Questions HPLC PDF

### Avantages et Utilisation en HPLC 1. **Quel est l\'avantage de l\'utilisation de l\'internal standard en HPLC ?** - A. Réduction des coûts d\'analyse - **B. Correction des variations instrumentales et des pertes d\'échantillon** - C. Augmentation de la durée de...

### Avantages et Utilisation en HPLC 1. **Quel est l\'avantage de l\'utilisation de l\'internal standard en HPLC ?** - A. Réduction des coûts d\'analyse - **B. Correction des variations instrumentales et des pertes d\'échantillon** - C. Augmentation de la durée de vie de la colonne - D. Réduction de la consommation de solvant 2. **Quel est l\'avantage de l\'utilisation de détecteurs à diode array (DAD) en HPLC ?** - A. Réduction des coûts d\'analyse - B. Augmentation de la durée de vie de la colonne - **C. Capacité à détecter et enregistrer des spectres UV-Vis complets pour chaque pic** - D. Réduction de la consommation de solvant 3. **Quel est l\'avantage de l\'utilisation de pompes isocratiques en HPLC ?** - **A. Simplicité et coût réduit pour des analyses avec une phase mobile de composition constante** - B. Permet des changements rapides de la composition de la phase mobile - C. Augmente la résolution des analytes - D. Réduit la durée de vie de la colonne 4. **Quel est l\'avantage de l\'utilisation de détecteurs de réfractométrie différentielle en HPLC ?** - A. Réduction des coûts d\'analyse - **B. Capacité à détecter des analytes sans chromophores** - C. Augmentation de la durée de vie de la colonne - D. Réduction de la consommation de solvant 5. **Quel est l\'avantage de l\'utilisation de colonnes à gradient de pH en HPLC ?** - A. Augmente la viscosité de la phase mobile - B. Diminue la résolution des analytes - **C. Permet l\'optimisation de la séparation pour des analytes ayant des pKa différents** - D. Réduit la durée de vie de la colonne 6. **Quel est l\'avantage de l\'utilisation de phases stationnaires hybrides en HPLC ?** - A. Réduction des coûts d\'analyse - **B. Combinaison des propriétés des phases stationnaires organiques et inorganiques pour améliorer la stabilité et la sélectivité** - C. Augmentation de la durée de vie de la colonne - D. Réduction de la consommation de solvant 7. **Quel est l\'avantage de l\'utilisation de détecteurs à haute sensibilité en HPLC ?** - A. Réduction des coûts d\'analyse - B. Augmentation de la durée de vie de la colonne - **C. Détection de faibles concentrations d\'analytes avec une grande précision** - D. Réduction de la consommation de solvant 8. **Quel est l\'avantage principal de l\'utilisation d\'un détecteur de masse (MS) couplé à un HPLC ?** - A. Réduction des coûts d\'analyse - B. Augmentation de la durée de vie de la colonne - **C. Identification précise et sensible des analytes** - D. Réduction de la consommation de solvant ### Paramètres et Influence en HPLC 9. **Comment la limite de détection (LOD) est-elle déterminée en HPLC ?** - A. Par la taille de la colonne - B. Par la composition de la phase mobile - **C. Par le signal du détecteur correspondant à trois fois le bruit de fond** - D. Par la température du four 10. **Quel est l\'effet de la dérive de la ligne de base sur la quantification en HPLC ?** - A. Améliore la précision de la quantification - **B. Peut introduire des erreurs dans la quantification des analytes** - C. N\'a aucun effet sur la quantification - D. Augmente la résolution des analytes 11. **Comment la répétabilité des injections influence-t-elle la précision de la quantification en HPLC ?** - A. La répétabilité des injections n\'a aucun effet - **B. Une bonne répétabilité des injections améliore la précision de la quantification** - C. Une mauvaise répétabilité des injections améliore la précision de la quantification - D. La répétabilité des injections influence uniquement la pression de la colonne 12. **Comment la linéarité de la courbe d\'étalonnage influence-t-elle la précision de la quantification en HPLC ?** - A. La linéarité n\'a aucun effet - **B. Une bonne linéarité améliore la précision de la quantification** - C. Une mauvaise linéarité améliore la précision de la quantification - D. La linéarité influence uniquement la pression de la colonne 13. **Quel est l\'effet de la résolution des pics sur la quantification en HPLC ?** - A. La résolution n\'a aucun effet - **B. Une bonne résolution permet une quantification précise des analytes** - C. Une mauvaise résolution améliore la quantification - D. La résolution influence uniquement la pression de la colonne 14. **Comment la méthode de la dilution en série est-elle utilisée pour la quantification en HPLC ?** - A. Pour augmenter la sensibilité du détecteur - **B. Pour préparer des solutions étalons de concentrations connues** - C. Pour réduire la viscosité de la phase mobile - D. Pour augmenter la résolution des analytes 15. **Quel est l\'effet de l\'utilisation de pompes à gradient haute pression en HPLC ?** - A. Réduit la pression de la colonne - B. Augmente la viscosité de la phase mobile - **C. Permet des changements rapides et précis de la composition de la phase mobile** - D. Diminue la résolution des analytes 16. **Comment la précision du débit de la pompe influence-t-elle la reproductibilité des résultats en HPLC ?** - A. La précision du débit n\'a aucun effet - **B. Une précision élevée du débit améliore la reproductibilité des résultats** - C. Une précision faible du débit améliore la reproductibilité des résultats - D. La précision du débit influence uniquement la pression de la colonne ### Température et Viscosité 17. **Comment la température du four influence-t-elle la séparation en HPLC ?** - A. La température du four n\'a aucun effet - **B. Une température contrôlée du four peut améliorer la reproductibilité et la résolution des analytes** - C. Une température plus élevée diminue la résolution - D. Une température plus basse augmente la viscosité de la phase mobile 18. **Quel est l\'effet de l\'utilisation de colonnes à haute température en HPLC ?** - A. Augmente la viscosité de la phase mobile - **B. Diminue la viscosité de la phase mobile, améliorant ainsi l\'efficacité de séparation** - C. Diminue la résolution des analytes - D. Réduit la durée de vie de la colonne 19. **Comment la température du four influence-t-elle la viscosité de la phase mobile en HPLC ?** - **A. Une température plus élevée diminue la viscosité** - B. Une température plus élevée augmente la viscosité - C. La température n\'a aucun effet sur la viscosité - D. Une température plus basse diminue la viscosité 20. **Quel est l\'effet de l\'utilisation de colonnes à gradient de température en HPLC ?** - A. Augmente la viscosité de la phase mobile - B. Diminue la résolution des analytes - **C. Peut améliorer la séparation en optimisant les conditions de température pour différents analytes** - D. Réduit la durée de vie de la colonne ### Phase Mobile et Stationnaire 21. **Comment la polarité de la phase stationnaire influence-t-elle la rétention des analytes en HPLC normale ?** - **A. Une phase stationnaire polaire augmente la rétention des analytes polaires** - B. Une phase stationnaire polaire diminue la rétention des analytes polaires - C. Une phase stationnaire non polaire augmente la rétention des analytes polaires - D. La polarité de la phase stationnaire n\'a aucun effet 22. **Quel est l\'effet de l\'utilisation de solvants à faible polarité en HPLC inversée ?** - A. Augmente la rétention des analytes polaires - **B. Diminue la rétention des analytes polaires** - C. Augmente la rétention des analytes non polaires - D. Diminue la rétention des analytes non polaires 23. **Comment la taille des particules de la phase stationnaire influence-t-elle la pression de la colonne en HPLC ?** - A. Les particules plus grosses augmentent la pression - **B. Les particules plus petites augmentent la pression** - C. La taille des particules n\'a aucun effet sur la pression - D. Les particules plus petites diminuent la pression 1. **Quel est l\'effet de l\'utilisation de colonnes à gradient de polarité en HPLC ?** - A. Augmente la viscosité de la phase mobile - **B. Permet une séparation plus efficace des analytes avec des polarités variées** - C. Diminue la résolution des analytes - D. Réduit la durée de vie de la colonne 2. **Quel est l\'effet de l\'ajout d\'un tampon à la phase mobile sur la séparation des analytes en HPLC ?** - A. Augmente la polarité de la phase mobile - **B. Stabilise le pH de la phase mobile, améliorant ainsi la reproductibilité de la séparation** - C. Diminue la polarité de la phase mobile - D. Augmente la viscosité de la phase mobile 3. **Comment la longueur de la chaîne alkyle de la phase stationnaire influence-t-elle la rétention des analytes en HPLC inversée ?** - A. Une chaîne plus courte augmente la rétention des analytes non polaires - **B. Une chaîne plus longue augmente la rétention des analytes non polaires** - C. Une chaîne plus courte diminue la rétention des analytes polaires - D. Une chaîne plus longue diminue la rétention des analytes polaires 4. **Quel est l\'effet de la pression de la colonne sur l\'efficacité de séparation en HPLC ?** - A. Une pression plus basse améliore l\'efficacité - **B. Une pression plus élevée peut améliorer l\'efficacité en réduisant la diffusion longitudinale** - C. La pression n\'a aucun effet sur l\'efficacité - D. Une pression plus élevée diminue l\'efficacité 5. **Quel est le rôle de la phase stationnaire chirale en HPLC ?** - A. Séparer les analytes en fonction de leur polarité - **B. Séparer les énantiomères en fonction de leur chiralité** - C. Augmenter la sensibilité du détecteur - D. Stabiliser la phase mobile 6. **Comment la composition de la phase mobile influence-t-elle la sélectivité en HPLC ?** - **A. La variation de la composition de la phase mobile peut modifier les interactions analyte-phase stationnaire, influençant ainsi la sélectivité** - B. La composition de la phase mobile n\'a aucun effet sur la sélectivité - C. La phase mobile ne doit pas être modifiée pour maintenir la sélectivité - D. La composition de la phase mobile influence uniquement la pression de la colonne 7. **Quel est l\'effet de l\'utilisation de solvants à haute pureté en HPLC ?** - A. Augmente la polarité de la phase mobile - **B. Réduit le bruit de fond et améliore la sensibilité du détecteur** - C. Diminue la polarité de la phase mobile - D. Augmente la viscosité de la phase mobile ### Détecteurs et Sensibilité 8. **Quel est le rôle des détecteurs de fluorescence en HPLC ?** - A. Détecter les analytes non fluorescents - **B. Détecter les analytes fluorescents avec une grande sensibilité** - C. Augmenter la pression de la colonne - D. Réduire la viscosité de la phase mobile 9. **Quel type de détecteur est le plus sensible pour la détection de composés aromatiques en HPLC ?** - A. Détecteur de conductivité - **B. Détecteur de fluorescence** - C. Détecteur UV-Vis - D. Détecteur de réfractométrie 10. **Quel type de détecteur est couramment utilisé en HPLC ?** - A. Détecteur de flamme - **B. Détecteur UV** - C. Détecteur de masse - D. Détecteur de conductivité 11. **Quel est l\'avantage principal de l\'utilisation de colonnes à particules sub-2 microns en HPLC ?** - A. Réduction des coûts d\'analyse - B. Augmentation de la durée de vie de la colonne - **C. Amélioration de la résolution et de l\'efficacité de séparation** - D. Réduction de la consommation de solvant 12. **Quel est l\'effet de l\'ajout d\'un modificateur organique (comme l\'acétonitrile) à la phase mobile en HPLC ?** - A. Augmente la polarité de la phase mobile - **B. Diminue la polarité de la phase mobile** - C. N\'a aucun effet sur la polarité - D. Augmente la viscosité de la phase mobile ### Divers 13. **Quelle est la phase mobile dans la chromatographie en phase liquide ?** - **A. Un liquide** - B. Un gaz - C. Un solide - D. Un plasma 14. **Quel est le rôle de la colonne en HPLC ?** - A. Pomper la phase mobile - **B. Séparer les composants du mélange** - C. Détecter les analytes - D. Injecter l\'échantillon 15. **Quel paramètre influence principalement la résolution en HPLC ?** - A. La température de la colonne - **B. La taille des particules de la phase stationnaire** - C. La vitesse de la phase mobile - D. Le volume d\'injection 16. **Quel est l\'avantage principal de l\'HPLC par rapport à la chromatographie en phase gazeuse (GC) ?** - A. Moins coûteux - B. Plus rapide - **C. Peut analyser des composés non volatils** - D. Utilise moins de solvant 17. **Le facteur de capacité k\' est aussi appelé :** - le facteur d\'efficacité - le facteur de Tailing - **le facteur de rétention** - le facteur de la poste 18. **Pour obtenir une séparation avec retour à la ligne de base entre 2 pics, il faut avoir une résolution au moins égale à :** - 10-12 - 1000 - 00 - **1.5** 19. **Pour limiter les interactions constituants/silanols en phase inverse, on peut utiliser :** - **des amines compétitives** - un clapet actif - une colonne phase normale - de l\'IPA, solvant universel 20. **Il vaut mieux utiliser un tampon à un pH proche du pKa de la molécule :** - **VRAI** - FAUX 21. **Un des symptômes de contamination est :** - Des pics fantômes - Une modification des temps de rétention - Un effet mémoire - **Une perte de pression** 22. **Une colonne en phase inverse peut être stockée dans :** - Dans 100% isopropanol - Dans 100% de tampon phosphate - Dans 100% d\'eau - **Dans 100% ACN** 23. **En phase inverse la phase stationnaire est apolaire :** - **Vrai** - Faux 24. **N, l\'efficacité de la colonne représente également :** - Le nombre maximum d\'injection sur la colonne - Le nombre de participants à la formation - Le nombre de particules dans la colonne - **Le nombre de plateaux théoriques** 25. **Le rinçage de base d\'une chaîne HPLC (sans la colonne) est :** - Eau très chaude du robinet puis Isopropanol - **Acetonitrile ou Methanol** - Eau chaude pure à env. 65℃ puis Isopropanol - Isopropanol à 100℃ puis eau qualité LC 26. **La MCGV sur les pompes quaternaires correspond :** - **aux vannes de proportion ou électrovannes** - au capteur de pression - au dégazeur intégré - à la vanne de purge 27. **En sortie de cellule, si mon tuyau est pincé :** - je ne m\'en souci pas, c\'est pas grave - Impossible: un capillaire inox, c\'est rigide - **Je remplace le tuyau et j\'installe bien un tuyau PTFE** - Je coupe le tuyau 28. **Sur une pompe binaire, combien de piston au total ?** - 1 tête de pompe, donc 2 pistons - **2 têtes de pompe donc 4 pistons** - 3 têtes de pompes donc 6 pistons - 4 têtes de pompe donc 8 pistons 29. **Quand j\'utilise le seal wash, avec quel solvant les joints de piston sont-ils nettoyés ?** - **90/10 Eau/IPA** - 100% Eau - 80/20 Cyclohexane/ Methanol - 100% Acetonitrile - **Pour mettre en évidence un bouchage d\'aiguille, je peux manuellement :** - Diminuer le débit - Faire varier la longueur d\'onde - Changer de vial - **Faire commuter la vanne d\'injection de Mainpass à Bypass** - **Concernant les fours colonne Agilent, la phase mobile :** - est chauffée avant d\'entrer dans la colonne - Traverse directement la colonne thermostatée - **n\'est pas chauffée, c\'est la colonne qui l\'est.** - chauffe au contact de la phase stationnaire - **Un problème de température peut engendrer des fluctuations de Tr :** - **VRAI** - FAUX - **Dans un détecteur UV, la lampe UV peut être à l\'origine d\'une perte de sensibilité quand elle vieillit :** - Oui car il y a une augmentation du signal - **Oui car il y a une augmentation du bruit de fond** - Non car il y a une diminution du bruit de fond - Non car il y a une diminution de signal - **Un capillaire Agilent vert correspond à un diamètre interne de :** - 10mm - 2μm - 1 AU - **0.17mm** - **Si j\'ai un problème de répétabilité en aire, j\'interviens d\'abord :** - Sur le dégazeur - Sur la pompe - **Sur le passeur** - Sur le détecteur - **Si on a un problème d\'amorçage, il faut amorcer avec une seringue connectée au tuyau en sortie de dégazeur :** - **VRAI** - FAUX - **Le QTOF permet l\'analyse d\' :** - Une masse - Une molécule - **Un rapport m/z** - **Que veut dire le z dans m/z ?** - Un Zwitterion - **Une charge** - **Quel est l\'écart en masse d\'un massif isotopique d\'un ion dischargé ?** - 0.2 amu - 2 amu - **0.5 amu** - 0.33 amu - **Grâce à quel symbole reconnaît-on une saturation sur un spectre de masse (Masshunter Qualitative) ?** - **@** - 1 - \% - **Que fait le mass Calibration /check tune ?** - **Calibration du détecteur** - Optimisation de la transmission - Vérification des résolutions - **A quelle fréquence faut-il effectuer un mass Calibration /check tune ?** - Tous les jours - Tous les mois - **1 fois par an** - **Quand est-il indispensable de tuner le quad ? (2 réponses)** - Jamais - **Quand on fait du targeted MS/MS** - **Quand on fait du MS** - Quand on fait de l\'auto MSMS - **Quels seront les effets de l\'augmentation du nombre de spectres par seconde ? (2 réponses)** - **Augmenter la sensibilité** - **Augmenter le nombre de points par pics** - Diminuer la sensibilité - Diminuer le nombre de points par pics - **Quels paramètres sont modifiables quand on fait des Experiment (Expt) ?** - La polarité - Le Fragmentor - Le Vcap - Le Gas Flow - **L\'Oct RF** - **Combien de masses de référence est-il conseillé d\'avoir par polarité ?** - 1 - **2** - 3 - 4 - **Quels paramètres fondamentaux permettent le calcul de la résolution ?** - l\'équation de Van Deemter - **Capacité, Sélectivité, efficacité** - Diamètre interne et longueur de colonne - **Quel est le principal matériau utilisé dans les colonnes ?** - Le Fer - **La Silice** - L\'Or - Toutes les réponses - **Quels sont les greffons les plus courants des colonnes en phases inverses ?** - les résines polymériques - **C18 et C8** - Diol - **Les traitements end-capping permettent :** - **Limiter les interactions secondaires** - Fragiliser la colonne - récupérer une colonne en fin de vie - **Quels sont les paramètres qui permettent de diminuer les TR :** - **Augmenter la force éluante de la phase stationnaire** - **Augmenter la température** - Diminuer le débit - Diminuer la longueur de colonne - **Les composés les plus polaires sont les plus retenus sur une colonne C18 ?** - Vrai - **Faux** - **Quels sont les avantages d\'une méthode gradient ?** - Sur quels paramètres peut-on jouer pour optimiser une méthode en isocratique ? - **Le pH du solvant permet de définir l\'état de charge des acides faibles ?** - **Vrai** - Faux - **Pour développer une méthode, les paramètres modifiables sont :** - **Les solvants** - **La colonne** - Le technicien - **La température** - **Dans la méthode du DAD, on utilise la longueur d\'onde de référence et la bande passante de référence pour :** - ne pas saturer le signal - **Pour soustraire le signal interférant de la phase mobile** - Pour avoir un spectre parfait - Pour avoir une ligne de base stable en gradient - **Le paramètre SLIT dans une méthode DAD correspond à la fente optique et :** - **doit être au minimum si je fais une étude spectrale** - doit être au maximum si je fais une étude spectrale - si elle est très étroite cela permet de lisser le bruit de fond - **À température constante, la pression :** - Diminue si le diamètre des particules de la colonne diminue - Augmente si la longueur de colonne diminue - **Diminue si le diamètre de colonne augmente** - Diminue si la viscosité de la phase mobile augmente - **Qu\'est-ce que la longueur d\'onde de cut-off d\'un solvant ?** - La longueur d\'onde minimale du solvant - **la longueur d\'onde du solvant pour laquelle on obtient une unité d\'absorbance** - La longueur d\'onde pour laquelle la lampe UV s\'éteint - La longueur d\'onde à laquelle on ne voit plus d\'absorbance - **En phase inverse et en solution tampon, on cherche à faire prédominer les composés dans leur forme :** - **Neutre** - Ionisé - Neutre et ionisé - Olympique - **Pourquoi diminuer le diamètre interne de la colonne ? (3 exemples)** - **Le dwell volume est le volume se situant :** - l\'entrée de la colonne et la sortie de la cellule du détecteur - **Du point de mélange de la pompe à la sortie de la colonne** - Du point de mélange de la pompe au capteur de pression - Du point de mélange de la pompe à l\'entrée de la colonne - **On peut utiliser l\'IPA à 0.4% dans l\'eau comme marqueur UV pour tester un gradient, calculer le dwell volume ?** - **vrai** - faux - **Le capillaire PEEK jaune ou beige a un diamètre interne de :** - **Chez Agilent, on peut savoir le diamètre interne (DI) d\'un capillaire car :** - **il y a une gaine de couleur sur le capillaire** - **Pour un système HPLC Agilent, ou une colonne Agilent, la marque d\'écrou que l\'on doit utiliser :** - **PEEK** - **Le dégazage de la phase mobile permet :** - d\'éliminer les interférences - **de diminuer le bruit de fond** - d\'éviter l\'absorbance de la phase mobile - d\'augmenter la sensibilité - **Quels sont les principaux tests à faire après la maintenance d\'une pompe ?** - **System Pressure Test et Leak Rate test** - **Combien de pistons y-a-t-il dans une pompe quaternaire ?** - **2** - **Le ripple est une mesure de performance de la pompe, la valeur doit être comprise entre :** - **-2% et 2%** - **Le solvant de seal wash doit être composé de :** - **90% Eau 10% IPA** - **La MCGV est un élément que l\'on retrouve uniquement sur :** - **Une pompe Quaternaire** - **Pour changer une aiguille sur un passeur, il est primordial de passer en position de maintenance mais via quel utilitaire ?** - **LabAdvisor** - **Pourquoi y a-t-il une pompe péristaltique sur un passeur ?** - **Pour le Needle Wash** - **À quel élément est relié le capillaire qui part de la voie 2 de la vanne d\'injection ?** - **Quel test peut-on faire sur un four colonne TCC ?** - **Thermostat Test** - **Au niveau du four colonne (TCC) ; cocher ce qui est correct :** - **La phase mobile parcourt d\'abord l\'échangeur de chaleur et ensuite la colonne** - **Le TCC fonctionne par effet Peltier** - **Les fenêtres de la cellule sont en :** - **quartz** - **Qu\'est-ce que la bande passante ou le Bandwidth ?** - **EMF dans LabAdvisor ça veut dire :** - **Early Maintenance Feedback** - **Un firmware est :** - **Une programmation incluse dans un instrument ou module** - **Comment rincer une chaîne HPLC (sans colonne) et surtout après l\'utilisation de phase tamponnée ?** - **Le système HPLC se met en erreur, il y a une surpression. Que doit-on faire ? Comment identifier l\'endroit où se situe le bouchage ?** - **Lister les causes possibles d\'une augmentation de bruit de fond de la ligne de base ?** - **Les temps de rétention sont variables (décalés, ne sont pas répétables, \... ) - Lister les causes possibles**