratterizza il microscopio a luce polarizzata?
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Qual è la relazione tra cammino ottico e lunghezza d'onda in un microscopio a contrasto di fase?
Qual è la relazione tra cammino ottico e lunghezza d'onda in un microscopio a contrasto di fase?
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Quale delle seguenti affermazioni riguardo le lectine è corretta?
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Quale di queste affermazioni sui fissativi è vera?
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Quale metodo istochimico viene utilizzato per identificare gli enzimi?
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Cosa catalizzano le ossidasi?
Cosa catalizzano le ossidasi?
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Qual è la principale funzione delle fosfatasi?
Qual è la principale funzione delle fosfatasi?
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Quali coloranti sono frequentemente usati per la dimostrazione degli acidi nucleici?
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Qual è il principio alla base della reazione di Feulgen?
Qual è il principio alla base della reazione di Feulgen?
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Cosa si ottiene dall'idrolisi acida blanda del tessuto fissato?
Cosa si ottiene dall'idrolisi acida blanda del tessuto fissato?
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Flashcards
Analisi Morfologica
Analisi Morfologica
L'analisi morfologica studia l'organizzazione strutturale delle cellule, delle loro parti e dei costituenti extracellulari. Utilizza microscopi per ingrandire l'immagine delle strutture in esame.
Microscopia
Microscopia
La microscopia utilizza dispositivi che ingrandiscono le immagini per l'osservazione di oggetti microscopici, come le cellule.
Microscopio Ottico
Microscopio Ottico
Un tipo di microscopio che utilizza la luce per illuminare l'oggetto e formare l'immagine, con un obiettivo a corta distanza focale.
Aberrazione
Aberrazione
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Obiettivo (Microscopio)
Obiettivo (Microscopio)
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Distanza Focale
Distanza Focale
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Analisi Biochimica e Funzionale
Analisi Biochimica e Funzionale
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Citofluorimetro
Citofluorimetro
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Metodo Indireto
Metodo Indireto
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Anticorpo Secondario
Anticorpo Secondario
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Marcatura con Enzimi
Marcatura con Enzimi
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Perossidasi
Perossidasi
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Fosfatasi Alcalina
Fosfatasi Alcalina
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Immagine intermedia (IR)
Immagine intermedia (IR)
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Potere di risoluzione
Potere di risoluzione
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Limite di risoluzione
Limite di risoluzione
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Formula di Abbe
Formula di Abbe
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Apertura numerica
Apertura numerica
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Microscopia a immersione
Microscopia a immersione
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Ingrandimento utile
Ingrandimento utile
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Microscopio elettronico vs. Microscopio ottico
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Contrasto di fase positivo
Contrasto di fase positivo
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Contrasto di fase negativo
Contrasto di fase negativo
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Anello di fase
Anello di fase
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Sfasamento
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Come appare un oggetto in contrasto di fase positivo?
Come appare un oggetto in contrasto di fase positivo?
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Come appare un oggetto in contrasto di fase negativo?
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Perché l'alone intorno agli oggetti in contrasto di fase è un problema?
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Come si risolve il problema della sovrapposizione di immagini in contrasto di fase?
Come si risolve il problema della sovrapposizione di immagini in contrasto di fase?
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Lectine
Lectine
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Identificazione dei polisaccaridi
Identificazione dei polisaccaridi
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Metodi istochimici per gli enzimi
Metodi istochimici per gli enzimi
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Fissazione
Fissazione
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Enzimi idrolitici
Enzimi idrolitici
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Enzimi non idrolitici
Enzimi non idrolitici
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Reazione di Feulgen
Reazione di Feulgen
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Coloranti basici
Coloranti basici
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Lenti nel microscopio elettronico
Lenti nel microscopio elettronico
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Come si forma l'immagine nel microscopio elettronico?
Come si forma l'immagine nel microscopio elettronico?
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Fissazione dei campioni per microscopia elettronica
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Quali fissativi si usano in microscopia elettronica?
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Disidratazione dei campioni per microscopia elettronica
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Inclusione e sezionamento dei campioni
Inclusione e sezionamento dei campioni
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Ultramicrotomi
Ultramicrotomi
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Colorazione a contrasto
Colorazione a contrasto
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Study Notes
Microscopia
- Cellule studiate morfologicamente e funzionalmente
- Analisi morfologica studia l'organizzazione strutturale delle cellule e dei loro componenti
- Microscopi utilizzati per ingrandire le immagini
- Integrità dell'oggetto importante per l'osservazione
- Analisi biochimica e funzionale studia la composizione chimica e il funzionamento delle cellule
Analisi Morfologica
- Strumenti: microscopi ottici ed elettronici, citofluorimetri
- Tecniche: preparazione conservativa dei campioni
- Occhio umano: cristallino proietta l'immagine sulla retina, iride regola la luce, coni e bastoncelli sono recettori fotosensibili
- Ottica geometrica: riflessione, assorbimento e rifrazione della luce, formazione di immagini reali con lenti
- Microscopia diretta per conoscere l'organizzazione strutturale: microscopia ottica ed elettronica
- L'occhio utile in tutti i tipi di microscopi indipendentemente dallo strumento
- Microscopia ottica usa la luce, elettronica usa gli elettroni
- Aberrazioni: difetti nell'immagine (cromatica e sferica)
- Obiettivo a corta distanza focale, oggetto posto appena fuori dal fuoco
- Immagine intermedia invertita e ingrandita
- Immagine secondaria virtuale, ingrandita e diritta (rispetto all'immagine intermedia)
- Ingrandimento calcolato dal rapporto tra le dimensioni dell'immagine e dell'oggetto
- Oculare e obiettivo per l'ingrandimento
Tipi di Microscopi Ottici
- Microscopio ottico in campo chiaro: strumento più comune per lo studio di preparati fissati, contrasto debole
- Microscopio ottico in campo scuro: condensatore deflette il fascio di luce per evidenziare i dettagli
- Microscopio a contrasto di fase: evidenzia le differenze di indice di rifrazione tra i componenti cellulari (utilizzato per le cellule viventi)
- Microscopio a luce polarizzata: distingue i materiali isotropi da quelli anisotropi osservando la trasmissione della luce polarizzata
- Microscopio interferenziale di Nomarski: mette in evidenza la tridimensionalità degli oggetti trasparenti non colorati
- Microscopio a fluorescenza: usa la luce ultravioletta per far brillare le sostanze fluorescenti presenti nel campione, identificando così caratteristiche specifiche
- Microscopio confocale: osserva solo un singolo piano a fuoco alla volta per ottenere immagini tridimensionali (creando una serie di sezioni)
Metodi di studio di cellule e tessuti viventi
- Le cellule viventi possono essere osservate per breve tempo
- Coloranti vitali per colorare le cellule viventi con l'obiettivo di individuare specifiche caratteristiche o funzioni
- Iniezione del colorante nell'animale intero (colorazione intra vitam)
- Immersione del tessuto nel colorante (colorazione sopravitale)
Metodi di studio di cellule e tessuti uccisi
- Fissazione: per preservare la struttura cellulare dai processi di autolisi
- Fissazione chimica: coagulazione delle proteine (alcol etilico, bicloruro di mercurio) o non coagulazione (formalina, acido osmico)
- Fissazione fisica: congelamento o riscaldamento
Inclusione e sezione
- Inclusione: per aumentare la consistenza del campione prima della sezione (rispetto al congelamento)
- Disidratazione in alcoli crescenti
- Diafanizzazione in solventi apolari
- Inclusione in paraffina e solidificazione per la sezione al microtomo
- Sezioni sottili per l'osservazione al microscopio (di solito 10 µm)
- Criostato per congelamento e sezionamento rapido (ottenere sezioni anche dal vivo)
- Permeabilizzazione: rendere il campione permeabile alle sostanze a cui si legheranno per la colorazione
Colorazione
- Colorazioni istologiche per visualizzare strutture specifiche
- Colorazioni dirette: colorante lega direttamente alla struttura
- Colorazioni indirette: sostanza di colorazione in precedenza per struttura successiva
- Ematossilina-eosina: colorante più comune (nuclei blu-violetti e cito plasma rosa)
- Coloranti elettronici (sali di metalli pesanti) per aumentare il contrasto nella microscopia elettronica
Immunoelettronica / Immunoistochimica
- Usare anticorpi per localizzare specifiche proteine nel campione
- Uso di fluorocromi o metalli pesanti per le visualizzazioni al microscopio
Microscopia Elettronica
- Microscopio elettronico a trasmissione (TEM): raggi di elettroni per visualizzare strutture interne in dettaglio
- Microscopio elettronico a scansione (SEM): superficie del campione e sua composizione con raggi di elettroni
- Microscopia elettronica a scansione per acquisire immagini tridimensionali e visualizzare la superficie dello spessore
- Esercitare accortezza per le caratteristiche di risoluzione differenti tra i due tipi di microscopia
- Elettroni secondari e raggi X rilevano le differenze nella composizione
- Aumentare la risoluzione a causa dell'uso di raggi elettroni anziché luce
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