Notas de clase de Genética Molecular - Universidad Politécnica Salesiana - Julio 2024 PDF

Universidad Politécnica Salesiana Carrera de Biotecnología Cátedra: Genética Molecular Unidad III Expresión génica Prof. Brenda López [email protected] Julio, 2024 Políticas generales del curso El pro...

Universidad Politécnica Salesiana Carrera de Biotecnología Cátedra: Genética Molecular Unidad III Expresión génica Prof. Brenda López [email protected] Julio, 2024 Políticas generales del curso El programa se desarrollará de acuerdo con las siguientes políticas: Lecciones: Se aplicarán evaluaciones formativas relacionadas con los conocimientos que se imparten en clase. Controles parciales : A lo largo del curso los estudiantes rendirán controles de cada unidad. Tienen como objetivo evaluar el desempeño en la adquisición de habilidades y destrezas. Seminarios, Discusión de articulo, Talleres o Trabajos: Serán asignados a a los estudiantes anticipadamente.. No se permite el uso de celulares durante la clase. Colocar teléfonos en modo “silencio”. El horario de clase es el establecido: Un estudiante podrá entrar a clase hasta 15 minutos luego de iniciada la clase. El estudiante que tenga ausencias en actividades evaluadas debe justificarlas debidamente. La fecha de entrega de las tareas es impostergable.  Evaluación Tendremos dos (2) interciclos, cada uno con un valor de 50 puntos, para un total de 100 puntos. Actividad Evaluada Puntos Actividad Evaluada Puntos Trabajo colaborativo 10 Trabajo colaborativo 10 Trabajo autónomo 10 Trabajo autónomo 10 Practicas de laboratorio 10 Practicas de laboratorio 10 Examen interciclo 1 20 Examen interciclo 2 20 Total 50 Total 50 TOTAL 100 puntos  Bibliografía recomendada Watson, J.D., et al. 2016. Biología Molecular del Gen. Editorial Médica Panamericana. Buenos Aires : Panamericana , 2016. Krebs, J. Goldstein, E., Kilpatrick, S. 2014. Genes XI. Jones & Bartlett Peña, C. Loyola M. 2017. De la genética a la epigenética : la herencia que no está en los genes. México, D.F. : Fondo de Cultura Económica  Contenidos Unidad III Expresión génica Transcripción procariota y eucariota Código genético. Traducción del ARNm Unidad IV Regulación génica Epigenética Procesamiento postranscripcional del RNA Regulación por RNAi Modificaciones postraduccionales (PTMs)  Transcripción Consiste en la síntesis de una cadena de RNA a partir de una cadena molde de DNA La transcripción es química y enzimáticamente es muy similar a la replicación del DNA ¿En qué se diferencian? La transcripción es química y enzimáticamente es muy similar a la replicación del DNA ¿En qué se diferencian? 1. Se polimerizan ribonucleótidos y no deoxi-ribonucleótidos. Por tanto, se forma RNA. 2. La RNA polimerasa no necesita primer; comienza la síntesis de RNA de novo. 3. El RNA sintetizado no permanece formando apareamientos de bases con el DNA molde. 4. Genera más errores que la replicación (10 −4 versus10 − 7 ). 5. Genera un número variable de copias a partir de regiones concretas del genoma. Estas vienen determinadas por la unión de la RNA polimerasa a secuencias específicas denominadas promotores. ARN Polimerasas Enzimas capaces de sintetizarARN Contienen múltiples subunidades Mientras las bacterias poseen una única RNA polimerasa, las células eucariotas tienen tres RNA polimerasas distintas: RNA pol I, II y III. precursor genes que tRNAs, algunos del rRNA codifican snRNAs y el 5S grande proteínas rRNA.  La forma de las RNA polimerasas se asemeja a la pinza de un cangrejo. En su base se encuentra la “hendidura del centro activo”, donde DNA, RNA y rNTPs acceden y salen a través de varios canales.  Cadena transcrita En la mayoría de los organismos, cada gen se transcribe a partir de una sola cadena de ADN, pero diferentes genes pueden transcribirse a partir de cualquiera de las dos cadenas de ADN. La dirección de la síntesis siempre será 5’-3’  Unidad de transcripción Tres regiones críticas: 1) promotor, 2) región codificante de ARN, y 3) terminador  Transcripción procariota INICIACIÓN La RNA pol bacteriana está asociada a factores de iniciación denominados σ (sigma) que reconocen los promotores. En E. coli el predominante es σ𝟕𝟎 17 – 19 nt Los promotores reconocidos por σ𝟕𝟎 comparten una estructura característica: dos secuencias conservadas de 6 nt, separadas por un fragmento no específico de 17-19 nt. Las secuencias conservadas se centran en las posiciones -10 y -35, respecto al TSS. Estas secuencias no son idénticas para todos los promotores pero se ha establecido secuencias consenso que son: Secuencia consenso -10 TATAAT Secuencia consenso -35 TTGACA  TRANSCRIPCIÓN EN BACTERIAS:INICIACIÓN El factor σ70 tiene cuatro dominios bien diferenciados. El dominio σ4 interacciona con el elemento -35 El dominio σ2 nteracciona con el -10 pero también es ahí donde empiezan a abrirse las cadenas del DNA. La transición al complejo abierto comprende cambios estructurales. La apertura del DNA tiene lugar entre las posiciones -11 y +3. Esta transición es esencialmente irreversible → isomerización. Se han propuesto varios modelos para explicar el movimiento del centro activo durante la síntesis abortiva. El modelo que se favorece actualmente es el de “scrunching”. La síntesis abortiva puede ser consecuencia del bloqueo del canal de salida del RNA por una región del factor σ. Sólo cuando el RNA sintetizado es capaz de desplazar esta región, se produce el “escape” del promotor.  ELONGACIÓN Transcripción procariota Características de la elongación: Sólo 8-9 nt del RNA permanecen apareados al molde de DNA. El tamaño de la burbuja permanece constante. La RNA polimerasa lleva a cabo dos funciones correctoras: Edición pirofosforolítica: reacción inversa a la síntesis. Se añade PPi y se libera un rNTP insertado incorrectamente. Edición hidrolítica: la enzima “vuelve atrás” uno o varios nt, y corta el RNA liberando un fragmento con el nt erróneo. Cuando hay un bloqueo de la RNA pol, actúa un factor denominado TRCF. Este tiene dos funciones: Recluta proteínas reparadoras al sitio (reparación acoplada a la transcripción). Hace que la RNA pol reinicie la elongación o termine prematuramente la transcripción.  Transcripción procariota La terminación de la transcripción viene determinada por secuencias específicas terminadores TERMINACIÓN Dos tipos de terminadores: dependientes de Rho independientes de Rho Hipótesis: Empuja la polimerasa hacia adelante Extrae la polimerasa Induce un cambio Sólo afectan a la conformacional en la RNA pol una vez polimerasa transcritos, no antes. Factor Rho  Transcripción eucariota Características de la transcripción en eucariotas Los eucariotas tienen tres polimerasas distintas con dianas específicas. Varios factores de iniciación son necesarios para conseguir transcribir de forma eficiente. Estos se denominan factores generales de transcripción (GTFs). In vivo, la transcripción requiere la participación de factores adicionales: proteínas reguladoras de unión al DNA (activadores), el complejo mediador, y enzimas modificadoras de la cromatina.  Transcripción eucariota Promotores Diferentes Polimerasas (I, II y III) → reconocen distintos tipos de promotores Nos centraremos en la RNA Polimerasa II: Promotor mínimo (core promoter) y promotor regulador  TRANSCRIPCIÓN EN EUCARIOTAS:INICIACIÓN Los GTFs llevan a cabo colectivamente las funciones del factor σ en bacterias: reclutan la El complejo TBP-DNA RNA pol al promotor, abren las cadenas de actúa como plataforma para el reclutamiento de DNA y participan en el mecanismo de escape. otros GTFs y la RNApol. El conjunto de GTFs y RNA pol unidos al promotor y preparado para la iniciación se denomina complejo de preiniciación. Una vez se forma el complejo de preiniciación, se produce la “fusión” del promotor, mediada por el factor TFIIH, el cual contiene una proteína con actividad helicasa complejo de preiniciación La RNA pol entra en un período de transcripción abortiva hasta que consigue escapar del promotor, lo que viene favorecido por el debilitamiento de su interacción con los GTFs debido a la fosforilación de la cola CTD (dominio carboxilo terminal). Esta contiene una serie de repeticiones del heptapéptido Y·S·P·T·S·P·S, que proporciona sitios de fosforilación para quinasas específicas, incluyendo una subunidad de TFIIH.  TRANSCRIPCIÓN EN EUCARIOTAS:INICIACIÓN Factores adicionales para la transcripción in vivo Proteínas reguladoras de la transcripción, denominadas activadores, ayudan al reclutamiento de la RNA pol y estabilizan complejo de preiniciación su unión al promotor. En eucariotas, los activadores llevan a cabo estas funciones de forma indirecta a través de interacciones con otros componentes distintos de la RNA pol II. A veces, suelen reclutar enzimas modificadoras de histonas o remodeladores de cromatina, o establecer interacciones con el complejo Mediador. El Complejo Mediador sirve de nexo de unión entre activadores y el complejo de preiniciación. Típicamente, la deleción de distintas subunidades del Mediador afecta a diferentes conjuntos de genes. Sólo una subunidad (Med17) parece ser esencial para la transcripción de todos los genes controlados por la RNA polII. El Complejo Mediador, interactúa con la RNA pol a través de la cola CTD, de esta forma también regula la actividad quinasa de TFIIH sobre la cola CTD, y por tanto, también ayuda a la iniciación de la transcripción de esta manera. TRANSCRIPCIÓN EN EUCARIOTAS:ELONGACIÓN Se mantiene la burbuja de transcripción, en la que alrededor de 8 nt de RNA permanecen apareados por sus bases a la cadena de DNA. La doble hélice del DNA ingresa por una hendidura de la polimerasa, es sujetada por una especie de mandíbulas. Se desenrollan las dos cadenas de DNA y se añaden los nucleótidos de RNA. A medida que atraviesa la polimerasa, el híbrido DNA-RNA choca con una pared de aminoácidos y se incurva casi en ángulo recto, esta curva posiciona el extremo del híbrido en el sitio activo de la polimerasa, y se añaden nuevos nucleótidos al extremo 3’ del RNA en crecimiento. TRANSCRIPCIÓN EN EUCARIOTAS:ELONGACIÓN TRANSCRIPCIÓNEN EUCARIOTAS: ELONGACIÓNATRAVÉS DE LACROMATINA In vivo, la transcripción a través de la cromatina es facilitada por un factor llamado FACT (“facilitates chromatin transcription”). FACT FACT se une a los nucleosomas que han de transcribirse y retira un dímero de H2A·H2B de estos. Ello permite desmantelar suficientemente el nucleosoma como para permitir la transcripción a través suyo. Tras el paso de la RNA pol, FACT inserta de nuevo el dímero de H2A·H2B para restaurar la integridad del nucleosoma..  TRANSCRIPCIÓN EN EUCARIOTAS:ELONGACIÓN Procesamiento co-transcripcional del mRNA en eucariotas: “capping”. Tan pronto como el RNA emerge del canal de salida en la RNA pol sufre una modificación de su extremo 5’. Esta supone la adición de un nucleótido de guanina metilada, unido al nucleótido 5’ terminal del RNA por un enlace inusual 5’-5’ a través de tres fosfatos. Esta “caperuza” en 5’ protege el RNA emergente de la degradación y más adelante jugará un papel importante en el reclutamiento del ribosoma durante la traducción.  TRANSCRIPCIÓN EN EUCARIOTAS:ELONGACIÓN Procesamiento co-transcripcional del mRNA en eucariotas: “poliadenilación”. Los mRNAs eucarióticos poseen una cola poli-A en su extremo 3’. Esta cola se adquiere una vez que el RNA ha sido transcrito, por tanto estas secuencias poli-A no aparecen en el DNA. En el DNA existen unas secuencias que señalan los sitios de poliadenilación, usualmete AAUAAA. Una vez transcritas, estas son reconocidas por dos factores: CstF (“cleavage stimulation factor”) CPSF (“cleavage and polyadenylation specificity factor”) Una vez CstF corta el RNA, CPSF recluta la poli-A polimerasa (PAP), la cual añade unos 200 nucleótidos de adenina al extremo 3’ del RNA. TRANSCRIPCIÓN EN EUCARIOTAS:TERMINACIÓN ORGANIZACIÓN DE LOS GENES EUCARIÓTICOS EN EXONES E INTRONES https://youtu.be/GYi5fuS-R7I  Transcripción El primer paso en la expresión génica es la transcripción, que consiste en la síntesis de una cadena de ARN complementaria y antiparalela, a la secuencia de nucleótidos de una de las cadenas de ADN denominada cadena molde, y por lo tanto, tiene la secuencia de nucleótidos idéntica a la cadena opuesta del ADN llamada cadena codifi cadora, con la premisa de que la timina se sustituye por uracilo en la molécula de ARN  Estructura del gen procarionte La mayoría de los genes en procariotes están organizados en operones, esto es, un conjunto de genes situados en el mismo fragmento de ADN que se transcriben como una unidad y que generan varios productos funcionales que participan en una vía metabólica común; aunque también pueden existir unidades que codifiquen para un solo producto funcional. Estructura del gen eucarionte Los genes eucariotes están constituidos por secuencias regulatorias y codificantes. El inicio del sitio de transcripción se denomina +1, y la numeración aumenta conforme se dirige al extremo 3’. Esta dirección se conoce como corriente abajo, donde se encuentran las secuencias codificantes del gen. Hacia el extremo 5’, en la dirección opuesta, conocida como corriente arriba, la numeración se indica como —1, y es allí donde se encuentra la mayoría de las regiones regulatorias del gen. La región codificadora del gen contiene regiones que no serán traducidas, denominadas intrones, y que son retirados por medio del proceso corte y empalme del ARNm primario o heterogéneo nuclear (ARNhn). Las regiones que codifican para el producto génico se conocen como exones. Estructura del gen eucarionte Estructura del gen  Secuencias que regulan la transcripción Las regiones que controlan la transcripción de un gen no necesariamente tienen que estar cerca de la región codificadora. Estas regiones son mucho más complejas y pueden activar o desactivar genes. Elemento de respuesta para el TFIIB (BRE); caja TATA (TATA); elemento iniciador (Inr); elemento promotor corriente abajo (DPE); factor transcripcional IIB (TFIIB); factor de unión a la caja TATA (TBP), y factor transcripcional IID (TFIID). Tipos de ARN polimerasa  Factores transcripcionales TF son proteínas que se unen al ADN en el promotor, potenciador o silenciador para el control de la expresión de los genes. Éstos se unen al ADN reconociendo una secuencia específica, aunque una misma secuencia puede ser reconocida por más de un TF, que puede ser activador o represor. Los TF se han clasificado, de acuerdo con su función, en factores transcripcionales generales o basales y factores transcripcionales in Factores transcripcionales TF generales o basales Son los requeridos para el inicio de la transcripción en todos los promotores basales. Se unen a la ARN pol para formar un complejo que rodea el sitio de inicio, determinando la iniciación. Los TF toman el nombre de la ARN pol con la que actúan y, junto con ésta, forman el aparato básico de transcripción. Por lo tanto, los TF que actúan con la ARN pol I se denominan TF I; los que actúan con la ARN pol II, TF II, y los que actúan con la ARN pol III, TF III Factores transcripcionales TF inducibles El conjunto de TF requerido para la expresión de un determinado gen es particular para cada promotor. Los TF inducibles, o TF de tejido específico, interactúan con el ADN de la misma manera que los TF generales, pero su función es más bien reguladora y se unen preferentemente a los promotores distales. Se sintetizan o activan bajo un estímulo y controlan la transcripción en tiempo y espacio. Etapa inicio de la transcripción Etapas de elongación y terminación  5’ Cap La base modificada 7 metilguanosina (7mG) se añade en 2’-OH de la última base, eliminando un grupo fosfato con la formación de un enlace entre carbono 5’- 5’ de las ribosas Corte y empalme (splicing) Transcripción del genoma mitocondrial El cromosoma circular mitocondrial, es transcrito por una sola RNApol que está formada por un solo polipéptido y para la iniciación requiere del factor de transcripción mtTFA. El mtDNA se transcribe a partir de 3 lugares de iniciación, produciéndose así diferentes transcritos, que van a dar origen a los rRNAs, tRNAs y mRNAs mitocondriales. mtDNA: Total 37 genes 13 genes para mRNAs (13 proteínas) 22 genes para 22tRNAs 2 genes para 2 rRNAs Transcripción del genoma mitocondrial En la molécula de DNA circular de mitocondria las dos cadenas complementarias tienen una proporción de C y G muy dispar, y por ello tienen un peso molecular muy distinto. Para distinguirlas hablamos de cadena H o pesada (heavy) y cadena L o ligera (light ). Transcripción del genoma mitocondrial Cada cadena tiene su propio origen de replicación y de transcripción. Cada cadena se transcribe " en una sola pieza " ; es decir, se produce una sola molécula de RNA al que se denomina transcrito primario de esa cadena. El promotor de la transcripción de la cadena H se encuentra entre las posiciones 531 y 568 del DNA mitocondrial. Este promotor dirige la formación del complejo de transcripción que formará la burbuja donde se sintetiza el RNA denominado transcrito primario de la cadena H. Transcripción del genoma mitocondrial El transcrito primario de cada cadena sufre un proceso de corte por acción de nucleasas (RNAsas ) muy específicas, que producen una colección de RNAs. Estos RNAs reciben el nombre de " precursores ", y no son funcionalmente activos. Para ser funcionales deban sufrir un proceso de maduración. Expresión génica https://app.jove.com/es/embed/player?id=11587&access=i3xj7wd5l8&t=1&s=1&fpv=1  Traducción Se conoce como traducción a la síntesis de una proteína de acuerdo con la información genética y se emplea como molde una molécula de ARNm. Se llama traducción porque interpreta la información contenida en el gen utilizando un código genético a través del cual desarrolla una lectura de la secuencia de nucleótidos contenidos en el ARNm. Es un proceso exacto y rápido, se incorporan aproximadamente 15 aminoácidos por segundo, a una temperatura de 37°C. Razón por la cual es un proceso que consume una gran cantidad de energía.  Código Genético Ya que se dispone de cuatro bases diferentes, se tienen 64 diferentes combinaciones posibles de tres nucleótidos, teniendo un total de 61 codones, los cuales codifican para aminoácidos y tres marcan la terminación de la traducción, lo que permite asignar de manera adecuada un código de tres bases para la formación de cada uno de los 20 aminoácidos presentes en las proteínas y asi poder descifrar el mensaje genético contenido en el ADN.  Características del código genético Es especifico y continuo, ya que cada codón tiene un significado único y los códigos se leen de manera continua y lineal. Es redundante pero no ambiguo, ya que hay aminoácidos codificados por más de un codón (excepción de metionina y triptofano) Es degenerado ya que 61 codones son utilizados para codificar los 20 aminoácidos, ya que los codones se parecen entre si y difieren solo en el tercer nucleótido. Degeneración del código genético El código genético es casi universal Hasta hace poco se consideraba que, desde las bacterias hasta el hombre, la interpretación de los codones por aminoácidos era igual en todas las células de todas las especies, es decir, que todas “leen” los genes de la misma manera. Hoy por hoy, se conoce que esto no es totalmente cierto, ya que se han encontrado excepciones en las mitocondrias humanas, en otros mamíferos y en ciertas bacterias. Por tanto, es más correcto afirmar que el código genético es casi universal  Componentes del complejo traduccional La traducción ocurre en el citoplasma de la célula, con la formación del complejo traduccional, formado por tres tipos de ARN: mensajero (ARNm), transferencia (ARNt) y, ribosomal (ARNr).  Componentes del complejo traduccional ARNm es una molécula de ácido nucleico de cadena sencilla que contiene la información genética almacenada en el ADN y su secuencia es complementaria a una de las cadenas del ADN, a la que se la llama cadena molde. Presenta una disposición de tripletes de nucleótidos o codones, esto es, que están agrupados de tres en tres de manera secuencial, los cuales determinan la secuencia de aminoácidos en la proteína. Dicho de otro modo, esta molécula se obtiene mediante la transcripción, en la cual secuencias específicas de ADN son copiadas a ARNm, que transporta al citoplasma el mensaje contenido en el ADN a los sitios de síntesis proteica  Componentes del complejo traduccional Las moléculas de ARNt son de pequeño tamaño con estructura de bucles y son los ARN encargados de transportar al aminoácido hasta el ARNr, donde serán unidos, uno tras otro, mediante enlaces peptídicos. La enzima aminoacil-ARNt-sintetasa es la encargada de dicha unión, en un proceso que consume ATP. Los ARNt contienen en su secuencia al anticodón, un triplete de bases que se encuentra en el asa central del ARNt, en las posiciones 34, 35 y 36, que se une de manera complementaria con el codón del ARNm, durante la síntesis de una proteína, con la finalidad de introducir un aminoácido especifico a la cadena polipeptídica naciente.  Componentes del complejo traduccional El ARNr es el tipo de ARN más abundante en las células y forma parte de los ribosomas, que son las estructuras citoplasmáticas responsables de la biosíntesis proteica. Como los otros ARN, el ARNr está formado por una sola hebra nucleotídica, con bases complementarias en algunas regiones, lo que le permite adquirir una estructura secundaria especial. Se denomina según su coeficiente de sedimentación, medido en Svedbergs (S) y, de esta manera, en organismos procariotas existen tres ARNr distintos: 5S, 16S y 23S y en organismos eucariotas cuatro: 5S, 5.8S, 18S y 28S. Componentes del complejo traduccional  Ribosoma El ribosoma cuenta con tres sitios llamados A, P y E. Los dos primeros sitios se encuentran en ambas subunidades del ARNr y participan directamente en la decodificación del ARNm. El sitio P (centro P o peptidilo) es donde se localiza al peptidil-ARNt y, por lo tanto, donde se observa la elongación de la cadena peptídica, mientras que en el sitio A (centro A o aminoacil) es el lugar por el cual el aminoacil-ARNt (correspondiente a la lectura del codón) entra al complejo traduccional, para después transferir este aminoácido al peptidil-ARNt y generar el enlace peptidico. Ribosoma y tRNA https://youtu.be/YoyFpumWtHo  Interacción codón/anticodón La interacción codón/anticodón permite al ARNm, dirigir el orden de incorporación de los aminoácidos dentro de la cadena polipeptídica. Estas interacciones ocurren dentro de la subunidad menor. La interacción codón/anticodón ocurre básicamente con la teoría de complementariedad de base establecida por Watson y Crick, por lo que debería de existir igual número de anticodones que de codones, es decir 61; sin embargo, se sabe que existen menos de 61 ARNt, por lo que se deduce que un ARNt puede complementarse con más de dos codones diferentes.  Interacción codón/anticodón Hipótesis de bamboleo (Wobble). Tres de los 64 posibles codones son reconocidos como codones de terminación de la traducción. Los 61 codones restantes son reconocidos por los ARNt individuales. Por tanto, es posible que un apareamiento de bases que no se dé por complementariedad, ocurra en la posición del tercer codón, esto es, el nucleótido 3’ del codón de ARNm y el nucleótido 5’ del anticodón de ARNt.  Traducción Esquema en procariotas La secuencia Shine-Dalgarno, encontrada en procariotas, es rica en purinas, localizada rio arriba (extremo 5’) a 6 o 10 pares de base del codón de inicio en el ARNm. El ARNr de la subunidad menor cuenta en su extremo 3’ con una secuencia que es toda o casi a toda complementaria a la secuencia Shine-Dalgarno, lo que facilita la unión y la colocación del aminoacil-ARNt en la subunidad menor del ribosoma  Traducción Esquema de ARN mensajero eucariótico La secuencia Kozak es una secuencia de nucleótidos que funciona como el sitio de iniciación de la traducción de proteínas en la mayoría de las transcripciones de ARNm eucariota. Traducción Traducción Traducción Traducción  Traducción Procariotas Eucariotas Traducción Traducción Traducción Traducción  Traducción Mecanismos de traducción alternativos C IRES  Traducción Traducción dependiente de IRES  Traducción IRES Retrovirales HTLV-1 IRES MMTV IRES Inicio de la traducción en eucariontes Traducción dependiente de IRES Traducción dependiente de cap eIF4F 81 eIF4F Factores que actúan en trans (ITAFs) Los factores que actúan en trans o ITAFs son proteínas que normalmente no participan en la traducción cap-dependiente. Estas proteínas interactúan con el RNA, ayudando a su estructuración lo que trae como consecuencia que estas proteínas puedan ayudar a la función IRES, modulando la capacidad que tiene el IRES para reclutar el ribosoma. Esta modulación puede ser positiva o negativa. Traducción dependiente de IRES 40 S 40 S 82 Las proteínas ITAFs son RBPs (Proteínas de unión a RNA), que pueden encontrarse tanto al núcleo como en el citoplasma. Las RBPs pueden translocarse del núcleo al citoplasma en ciertas condiciones celulares como infecciones, stress y proliferación. Sus modificaciones post-traduccionales pueden tener un impacto en su localización celular así como también en su capacidad de interactuar con el RNA y/u otras proteínas. 83 Las proteínas ITAFs junto con sus Modificaciones post-traduccionales modulan mas finamente la traducción mediada por IRES 84