Aglutinace a její typy
43 Questions
0 Views

Aglutinace a její typy

Created by
@LawfulIguana

Podcast Beta

Play an AI-generated podcast conversation about this lesson

Questions and Answers

Jaký je hlavní rozdíl mezi přímou a nepřímou aglutinací?

  • Přímá aglutinace se používá pro detekci protilátek.
  • Nepřímá aglutinace zahrnuje přirozeně přítomné Ag na částicích.
  • Nepřímá aglutinace se odvíjí od navázání Ag nebo Ab na nosiče. (correct)
  • Přímá aglutinace zahrnuje umělé navázání Ag na částice.
  • Který z následujících testů je použitý k průkazu protilátek u salmonelózy?

  • Paul-Bunnellova reakce.
  • Latexfixační test.
  • Weil-Felixova reakce.
  • Widalova reakce. (correct)
  • Jaký typ aglutinace se používá k určování mikrobů pomocí antisér?

  • Nepřímá aglutinace.
  • Koloidní aglutinace.
  • Hemaglutinace.
  • Sklíčková aglutinace. (correct)
  • Která reakce zahrnuje živé bakterie a jejich lýzu?

    <p>Reakce aglutinace-lýzy.</p> Signup and view all the answers

    Jaké jsou příklady Ag, které lze detekovat v likvoru nebo moči?

    <p>Meningokoky a streptokoky.</p> Signup and view all the answers

    Který test slouží k průkazu heterofilních protilátek u infekcí?

    <p>Paul-Bunnellova reakce.</p> Signup and view all the answers

    Co je charakteristické pro hemaglutinaci?

    <p>Ag jsou přirozeně součástí povrchových struktur erytrocytů.</p> Signup and view all the answers

    Jaký je účel latexfixačního testu?

    <p>Průkaz revmatoidního faktoru.</p> Signup and view all the answers

    Jaký je význam indexu pozitivity (IP) v serologických testech?

    <p>Pomáhá určit, zda je osoba nemocná na základě měření séra.</p> Signup and view all the answers

    Co způsobuje zvýšení senzitivity testu?

    <p>Možnost, že zdraví jedinci budou označeni za nemocné.</p> Signup and view all the answers

    Jaké fáze se zohledňují v laboratorních charakteristikách testů?

    <p>Preanalytická fáze, specificita a senzitivita metod.</p> Signup and view all the answers

    Jaký je vztah mezi specificitou a senzitivitou testu?

    <p>Vysoká senzitivita obvykle snižuje specificitu.</p> Signup and view all the answers

    Jaký faktor může nejvíce ovlivnit laboratorní chyby?

    <p>Nepřesnost pomůcek, zařízení a lidský faktor.</p> Signup and view all the answers

    Co je účelem gelové elektroforézy?

    <p>Separace proteinů podle jejich velikosti v polyakrylamidovém gelu</p> Signup and view all the answers

    Jaký je princip přenosu proteinů pomocí blottingu?

    <p>Přenos proteinů na membránu pomocí elektroproudu</p> Signup and view all the answers

    Jaký je nejčastěji používaný materiál pro blotovací membrány?

    <p>Nitrocelulóza nebo PVDF</p> Signup and view all the answers

    Jaká reakce se používá při detekci proteinů v rámci serologické analýzy?

    <p>Enzymatická reakce jako je ELISA</p> Signup and view all the answers

    Která z následujících metod se NEřadí mezi molekulární diagnostické metody?

    <p>Přímá mikroskopie</p> Signup and view all the answers

    Co je hlavním cílem hybridizačních metod?

    <p>Identifikace specifických nukleotidových sekvencí</p> Signup and view all the answers

    Jaké složky zahrnuje master mix pro PCR?

    <p>DNA polymerázu, primery a dNTPs</p> Signup and view all the answers

    Jaké je hlavní využití západní blottingové techniky?

    <p>Detekce specifických protilátek v séru</p> Signup and view all the answers

    Jaké použití má zesílení nukleových kyselin pomocí amplifikačních metod?

    <p>Zvýšení množství specifických sekvencí</p> Signup and view all the answers

    Jaké jsou charakteristické znaky rozdělení proteinů do bandů?

    <p>Proteiny se separují podle molekulové hmotnosti</p> Signup and view all the answers

    Co způsobuje terminaci syntézy při sekvenování DNA?

    <p>Přítomnost dideoxynukleotidu</p> Signup and view all the answers

    Jaký je přibližný rozsah délky sekvence, kterou lze určit v jedné sekvenační reakci?

    <p>400-900 nukleotidů</p> Signup and view all the answers

    Jakým způsobem se detekují nukleotidy během sekvenování?

    <p>Pomocí různých fluorescenčních barviv</p> Signup and view all the answers

    Jak bereme v úvahu délku produktů při sekvenování?

    <p>Dle pozic určitého typu nukleotidu v templátovém vlákně</p> Signup and view all the answers

    Jaký je význam sekvenačních technik mimo mikrobiologii?

    <p>Diagnostika vrozených vývojových vad</p> Signup and view all the answers

    Jaké informace lze získat pomocí molekulárních metod v mikrobiologii?

    <p>Identifikace infekčního agens</p> Signup and view all the answers

    Jaké jsou epidemiologické charakteristiky při sekvenování?

    <p>Typizace kmenů</p> Signup and view all the answers

    Jaké chyby mohou nastat při interpretaci výsledků nepřímého průkazu?

    <p>Chybné přítomnosti genů rezistence</p> Signup and view all the answers

    Jaký typ vlákna je templátový při sekvenování?

    <p>DNA vlákno</p> Signup and view all the answers

    Jakým způsobem lze měřit délku nedokončených úseků komplementárního vlákna?

    <p>Pomocí elektroforetické separace</p> Signup and view all the answers

    Jaký je obvyklý typ protilátek, které se první objevují po infekci?

    <p>IgM</p> Signup and view all the answers

    Jaká je dynamika titru protilátek při sérokonverzi?

    <p>Titry rostou o 4x v průběhu 14 dnů.</p> Signup and view all the answers

    Jaký význam má vyšetření párových sér?

    <p>Vyloučení laboratorních chyb.</p> Signup and view all the answers

    Jaký faktor může negativně ovlivnit výsledky sérologického vyšetření?

    <p>Přítomnost revmatoidního faktoru.</p> Signup and view all the answers

    Co zahrnuje ovlivňující faktory při hodnocení protilátek?

    <p>Všechny aspektí jako etiopatogeneze choroby, mikroorganismy a stav imunitního systému.</p> Signup and view all the answers

    Co signalizuje přítomnost IgM protilátek?

    <p>Aktuální infekci.</p> Signup and view all the answers

    Jak se mění hladiny protilátek v průběhu onemocnění?

    <p>Zahajují vzestup během prvních deseti dnů.</p> Signup and view all the answers

    Jaké laboratorní metody mohou být použity k detekci protilátek?

    <p>ELISA a KFR.</p> Signup and view all the answers

    Kdy se objevují protilátky v organismu po prodělání onemocnění?

    <p>Po 10 až 14 dnech.</p> Signup and view all the answers

    Jaký vliv má gravidita na imunitní systém pacienta?

    <p>Zeslabuje imunitní odpověď.</p> Signup and view all the answers

    Study Notes

    Aglutinace

    • Aglutinace je reakce, která probíhá s antigeny (Ag) a protilátkami (Ab).
    • Přímá aglutinace: Ag jsou přirozeně součástí povrchu částic, např. antigeny krevních skupin.
    • Nepřímá aglutinace: Ag se uměle navazuje na povrch částic, např. latexové částice, erytrocyty.
    • Průkaz Ag: Nepřímá aglutinace se využívá k průkazu Ag, jako jsou meningokoky, streptokoky, pneumokoky a rotaviry v likvoru, séru, moči, sputu a stolici.
    • Průkaz protilátek: Nepřímá aglutinace se také používá k průkazu protilátek např. latexfixační testy pro revmatoidní faktor.

    Sklíčková aglutinace

    • Sklíčková aglutinace se používá k průkazu Ag (určování mikrobů pomocí antisér), například salmonely, shigely a enteropatogenní E.coli.
    • Průkaz protilátek: Sklíčková aglutinace se také používá k průkazu protilátek.
    • Widalova reakce: Používá se k průkazu protilátek u salmonelóz. Sérum se ředí a reakce probíhá přes noc. Odcit se provádí otáčením zkumavek a pozorováním víření aglutinátu.
    • Další použití: Sklíčková aglutinace se používá i k průkazu protilátek proti yersiniím, listeriím, franciselám, brucelám (Wrightova reakce), ricketsiím (Weil-Felixova reakce) a proti leptospirám. U leptospir se provádí současně i lýza bakterií – „reakce aglutinace-lýzy“.

    Hemaglutinace

    • Hemaglutinace je reakce, kde Ag jsou erytrocyty.
    • Paul-Bunnellova reakce: Používá se k průkazu heterofilních Ab (reagují s erytrocyty jiných živočišných druhů) u infekční mononukleózy.

    Western blot

    • Western blot je detekční metoda, která se používá k detekci a identifikaci specifických proteinů v biologických vzorcích.
    • Krok 1: Příprava Ag: Proteiny se oddělují elektroforézou v polyakrylamidovém gelu a poté se přenesou na membránu (nitrocelulózová nebo PVDF).
    • Krok 2: Detekce: Detekce specifických proteinů na membráně probíhá pomocí serologické reakce (jako ELISA v jamce).
    • Využití: Western blot se používá k potvrzení HIV infekce, diagnostice borreliózy, hepatitid a dalších onemocnění.

    Molekulární metody

    • Molekulární metody se využívají k detekci a identifikaci infekčních agens na bázi nukleové kyseliny (DNA a RNA).
    • Cíle: Definice principu molekulárních metod, popis principu metod (hybridizační, amplifikační, sekvenační), popis složek master mixu pro PCR.
    • Sekvenování: Sekvenování DNA umožňuje určit pořadí nukleotidů (A, T, C, G) v úseku DNA.
    • Princip: Při syntéze nového vlákna DNA dochází k ukončení (terminaci) syntézy v místě určitého nukleotidu. Vznikají tak nedokončené úseky komplementárního vlákna, jejichž délka se dá zjistit pomocí elektroforézy v gelu.
    • Praktické provedení: Sekvenování probíhá ve čtyřech oddělených zkumavkách, v každé dochází k terminaci reakce v pozici jiného typu nukleotidu (A, T, C nebo G). Délka produktů v dráze odpovídá pozicím určitého typu nukleotidu v templátovém vlákně.
    • Detekce: Detekce produktů sekvenování probíhá v kapilární elektroforéze, kde jsou nukleotidy značeny různými fluorescenčními barvami, a detekují se laserem.
    • Využití: Sekvenování se používá k popisu genomu mikroorganismů, identifikaci mikroorganismů (porovnáním s databází), hledání mutací (detekce rezistence mikroorganismů), diagnostice vrozených vývojových vad, onemocnění na genetickém podkladě (Leidenská mutace, metabolická onemocnění) a v onkologii.

    Molekulární metody v mikrobiologii

    • Využití: Cílená detekce infekčního agens ve vzorku, stanovení kvantity infekčního agens, detekce genů pro rezistenci, sekvenace genomu mikroorganismů a epidemiologické charakteristiky (typizace kmenů).

    Interpretace mikrobiologického nálezu

    • Cíle: Popsat souvislosti interpretace, definovat možné chyby při interpretaci výsledků nepřímého průkazu.
    • Dynamika protilátek: Změny hladin protilátek v průběhu onemocnění, vyšetření 2 vzorků séra.
    • Anamnestické titry: Protilátky v organismu po prodělání onemocnění.
    • Sérologické vyšetření: Slouží k určení, zda člověk prodělává onemocnění. Hodnotí se výše a dynamika titru protilátek (vzestup, pokles).
    • Vzestup titru: Vzestup titru protilátek 4x svědčí pro infekci.
    • Sérokonverze: První vzorek negativní, po 14 dnech pozitivní, svědčí pro infekci.
    • Tvorba protilátek: V počátku onemocnění se většinou objevují IgM protilátky, později IgG protilátky.
    • Vyšetření párových sér: Provádí se současně dva vzorky séra, čímž je vyloučena laboratorní chyba.

    Faktory ovlivňující interpretaci

    • Eetiopatogeneze choroby: Stadium a charakter onemocnění.
    • Mikroorganismus: Například neprotilátková imunita (TBC) nebo napadení buněk imunitního systému (CMV, HIV).
    • Stav imunitního systému pacienta: Věk, gravidita, imunitní poškození.
    • Použité laboratorní metody: Citlivé reakce (ELISA, IF, neutralizace) – pozitivní dříve, méně citlivé reakce (KFR, aglutinace) – pozitivní nález svědčí pro čerstvou infekci.
    • Revmatoidní faktor: Přítomnost IgM protilátek proti vlastním IgG. Komplex IgG-IgM může vést k falešně pozitivní reakci na přítomnost IgM.

    Dozrávání imunitního systému

    • Vývoj produkce imunoglobulinů: Po porodu se rozvíjí produkce imunoglobulinů.
    • Dynamika protilátek: Varí se dle infekčního agens a průběhu onemocnění.
    • Počáteční fáze: Po prvním kontaktu s antigenem vznikají IgM (i IgA) protilátky.
    • Změna titru: První protilátky IgM (event.IgA) se ztratí během týdne až měsíce.
    • IgG protilátky: Objevují se později, s pozvolným nástupem, a můžou přetrvávat dlouhou dobu.

    Index pozitivity (IP)

    • Vyjadřuje výsledky pomocí bezrozměrného čísla, kde se srovnává hodnota vzorku pacienta s hodnotou standardního séra.
    • Hodnocení: IP < 0,9 – negativní, IP > 1,1 – pozitivní, IP = 0,9–1,1 – hraniční +/- 10 % kolem hodnoty standardního séra.

    Laboratorní charakteristiky

    • Senzitivita: Pravděpodobnost, že test bude pozitivní u ​​nemocných. Vyšší senzitivita znamená méně falešně negativních výsledků.
    • Specifita: Pravděpodobnost, že test bude negativní u zdravých. Vyšší specificita znamená méně falešně pozitivních výsledků.
    • Laboratorní chyba: Chyba měření, která zahrnuje nepřesnosti pomůcek, zařízení, reagencií a lidský faktor.

    Interpretace nálezů

    • Interpretace musí být vždy spojena s klinickým stavem a s anamnézou pacienta.
    • Nikdy se neléčí laboratorní nález, ale vždy nemoc pacienta.
    • „Titritida“: Přítomnost protilátek sama o sobě neznamená nemoc.
    • Řešení rozporů: Opakování testu, sledování vývoje, použití jiných metod.

    Dynamika protilátek

    • Příklad: Epstein-Barrové virus (EBV) a Toxoplasma gondii.
    • Sérologické markery: Hepatitida A (VHA) a Hepatitida B (VHB).

    Studying That Suits You

    Use AI to generate personalized quizzes and flashcards to suit your learning preferences.

    Quiz Team

    Description

    Tento kvíz se zaměřuje na koncept aglutinace a její různé typy, včetně přímé a nepřímé aglutinace. Umožní vám otestovat vaše znalosti o reakcích antigenů a protilátek, jakož i o sklíčkové aglutinaci a jejím využití v diagnostice. Prověřte si, jak dobře chápete důležité detaily a aplikace těchto procesů.

    More Like This

    Use Quizgecko on...
    Browser
    Browser