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Questions and Answers
Quel est l'objectif principal de la phase d'élimination de l'eau des cellules ?
Quel est l'objectif principal de la phase d'élimination de l'eau des cellules ?
- Remplacer l'eau par une résine hydrophobe (correct)
- Préparer les échantillons pour la coloration
- Hydrater les cellules pour les rendre flexibles
- Diminuer la taille des échantillons
Quelle est l'épaisseur des coupes ultra-fines effectuées à l'aide de l'ultramicrotome ?
Quelle est l'épaisseur des coupes ultra-fines effectuées à l'aide de l'ultramicrotome ?
- Entre 50 et 70 nm (correct)
- Entre 25 et 40 nm
- Entre 100 et 150 nm
- Entre 5 et 10 nm
Quelle méthode est utilisée pour recueillir les coupes effectuées avec un couteau en verre ?
Quelle méthode est utilisée pour recueillir les coupes effectuées avec un couteau en verre ?
- Directement sur une grille en métal
- Sur une plaque en plastifiée
- Dans un bac de colle
- Dans un bac d'eau (correct)
Quel type de solvant est utilisé pour l'inclusion des échantillons ?
Quel type de solvant est utilisé pour l'inclusion des échantillons ?
Quels sels de métaux lourds sont utilisés pour augmenter le contraste lors de la coloration ?
Quels sels de métaux lourds sont utilisés pour augmenter le contraste lors de la coloration ?
Quelle substance est souvent utilisée pour fixer les lames sur la lame?
Quelle substance est souvent utilisée pour fixer les lames sur la lame?
Quelle est la première étape du déparaffinage?
Quelle est la première étape du déparaffinage?
À quel type de microscope les lames sont-elles observées?
À quel type de microscope les lames sont-elles observées?
Quel est l'objectif principal de la fixation?
Quel est l'objectif principal de la fixation?
Quel fixateur chimique est le plus utilisé pour fixer les tissus?
Quel fixateur chimique est le plus utilisé pour fixer les tissus?
Quel est le rôle du tétraoxyde d'osmium lors de la post-fixation?
Quel est le rôle du tétraoxyde d'osmium lors de la post-fixation?
Quelle étape suit la fixation dans la méthode cytologique?
Quelle étape suit la fixation dans la méthode cytologique?
Comment se déroule la déshydratation des lames?
Comment se déroule la déshydratation des lames?
Quel est l'objectif principal de la fixation dans la technique histologique ?
Quel est l'objectif principal de la fixation dans la technique histologique ?
Quel type de solvant est utilisé lors de la déshydratation des tissus ?
Quel type de solvant est utilisé lors de la déshydratation des tissus ?
Quelle est la fonction des fixateurs chimiques simples dans la technique histologique ?
Quelle est la fonction des fixateurs chimiques simples dans la technique histologique ?
Pourquoi l'inclusion à la paraffine est-elle nécessaire ?
Pourquoi l'inclusion à la paraffine est-elle nécessaire ?
Quel est le principal inconvénient du bain de toluène par rapport au bain d'alcool à 100 % ?
Quel est le principal inconvénient du bain de toluène par rapport au bain d'alcool à 100 % ?
Quelle étape suit la déshydratation dans la technique histologique ?
Quelle étape suit la déshydratation dans la technique histologique ?
Quels fixateurs sont considérés comme chimiques composés ?
Quels fixateurs sont considérés comme chimiques composés ?
Comment se présentent les coupes une fois étalées sur la lame porte-objet ?
Comment se présentent les coupes une fois étalées sur la lame porte-objet ?
Flashcards
Prélèvement
Prélèvement
Action de recueillir un échantillon biologique le plus tôt possible après la mort.
Fixation
Fixation
Processus visant à conserver l'échantillon dans un état proche du vivant, en immobilisant les tissus.
Fixateurs physiques
Fixateurs physiques
Méthodes de fixation utilisant la congélation, par exemple à l'azote liquide (-195°C).
Fixateurs chimiques
Fixateurs chimiques
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Déshydratation
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Inclusion à la paraffine
Inclusion à la paraffine
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Etalement des coupes
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Fixation (Biologie)
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Fixateur (chimique)
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Fixateur (physique)
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Post-fixation
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Déshydratation (histologie)
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Déparaffinage
Déparaffinage
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Réhydratation (histologie)
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Coloration (histologie)
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Montage (histologie)
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Tétraoxyde d'osmium
Tétraoxyde d'osmium
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Substance collante
Substance collante
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Lamelles
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Microscope photonique
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Éliminer l'eau des cellules
Éliminer l'eau des cellules
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Résine hydrophobe
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Coupes ultra-fines
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Ulramicrotome
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Coupes semi-fines
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Couteau en verre / diamant
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Grille métallique (cuivre)
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Film de collodion
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Contraste (coloration)
Contraste (coloration)
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sels de métaux lourds
sels de métaux lourds
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Study Notes
La Technique Histologique
- Comprend plusieurs étapes
- Prélèvement et fixation sont les premières étapes
Prélèvement
- Se fait le plus tôt possible après la mort de l'organisme, ou sur un être vivant (biopsie)
- L'échantillon peut être sectionné pour étude
- Importance de la rapidité
Fixation
- But : conserver l'aspect du tissu vivant
- Utilise des fixateurs physiques (congélation à l'azote liquide) et chimiques
- Fixateurs chimiques simples : ethanol, formol
- Fixateurs chimiques composés : liquide de Carnoy (alcool, chloroforme, acide acétique); liquide de Bouin (formol, acide picrique)
Déshydratation
- Étape préparatoire à l'inclusion
- Remplace l'eau des tissus par un solvant organique (miscible à la paraffine)
- Plusieurs bains d'alcools de concentration croissante
- Optionnel : bain de toluène (plus toxique que alcool mais plus efficace pour éliminer l'eau)
- But : Préparation à l'inclusion dans la paraffine
Inclusion dans la paraffine
- Paraffine : solide à température ambiante, liquide à haute température
- Remplace le liquide intracellulaire par la paraffine
- Donne un bloc de paraffine durci, facile à découper
Coupes
- Utilisation d'un microtome
- Épaisseur de quelques microns (2 à 5 microns)
- Étalement sur lame porte-objet
- Fixation à la lame (albumine, gélatine)
Déparaffinage et Réhydratation
- Élimination de la paraffine
- Remplacement par des bains d'alcool de concentration décroissante
- Préparation à la coloration
Coloration
- Distinguer les structures cellulaires par contraste
- Différentes méthodes de coloration selon les parties à visualiser
Montage et Observation
- Couverture avec lamelles et résine (baume de Canada)
- Observation au microscope photonique pour étude de l'organisation histologique
Technique Cytologique (Coupes Minces)
- Prélèvement :
- Éventuellement sur animaux vivants ou sacrifiés
- Fixation : chimiques (glutaraldéhyde), physique (-196°C, -272°C)
- Post-fixation : tétraoxyde d'osmium (fixation des lipides)
- Déshydratation : alcool à concentration croissante, puis oxyde de propylène
- Inclusion : résine hydrophobe
- Réalisation coupes : microtome, coupes fines (50-70nm), matériau de la lame (diamant/verre)
- Récupération : bac d'eau, grille porte-objet
- Contraste : sels métalliques (acétate d'uranyle, citrate de plomb)
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