Biologie Cellulaire - Microscopie et Théorie

La Biologie Cellulaire

• La résolution est la distance minimale entre deux objets distincts.
• Le microscope simple (loupe) utilise une seule lentille convergente.
• Le microscope composé utilise deux lentilles convergentes.
• Les microscopes optiques ont une résolution limitée par la longueur d'onde de la lumière visible (environ 200 nm).
• Les microscopes électroniques utilisent des électrons, et ont une meilleure résolution que les microscopes optiques (environ 1 nm).
• Le microscope électronique à transmission permet de visualiser des coupes fines de cellules.
• Le microscope électronique à balayage permet de visualiser la surface des cellules.
• La théorie cellulaire postulate que tous les êtres vivants sont constitués d'une ou plusieurs cellules.
• Schwann et Schleiden ont proposé la théorie cellulaire en 1839.
• Robert Hooke a découvert la cellule au 17ème siècle.
• Les molécules fluorescentes absorbent une longueur d'onde et émettent une lumière d'une longueur d'onde différente.

Microscopie et Résolution

• La lentille achromatique améliore la qualité de l'image en corrigeant les aberrations chromatiques.
• Les aberrations chromatiques se produisent quand différentes couleurs de lumière sont focalisées à des distances différentes.
• La résolution est limitée par la longueur d'onde de la lumière (ou des électrons) utilisée.
• La formule de la résolution est : Résolution = 0,61 × λ / n sin θ .
• n sin θ représente l'ouverture numérique. Plus cette valeur est élevée, meilleure est la résolution

La Microscopie Optique Avancée

• Tous les êtres vivants sont constitués d’une ou plusieurs cellules.
• L’observation des cellules nécessite de les préparer (couper mincement avec microtome et colorer).

Immunofluorescence Simple et Double

• L'immunofluorescence simple implique la fixation, perméabilisation, l'application d'anticorps fluorescents et l'observation.
• L'immunofluorescence double est utilisée pour identifier la localisation simultanée de deux molécules dans une cellule.

Immuno-microscopie électronique

• L'immuno-microscopie électronique est une technique pour étudier la localisation des protéines sur des tranches fines de tissus.
• La technique implique la fixation, la coupe fine et l'utilisation d'anticorps couplés à des particules d’or pour visualiser la localisation des protéines.

Microscopie à Fluorescence Confocale

• Le microscope à fluorescence confocale utilise un faisceau laser pour éclairer des points spécifiques de l'échantillon.
• Cela permet d'obtenir des images tridimensionnelles des cellules.

La GFP (Green Fluorescent Protein)

• La GFP est une protéine fluorescente qui peut être utilisée pour suivre le mouvement des protéines dans les cellules vivantes.

Composants de la Microscopie

• L'objectif est une lentille qui grossit l'image d'un objet.
• L'oculaire est une lentille qui agrandit l'image produite par l'objectif.
• Les microscopes électroniques utilisent des électrons à la place de la lumière.
• L'écran est une surface sur laquelle l'image est projetée lors de certains types de microscopie.