ADN Recombinante y Células Huésped

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Questions and Answers

¿Cuál de las siguientes desventajas es característica de la microinyección?

  • Requiere equipos costosos
  • Los resultados son impredecibles
  • No es adecuada para procedimientos en los que se requieren grandes cantidades de recombinantes (correct)
  • No se puede utilizar en células animales

¿Cuál es una ventaja de la biolística frente a otros métodos de transferencia genética?

  • Usa virus para facilitar el proceso
  • No requiere personal cualificado
  • Es menos invasiva en células vegetales en comparación con Agrobacterium (correct)
  • Permite la introducción de grandes cantidades de ADN

¿Qué tipo de transfección permite que el ADN exógeno se transmita a la descendencia celular?

  • Transfección no programada
  • Transfección transitoria
  • Transfección estable (correct)
  • Transfección reversible

¿Cuál es un ejemplo de marcador de selección utilizado en células recombinantes?

<p>Antibióticos que permiten el crecimiento selectivo (D)</p> Signup and view all the answers

¿Cuál de las siguientes afirmaciones sobre la transferencia génica mediante virus es correcta?

<p>Permite infectar embriones o células pluripotentes cultivadas in vitro (B)</p> Signup and view all the answers

¿Cuál es la ventaja principal del uso de reactivos basados en lípidos catiónicos para la introducción de ácidos nucleicos en las células?

<p>Aprovechan las propiedades de los liposomas y presentan baja toxicidad. (A)</p> Signup and view all the answers

En el proceso de fusión de protoplastos, ¿cuál es el primer paso que se realiza?

<p>Transferir el ADN recombinante a una célula bacteriana. (B)</p> Signup and view all the answers

¿Cuál de las siguientes opciones describe una desventaja de la nucleofección?

<p>Requiere condiciones específicas para cada tipo celular. (D)</p> Signup and view all the answers

¿Qué método mecánico se utiliza para crear electroporos en la membrana plasmática de una célula viva?

<p>Electroporación. (B)</p> Signup and view all the answers

¿Cuál de las siguientes afirmaciones es cierta respecto a la electroporación?

<p>Genera electroporos temporales en la membrana plasmática. (C)</p> Signup and view all the answers

¿Cuál es la función del operón LacZ en el contexto de los genes reporteros?

<p>Transformar análogos de la lactosa en productos azules. (A)</p> Signup and view all the answers

¿Qué son los organismos auxótrofos?

<p>Organismos que requieren compuestos externos debido a mutaciones. (B)</p> Signup and view all the answers

¿Cuál es el primer paso en la generación de animales transgénicos mediante la transfección de células madre embrionarias?

<p>Cultivo y modificación de células madre embrionarias. (A)</p> Signup and view all the answers

¿Qué generan las enzimas como la β-glucuronidasa en investigación biotecnológica?

<p>Productos de color azul a partir de β-glucurónidos. (C)</p> Signup and view all the answers

¿Cuál es el propósito de usar fármacos como el ganciclovir en la selección de células modificadas?

<p>Detectar la presencia de timidina quinasa para seleccionar células. (A)</p> Signup and view all the answers

¿Cuál es la finalidad de la fertilización in vitro?

<p>Generar embriones para implantarlos en el útero materno. (D)</p> Signup and view all the answers

¿Cuál de las siguientes es una característica de la hibridación somática?

<p>Producción de anticuerpos en células híbridas. (D)</p> Signup and view all the answers

¿Qué técnica se utiliza para la introducción de espermatozoides en el óvulo en casos de fertilidad masculina comprometida?

<p>Microinyección intracitoplasmática (ICSI). (D)</p> Signup and view all the answers

¿Qué son los hibridomas?

<p>Células híbridas formadas por la fusión de células cancerígenas con células de interés. (B)</p> Signup and view all the answers

¿Cuál es un objetivo de la obtención de células madre embrionarias?

<p>Desarrollar terapias para enfermedades genéticas. (C)</p> Signup and view all the answers

Flashcards

Microinyección

Método de introducción directa del ADN recombinante en el núcleo de la célula huésped mediante una aguja.

Biolística

Técnica que usa partículas recubiertas de ADN para introducir el material genético en las células.

Transferencia Génica mediante Virus

Transferencia de genes a células mediante virus modificados que transportan el gen deseado, sin factores de virulencia.

Transfección Estable

Un tipo de transfección en el que el ADN exógeno se integra en el genoma de la célula huésped y se transmite a las células hijas.

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Transfección Transitoria

Un tipo de transfección en el que el ADN exógeno no se integra en el genoma de la célula huésped; se pierde gradualmente con las divisiones celulares.

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Transfección lipídica

Método que utiliza liposomas y policationes para introducir ácidos nucleicos en el interior celular.

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Fusión de protoplastos

Técnica que fusiona células animales o vegetales con bacterias que contienen plásmidos recombinantes mediante PEG (polietilenglicol).

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Electroporación

Método que consiste en aplicar un campo eléctrico a una célula viva para crear poros microscópicos en la membrana plasmática por los que entra el ADN.

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Nucleofección

Método de transfección por electroporación que permite introducir ADN o ARN directamente en el núcleo de células difíciles de transfectar.

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Relación entre eficiencia de transfección y viabilidad

Desventaja de la electroporación, donde una mayor eficiencia de transfección se traduce en una menor viabilidad del cultivo.

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Organismos auxótrofos

Organismos que no pueden sintetizar compuestos esenciales debido a mutaciones genéticas, necesitando que estos compuestos se les suministren en sus medios de cultivo.

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Complementación de auxotrofías

Consiste en introducir una copia funcional del gen defectuoso en un organismo auxótrofo, restaurando su capacidad de sintetizar el compuesto esencial.

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Timidina quinasa (TK)

Enzima que convierte análogos de nucleósidos como el ganciclovir o aciclovir en formas tóxicas para las células, utilizada en la selección de células modificadas genéticamente.

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Genes reporter

Genes que codifican proteínas que producen una reacción detectable, como color, fluorescencia o bioluminiscencia, utilizados para identificar células que han sido modificadas genéticamente.

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Transfección de ESCs

Procedimiento para generar animales transgénicos que consiste en modificar genéticamente células madre embrionarias (ESCs), inyectarlas en blastocistos y luego implantar estos blastocistos en hembras receptoras.

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Fertilización in Vitro

Proceso de unión de un óvulo y un espermatozoide en un laboratorio para generar embriones.

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Estimulación del desarrollo embrionario

Estimulación del desarrollo embrionario después de la transferencia nuclear.

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Fertilización in Vitro (investigación)

Técnica para la obtención de células madre embrionarias para investigación.

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Hibridación somática

Fusión de células de diferentes orígenes, combinando características de cada progenitor.

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Heterocarionte

Célula multinucleada que contiene núcleos genéticamente diferentes.

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Study Notes

ADN Recombinante

  • ADN recombinante es una molécula de ADN creada artificialmente combinando fragmentos de ADN de diferentes orígenes.
  • Permite introducir nuevas características o estudiar la función de genes específicos en organismos diferentes.
  • Proceso para generar ADN recombinante:
    • Aislamiento del gen de interés.
    • Inserción en un vector (clonación o expresión).
    • Uso de enzimas de restricción y ligasa para combinar el ADN.
    • Introducción en una célula huésped.

Células Huésped

  • Microorganismos (bacterias y levaduras).
  • Células o tejidos en cultivo, individuos adultos completos.
  • Usos:
    • Desarrollo de alimentos modificados genéticamente.
    • Fabricación/producción de compuestos.
    • Biorremediación (recuperación de entornos contaminados).

Transfección

  • Metodologías para introducir ADN exógeno en células en cultivo:
    • Métodos químicos:
      • Fosfato cálcico
      • Policaiones o polímeros catiónicos
    • Métodos físicos:
      • Electroporación
      • Nucleofección
      • Microinyección
      • Biolística
    • Métodos biológicos: Transferencia génica mediante virus.
    • Fusión celular: métodos adicionales para realizar la transfección, incluyendo fusión de protoplastos.

Selección de Células Transformadas

  • Selección de células recombinantes (transfectadas).
    • Tipos de transfección: transitoria (temporal) vs estable (permanente).
    • Marcadores de selección (antibióticos, genes reporter): identifican con facilidad las células que han captado nuevo material genético.

Otras Aplicaciones

  • Generación de animales transgénicos
    • Transferencia de células madre embrionarias (ESCs)
    • Procedimiento: cultivo y modificación de ESCs, selección y transferencia a blastocistos implantado en hembras receptoras.
  • Cultivos celulares 3D, Organoides, Esferoides
    • Técnicas para crear estructuras multicelulares similares a los tejidos in vivo.
    • Técnicas para la generación de cultivos 3D (cultivos histotípicos, organotípicos).
  • Ingeniería tisular o tejidos
    • Usos: medicina regenerativa (implantes de tejidos producidos in vitro).
    • Uso de andamios (scaffold).
  • Co-cultivos
    • Usos: estudiar funciones de células en medio microambiente (ej: estudio de interacciones entre células).

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