Antibiotiques et Antibiogramme PDF

Antibiotiques et Antibiogramme Substances antibactériennes Antibiotique Substance chimique ou de synthèse (origine µbienne) Capable d’enrayer la multiplication de bactéries pathogènes (bactériostatique) ou les détruire (bactéricide) (! Cc) Dose...

Antibiotiques et Antibiogramme Substances antibactériennes Antibiotique Substance chimique ou de synthèse (origine µbienne) Capable d’enrayer la multiplication de bactéries pathogènes (bactériostatique) ou les détruire (bactéricide) (! Cc) Dose faible → détruit notre organisme (toxicité sélective) CM CMI Concentration minimale inhibitrice (Concentration la plus faible d’un AB capable d’inhiber la croissance d’une population bactérienne) CMB Concentration minimale bactéricide (Concentration la plus faible d’un AB capable de tuer 99,99% d’une population bactérienne) CMB/CMI 1-2 → AB bactéricide 4-16 → AB bactériostatique Spectre Spectre étroit Efficacité sur une variété restreinte de µO Large spectre Action sur de nombreux types d’agents pathogènes Antibiogramme Antibiotique Technique in vitro Test l’efficacité d’AB sur un agent bactérien (une souche) Aide à la décision thérapeutique (substance active, estimation de la dose thérapeutique appropriée) Apporte une aide à l’identification bactérienne Assure une surveillance épidémiologique de la résistance bactérienne Après identification !! Techniques Méthode de dilution = référence Méthode de diffusion = routine (méthode des disques, Etest® Méthodes automatisées Méthode de dilution Technique de référence Mode opératoire 1. Série de tubes de bouillon de Mueller-Hinton (Cc ↗ en AB et T-) 2. Ensemencement par une suspension standard de la souche à tester (Cc et vol) 3. Incubation : 18-24h/37°C 4. Inoculer les tubes où pas de croissance visible et T- / Mueller Hinton gélosé sans AB 5. Comptage des UFC CMI CMB 1er tube où pas de croissance visible → CMI = 2 µl/ml CMI = 16 µg/ml Affiner grâce à des tubes contenant des cc intermédiaires A: > 0,01% de colonies à la CMI et tube précédant B: < 0,01 % de colonies → CMB = 32 µg/ml Méthode des disques = Kirby-Bauer Classification des souches en fonction d’un AB testé à une cc définie ▪ S → Sensible : succès thérapeutique ▪ I → Intermédiaire : succès incertain ▪ R → Résistant : échec thérapeutique Milieu Mode opératoire Polyvalent 1. Ensemencement massif de la souche identifiée 2. Dépôt des AB (distances entre disques et bord bdp = ≥ 15mm) Mueller-Hinton 3. Incubation Surface sèche 4. Mesure des diamètres des zones d’inhibition (évidence de la CMI) Épaisseur : 4 mm (= 24ml) 5. Interprétation via tables de référence → R, S, ou I [Mg (20µg/ml)], [Ca (60µg/ml)] fixées pH : 7,4 ± 0,1 Standardisation ▪ Règle des 15’/15’/15’ Ensemencement Inoculum Incubation : 18h/24h à T° optimale (37°C) Écouvillon stérile Sérum physiologique Contrôle Trempage + essorage Jeunes colonies isolées et ▪ Validation de la méthode → souches standards Staphylococcus aureus ATCC 2592 Massif → colonies seront confluentes en bonne « santé » Escherichia coli ATCC 25922 Stries serrées 3x + contours Standardisation de la cc : Pseudomonas aeruginosa ATCC 27853 0,5 Mac Farland Repos entre 3 et 5’ Etest® Bandelette plastique + gradient [AB] → CMI 1. Application sur MH inoculé 2. Incubation → Ellipse d’inhibition → CMI précise (µl/ml) = intersection entre ZI et bandelette Classes d’antibiotique Ou inhibition de l’ARN polymérase Inhibition de la synthèse des acides nucléiques Inhibition synthèses des purines et pyrimidines Inhibition de topoisomérases Fixation sur topoisomérase et ADN gyrase → ≠ déroulement de l’hélice d’ADN → ≠ réplication/transcription/réparation Quinolones (ex: acide nalidixique) Fluoroquinolones (ex: ciprofloxacine, norfloxacine) Classes d’antibiotique Ou inhibition de la formation d’acide N-acétylmuramique (ANAM) Inhibition de la synthèse de la paroi Inhibition de la transpeptidase ≠ transpeptidation → ≠ lien entre chaînes peptidiques du petptidoglycane ▪ β-lactamines = analogues de structure de la D-alanyl-D-alanine Ex: penicilline, amoxicilline, imipenem, ceftazidime → Fixation sur transpeptidase Classes d’antibiotique Inhibition de la synthèse des protéines Inhibition de l’initiation Inhibition de l’élongation Aminoglycosides Inhibition de la fixation des ARNt sur le site A Ex: streptomycine Cyclines (ex: tétracycline) → ≠ initiation et/ou erreurs de lecture → Fixation sur 30S ▪ Macrolides (ex: érythromycine) → Pas de translocation ▪ Phénicolés (ex: Chloramphénicol) → Fixation sur 50S