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Questions and Answers
¿Cuál es el propósito del buffer de pH 7.2 a 7.4 en la segunda etapa de la tinción de MGG?
¿Cuál es el propósito del buffer de pH 7.2 a 7.4 en la segunda etapa de la tinción de MGG?
¿Qué es lo que principalmente se tiñe con May-Grunwald?
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¿Cuál es el método de referencia de la tinción de MGG?
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¿Por qué se agrega glicerina al reactivo Giemsa?
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¿Cuál es el tiempo mínimo para secar el extendido?
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¿Cuál es la mejor muestra para realizar un frotis sanguíneo?
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¿Por qué no se debe utilizar heparina para frotis?
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¿Qué sucede si se utiliza un ángulo mayor a 45º para la extensión del frotis?
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¿Qué sucede si se utiliza una velocidad muy alta para la extensión del frotis?
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¿Qué es lipemia?
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Study Notes
Preparación de la muestra de sangre
- La muestra de sangre debe ser obtenida dentro de las 3 horas del procedimiento
- La muestra ideal es sangre venosa sin aditivo, pero si no es posible, puede ser sangre venosa anticoagulada con EDTA
- La heparina no es adecuada para frotis porque favorece la agregación plaquetaria y aumenta la basofilia del frotis
Extensión de la sangre
- La gota de sangre debe ser de 10 a 12 uL
- Se utiliza un ángulo de 45º para la extensión
- La extensión debe cubrir 2/4 del portaobjeto
- Un ángulo mayor a 45º produce un frotis grueso y corto, mientras que un ángulo menor a 45º produce un frotis largo y delgado
- Si se utiliza muy alta velocidad, el frotis queda grueso y corto, mientras que si se utiliza muy baja velocidad, el frotis queda largo y delgado
- Para muestras anémicas o con HTO bajo, se debe aumentar el ángulo o subir la velocidad
- Para muestras con poliglobulia, se debe disminuir el ángulo o velocidad
Artefactos y soluciones
- Si el frotis es delgado, hay una sobreestimación de monocitos y neutrófilos, mientras que si es muy grueso, hay una sobreestimación de linfocitos
- Lipemia se soluciona centrifugando la muestra, eliminando la grasa y reemplazándola por un diluyente isotónico
- Rouleaux se produce cuando la VHS está muy alta, lo que corresponde a la formación de pilas de moneda de eritrocitos
- Crioaglutininas se producen cuando hay anticuerpos que aglutinan a baja temperatura, haciendo que los GR se "coagulen" en ciertas partes de la muestra
Tinción de MGG
- La primera etapa es con May Grunwald para precipitar y fijar la muestra
- La segunda etapa utiliza un buffer de pH 7.2 a 7.4 para disolver las células y teñir el May Grunwald
- La tercera etapa utiliza Giemsa diluido, que tiñe la cromatina del núcleo y sustancias azurófilas
Etapas finales
- La solución buffer debe tener un pH de 6.8 a 7.2 para evitar precipitados
- Se agrega glicerina al reactivo Giemsa para evitar precipitados
- El secado del extendido debe ser de al menos 2 horas
- La limpieza de los portaobjetos se realiza con eter y alcohol 1:1
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Description
Aprende a realizar un análisis de sangre extendida, incluyendo los procedimientos y materiales necesarios, así como los errores que se pueden cometer y cómo evitarlos.