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Questions and Answers
Cuál es el primer paso en el proceso de generación de ADN recombinante?
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Cuál de las siguientes afirmaciones sobre métodos químicos de transfección es correcta?
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Cuál es una de las aplicaciones de los cultivos celulares derivados de tejidos animales?
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Qué característica tienen los liposomas en el contexto de la transfección?
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Cuál de las siguientes alternativas describe mejor el propósito del ADN recombinante?
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¿Cuál de las siguientes características se asocia con la microinyección en la transferencia de ADN recombinante?
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¿Cuál es una de las limitaciones de la transferencia génica mediante virus?
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¿Qué tipo de transfección se caracteriza porque el ADN exógeno se pierde gradualmente con la división celular?
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En la biolística, ¿qué se utiliza para disparar las partículas de material genético?
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¿Cuál de los siguientes métodos es menos invasivo en la transfección de células vegetales en comparación con la biolística?
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¿Qué característica define a los organismos auxótrofos?
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¿Cuál es la función principal de la timidina quinasa (TK) en el contexto del uso de fármacos como ganciclovir?
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Si un gen de interés se inserta en un sitio que interfiere con la lectura del gen lacZ, ¿cuál será el resultado en las colonias?
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¿Cuál de los siguientes no es un componente del procedimiento para la generación de animales transgénicos?
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¿Qué enzima codifica el gen GUS y cuál es su función principal?
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Study Notes
ADN Recombinante
- Molécula de ADN creada artificialmente combinando fragmentos de ADN de diferentes orígenes.
- Permite introducir nuevas características o estudiar la función específica de genes.
Proceso para generar ADN recombinante
- Aislamiento del gen de interés.
- Inserción en un vector de clonación o expresión.
- Uso de enzimas de restricción y ligasa para formar la molécula de ADN recombinante.
- Introducción en la célula huésped.
Células hospedadoras de ADN exógeno
- Microorganismos: bacterias y levaduras.
- Plantas superiores: células o tejidos de cultivo o individuos adultos completos.
Usos del ADN recombinante
- Desarrollo de alimentos transgénicos.
- Producción de proteínas terapéuticas.
- Biorremediación (uso de microorganismos, hongos, o enzimas para restaurar un medio alterado).
Sistemas de transfección (entrega de genes)
-
Métodos químicos:
- Fosfato cálcico: ADN y cloruro de calcio forman un precipitado que entra en la célula (endocitosis). Bajo rendimiento.
- Policationes o polímeros catiónicos: Policationes que interactúan con ADN y facilitan la entrada celular por endocitosis. Pueden ser tóxicos.
-
Métodos físicos:
- Electroporación: Se utilizan campos eléctricos para crear poros en la membrana celular que permiten la entrada de ADN.
- Nucleofección: variante de electroporación para células difíciles de transfectar.
- Microinyección: Introducción directa de ADN en el núcleo celular mediante una micropipeta.
- Biolística: Disparo de partículas cubiertas con ADN a células diana.
-
Métodos biológicos:
- Transferencia génica mediante virus: El gen se integra en el genoma viral, infectar la célula.
Métodos de selección de células recombinantes (transfectadas)
- Ciertas células solo sobreviven si contienen el nuevo AND.
-
Marcadores de selección: resistencias a antibióticos o auxotrofía complementación.
- Antibióticos: crecimiento selectivo.
- Genes indicadores (reporter): producción de un producto adicional detectable.
Cultivos 3D o organotípicos
- Estructuras de células crecidas en 3D para replicar tejidos originales.
- Usado para imitar la función de órganos (piel, cerebro, etc.) con tejidos o embriones.
- Utilizan materiales biodegradables (p.ej., Ácido poliglicólico (PGA) y Ácido poliláctico (PLA)).
Hibridación somática
- Fusión de células de diferentes orígenes, conserva parte de los cromosomas.
Co-cultivos
- Cultivos que tienen más de un tipo de célula o tejido para estudiar la interacción entre las células.
- Imitan los sistemas complejos del cuerpo.
Ingeniería Tisular Funcional
- Ingeniería de tejidos que usa células y materiales.
- Para el trasplante o promoción de la regeneración de tejidos en el paciente por ejemplo, o para tratamientos.
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Description
Explora el fascinante mundo del ADN recombinante, una molécula artificial que combina fragmentos de ADN de diversas fuentes. Aprende sobre el proceso de creación, las células hospedadoras y sus aplicaciones en la biotecnología, incluyendo el desarrollo de alimentos transgénicos y la producción de proteínas terapéuticas.
