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Questions and Answers
¿Cuál de las siguientes desventajas es característica de la microinyección?
¿Cuál de las siguientes desventajas es característica de la microinyección?
- Requiere equipos costosos
- Los resultados son impredecibles
- No es adecuada para procedimientos en los que se requieren grandes cantidades de recombinantes (correct)
- No se puede utilizar en células animales
¿Cuál es una ventaja de la biolística frente a otros métodos de transferencia genética?
¿Cuál es una ventaja de la biolística frente a otros métodos de transferencia genética?
- Usa virus para facilitar el proceso
- No requiere personal cualificado
- Es menos invasiva en células vegetales en comparación con Agrobacterium (correct)
- Permite la introducción de grandes cantidades de ADN
¿Qué tipo de transfección permite que el ADN exógeno se transmita a la descendencia celular?
¿Qué tipo de transfección permite que el ADN exógeno se transmita a la descendencia celular?
- Transfección no programada
- Transfección transitoria
- Transfección estable (correct)
- Transfección reversible
¿Cuál es un ejemplo de marcador de selección utilizado en células recombinantes?
¿Cuál es un ejemplo de marcador de selección utilizado en células recombinantes?
¿Cuál de las siguientes afirmaciones sobre la transferencia génica mediante virus es correcta?
¿Cuál de las siguientes afirmaciones sobre la transferencia génica mediante virus es correcta?
¿Cuál es la ventaja principal del uso de reactivos basados en lípidos catiónicos para la introducción de ácidos nucleicos en las células?
¿Cuál es la ventaja principal del uso de reactivos basados en lípidos catiónicos para la introducción de ácidos nucleicos en las células?
En el proceso de fusión de protoplastos, ¿cuál es el primer paso que se realiza?
En el proceso de fusión de protoplastos, ¿cuál es el primer paso que se realiza?
¿Cuál de las siguientes opciones describe una desventaja de la nucleofección?
¿Cuál de las siguientes opciones describe una desventaja de la nucleofección?
¿Qué método mecánico se utiliza para crear electroporos en la membrana plasmática de una célula viva?
¿Qué método mecánico se utiliza para crear electroporos en la membrana plasmática de una célula viva?
¿Cuál de las siguientes afirmaciones es cierta respecto a la electroporación?
¿Cuál de las siguientes afirmaciones es cierta respecto a la electroporación?
¿Cuál es la función del operón LacZ en el contexto de los genes reporteros?
¿Cuál es la función del operón LacZ en el contexto de los genes reporteros?
¿Qué son los organismos auxótrofos?
¿Qué son los organismos auxótrofos?
¿Cuál es el primer paso en la generación de animales transgénicos mediante la transfección de células madre embrionarias?
¿Cuál es el primer paso en la generación de animales transgénicos mediante la transfección de células madre embrionarias?
¿Qué generan las enzimas como la β-glucuronidasa en investigación biotecnológica?
¿Qué generan las enzimas como la β-glucuronidasa en investigación biotecnológica?
¿Cuál es el propósito de usar fármacos como el ganciclovir en la selección de células modificadas?
¿Cuál es el propósito de usar fármacos como el ganciclovir en la selección de células modificadas?
¿Cuál es la finalidad de la fertilización in vitro?
¿Cuál es la finalidad de la fertilización in vitro?
¿Cuál de las siguientes es una característica de la hibridación somática?
¿Cuál de las siguientes es una característica de la hibridación somática?
¿Qué técnica se utiliza para la introducción de espermatozoides en el óvulo en casos de fertilidad masculina comprometida?
¿Qué técnica se utiliza para la introducción de espermatozoides en el óvulo en casos de fertilidad masculina comprometida?
¿Qué son los hibridomas?
¿Qué son los hibridomas?
¿Cuál es un objetivo de la obtención de células madre embrionarias?
¿Cuál es un objetivo de la obtención de células madre embrionarias?
Flashcards
Microinyección
Microinyección
Método de introducción directa del ADN recombinante en el núcleo de la célula huésped mediante una aguja.
Biolística
Biolística
Técnica que usa partículas recubiertas de ADN para introducir el material genético en las células.
Transferencia Génica mediante Virus
Transferencia Génica mediante Virus
Transferencia de genes a células mediante virus modificados que transportan el gen deseado, sin factores de virulencia.
Transfección Estable
Transfección Estable
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Transfección Transitoria
Transfección Transitoria
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Transfección lipídica
Transfección lipídica
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Fusión de protoplastos
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Electroporación
Electroporación
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Nucleofección
Nucleofección
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Relación entre eficiencia de transfección y viabilidad
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Organismos auxótrofos
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Complementación de auxotrofías
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Timidina quinasa (TK)
Timidina quinasa (TK)
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Genes reporter
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Transfección de ESCs
Transfección de ESCs
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Fertilización in Vitro
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Estimulación del desarrollo embrionario
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Fertilización in Vitro (investigación)
Fertilización in Vitro (investigación)
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Hibridación somática
Hibridación somática
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Heterocarionte
Heterocarionte
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Study Notes
ADN Recombinante
- ADN recombinante es una molécula de ADN creada artificialmente combinando fragmentos de ADN de diferentes orígenes.
- Permite introducir nuevas características o estudiar la función de genes específicos en organismos diferentes.
- Proceso para generar ADN recombinante:
- Aislamiento del gen de interés.
- Inserción en un vector (clonación o expresión).
- Uso de enzimas de restricción y ligasa para combinar el ADN.
- Introducción en una célula huésped.
Células Huésped
- Microorganismos (bacterias y levaduras).
- Células o tejidos en cultivo, individuos adultos completos.
- Usos:
- Desarrollo de alimentos modificados genéticamente.
- Fabricación/producción de compuestos.
- Biorremediación (recuperación de entornos contaminados).
Transfección
- Metodologías para introducir ADN exógeno en células en cultivo:
- Métodos químicos:
- Fosfato cálcico
- Policaiones o polímeros catiónicos
- Métodos físicos:
- Electroporación
- Nucleofección
- Microinyección
- Biolística
- Métodos biológicos: Transferencia génica mediante virus.
- Fusión celular: métodos adicionales para realizar la transfección, incluyendo fusión de protoplastos.
- Métodos químicos:
Selección de Células Transformadas
- Selección de células recombinantes (transfectadas).
- Tipos de transfección: transitoria (temporal) vs estable (permanente).
- Marcadores de selección (antibióticos, genes reporter): identifican con facilidad las células que han captado nuevo material genético.
Otras Aplicaciones
- Generación de animales transgénicos
- Transferencia de células madre embrionarias (ESCs)
- Procedimiento: cultivo y modificación de ESCs, selección y transferencia a blastocistos implantado en hembras receptoras.
- Cultivos celulares 3D, Organoides, Esferoides
- Técnicas para crear estructuras multicelulares similares a los tejidos in vivo.
- Técnicas para la generación de cultivos 3D (cultivos histotípicos, organotípicos).
- Ingeniería tisular o tejidos
- Usos: medicina regenerativa (implantes de tejidos producidos in vitro).
- Uso de andamios (scaffold).
- Co-cultivos
- Usos: estudiar funciones de células en medio microambiente (ej: estudio de interacciones entre células).
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