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Faculté de Médecine de Tunis PCEM1 Les techniques histologiques & Les épithéliums de revêtement Elaboré par Dr. IMEN HAMMAMI E-mail: [email protected] Année universitaire 2023-2024 Généralités Histologie = étude de l’organisation des tissus biologiques (en latin: Histo= tissu; logo= science) Utilités Décrire la morphologie cellulaire Explorer la structure Une science vivante et utile pour tout étudiant en médecine, en chirurgie dentaire et en biologie, En effet, la connaissance des tissus normaux, sur le plan structural et ultra-structural, permet d’assurer le lien entre structure et fonction. Cela facilite l’approche des différentes pathologies à différents niveaux. Concept du tissu Tissu : assemblage de cellules semblables et de même origine regroupées en amas assurant une activité physiologique particulière. Exp: Tissu musculaire --- la contraction. Tissu nerveux --- le fonctionnement intégré de tout l’organisme Tissu épithélial--- protection, gestion des échanges Dans l’organisme, différents niveaux d’organisation structurale (en allant du plus élémentaire vers le plus complexe) qui correspondent aux: Molécules- organites- Cellules Tissus Organes Systèmes et Appareils Organisme Concept du tissu Les tissus ne sont pas isolés, ils s’assemblent entre eux pour former des organes. Un tissu prédomine dans chaque organe et détermine sa fonction. Techniques histologiques PRINCIPALES ETAPES DE LA TECHNIQUE HISTOLOGIQUE CLASSIQUE 1.FIXATION 2.DESHYDRATATION 3.INCLUSION 4.COUPE 5.COLORATION Choix du matériel et modalités de prélèvement Matériel histologique = matériel tissulaire - Biopsie directe (peau) ou par voie endoscopique (muqueuse digestive) - Ponction à l’aiguille (liquide pleural; articulaire; moelle osseuse) - Pièce opératoire ex : ablation de la glande thyroïdienne - Autopsie La fixation La fixation a pour but la conservation des structures et le durcissement des organes ou des tissus Les liquides fixateurs sont le formol (méthanal) et le liquide de Bouin La durée de la fixation varie selon le matériel histologique Recouper le fragment biopsique Mettre dans une cassette d’inclusion Déshydratation et Inclusion: Automate Remplacer l’eau tissulaire par la paraffine Les bacs: Alcool (95% et 100%) (5 bains) Solvants organiques (Toluène /5 bains) Paraffine en pastilles et liquide Paraffine liquide (3 bains) Un moule est rempli de paraffine liquide Refroidissement des moules Démoulage des blocs Mise en place du bloc en microtome Epaisseur de la coupe: 2-5 um La coupe Etalement sur lame Séchage Déparaffinage Coloration Montage des lames Observation microscopique et interprétation Les colorants Coloration HE Hématoxyline: - colorant basique qui colore les structures acides: Noyau (ADN,ARN), ribosomes, RE… - Structures sont dites basophiles - Colorées en bleu/violet Eosine - colorant acide qui colore les structures basiques: cytoplasme, mitochondries… - Structures sont dites acidophiles ou éosinophiles - Colorées en rose Orcéine (Elastine) Bleu de Prusse (Fer) PAS (Polysaccharides) Bleu alcian (sécrétions visqueuses) MO ME à transmission ME à balayage Une même structure peut être observée de plusieurs façons. Les incidences de coupes Les Tissus épithéliaux Epithélium: Définition Un épithélium est constitué de: Cellules juxtaposées Jointives (unies par des systèmes de jonctions) Reposant sur une lame basale qui le sépare du tissu conjonctif sous-jacent. Epithélium: Caractéristiques Pas de vaisseaux sanguins, Nourris par les capillaires sanguins du tissu conjonctif, Structure polarisée: pôle apical (du côté de la lumière) et pôle basal (du côté de la lame basale) Epithélium: Caractéristiques Les épithéliums Ep. Ep. de revêtement glandulaires Epithéliums de revêtement Surface du corps Epithéliums de revêtement La classification des épithéliums de revêtement se fait selon le nombre d’assises: Les épithéliums simples Les épithéliums pseudostratifiés Les épithéliums stratifiés Les épithéliums de revêtement simples La classification se fait selon: la forme (pavimenteuse, cubique ou cylindrique) la présence et la nature des différenciations membranaires apicales quand elles existent (microvillosités, stéréocils,cils) 1- Les épithéliums pavimenteux simples Une seule assise de cellules juxtaposées; jointives reposant sur la lame basale; aplaties à noyau ovalaire occupant une position centrale On rencontre ce type au niveau: des endothéliums: épithéliums qui revêtent la face interne des vaisseaux sanguins et lymphatiques (cellules endothéliales) des mésothéliums: épithéliums qui revêtent la plèvre, le péricarde, le mésentère (cellules mésothéliales) Les épithéliums pavimenteux simples Ep: ENDOTHELIUM Les caractéristiques histologiques: - Cellules endothéliales aplaties - Noyau ovalaire central fait saillie dans la lumière - Cytoplasme très mince; difficile à observer en MO Les épithéliums pavimenteux simples Coupe longitudinale d’un vaisseau Coupe transversale d’un vaisseau 2- Les épithéliums cubiques simples exp: segment distal du néphron Schéma tridimensionnel de Les caractéristiques histologiques: segment distal du néphron (rein) - Cellules épithéliales cubiques (plus larges que hautes) - Noyau arrondi central 2- Les épithéliums cubiques simples TD TD TD Coupe transversale du segment Coupe transversale de l’ovaire distal du néphron 3- Les épithéliums prismatiques simples Les caractéristiques morphologiques: - Cellules plus hautes que larges - Noyau ovoïde, situé dans le tiers moyen ou basal de la cellule - Pole apical avec ou sans différenciations 2 types : - E. prismatique simples sans différenciations apicales - E. prismatiques simples avec différenciations apicales à: * plateau strié * bordure en brosse * stéréocils * cils Les épithéliums prismatiques simples sans différenciations apicales Coupes histologiques d’un épithélium de revêtement de l’endocol Coupe histologique d’un épithélium de revêtement de la face interne de l’estomac Les épithéliums prismatiques simples à plateau strié (face interne de l’intestin grêle) Coupe longitudinale de l’intestin grêle (villosités intestinales) Les épithéliums prismatiques simples à plateau strié (face interne de l’intestin grêle) Plateau strié= microvillosités régulières, parallèles, rectilignes et de même diamètre Entérocytes= absorption des nutriments Cellules caliciformes (à mucus): protection contre les agents pathogènes Les épithéliums prismatiques simples à plateau strié Les épithéliums prismatiques simples à bordure en brosse: segment proximal du rein Les caractéristiques histologiques: - Cellules épithéliales prismatiques - Noyau ovoïde situé au tiers moyen de la cellule - Pôle apical présente des différenciations à bordure en brosse Les épithéliums prismatiques simples à bordure en brosse Coupes histologiques du tube Proximal du rein (microvillosités plus longues et moins régulièrement disposées que dans le plateau strié) Les épithéliums prismatiques simples à stéréocils Schéma tridimensionnel de l’épididyme Les caractéristiques histologiques: - Cellules épithéliales prismatiques - Noyau ovoïde situé au pôle basal de la cellule - Pôle apical présente des différenciations à stéréocils Les épithéliums prismatiques simples à cils Schéma tridimensionnel de l’oviducte Coupe histologique de la trompe de Fallope Évaluation 1- Définir un épithélium 2-Citer les caractères généraux des épithéliums 3- Définir un épithélium de revêtement simple 4- Indiquer les critères de classification des épithéliums de revêtement simples 5-Représenter à l’aide de schémas les différents types d’épithélium de revêtement simples en donnant un exemple pour chacun. 6-Quelles sont les différentes différenciations apicales qui peuvent présenter les cellules épithéliales? 7-Quelles sont les caractéristiques histologiques d’un épithélium pavimenteux/cubique/prismatique simple? 8-Quelles sont les différences histologiques entre les cils et les stéréocils? 9- Représenter à l’aide d’un schéma légendé l’épithélium de la surface interne de l’intestin grêle. 10. Sur les diapositives suivantes, identifier le type de l’épithélium Épithélium pavimenteux simple: 1: cellule épithéliale 2: lame basale Flèches noires: épithélium prismatique simple Flèche jaune: endothélium Épithélium prismatique simple stéréocilié: 1: stéréocils 2: moyens de jonction (points noirs) Épithélium pavimenteux simple 1: cellule endothéliale Merci pour votre attention
