T.P.: Physiologie Générale - Étude des éléments figurés du sang PDF

# T.P.: Physiologie Générale ## Étude des éléments figurés du sang **1. Prélèvement de l'échantillon de sang et exécution du frottis** - Nettoyer la peau à l'aide d'un tampon imbibé d'alcool. - Piquer l'extrémité du doigt à l'aide d'une aiguille. - Recueillir une très petite goutte de sang avec le...

# T.P.: Physiologie Générale ## Étude des éléments figurés du sang **1. Prélèvement de l'échantillon de sang et exécution du frottis** - Nettoyer la peau à l'aide d'un tampon imbibé d'alcool. - Piquer l'extrémité du doigt à l'aide d'une aiguille. - Recueillir une très petite goutte de sang avec le bord d'une lamelle couvre-objet. - Appuyer ce bord contre l'extrémité d'une lame porte-objet et faire en sorte que la goutte de sang s'étale par capillarité entre la lame et la lamelle. - Pousser la lamelle d'un geste net et sans à-coup de façon à étaler le sang en couche mince. - Le sang doit suivre la lamelle et ne doit pas être poussé par elle. - Pour obtenir un bon résultat, il convient d'étaler complètement la goutte de sang avant que la lamelle ne parvienne à l'autre extrémité de la lame. - Sécher rapidement à l'air et à la température ambiante. **2. Fixation et coloration** - Placer le frottis sur le support de verre au-dessus du cristallisoir. - Verser sur le frottis un nombre suffisant de gouttes de May-Grünwald pour recouvrir toute la surface du frottis. - Laisser en contact pendant 3 minutes. - Veiller à ce que le colorant ne sèche pas sur le frottis. - Après 3 minutes, ajouter au colorant répandu sur le frottis autant de gouttes d'eau distillée qu'il y a de gouttes de colorant. - Mélanger le colorant et l'eau par de légères oscillations de la lame. - Laisser en contact 1 minute puis égoutter la lame dans le cristallisoir. - Verser sur le frottis un nombre suffisant de gouttes de colorant de Giemsa dilué pour le recouvrir. - Laisser agir 10 minutes en s'assurant que le frottis est toujours recouvert par le colorant. - Après 10 minutes, rincer d'un jet de pissette, égoutter et placer la lame verticalement. - Laisser sécher complètement avant l'examen au microscope. **3. Numération** - _Les globules rouges_ - En s'aidant du réseau gravé sur le fond de la cellule compter le nombre de globules dans chacun des petits carrés du réseau. - Pour les globules se trouvant à cheval sur les limites des carrés, il est convenu de compter ceux qui se trouvent sur les côtés droits et inférieurs et de négliger ceux des côtés opposés. - Le nombre de globules rouges par mm³ = (nombre compté) x 10 000 - _Les globules blancs_ - Elle se fera comme la précédente en utilisant la deuxième pipette et en diluant le sang à l'aide de la solution acétique de violet de méthyle. - Le nombre de globules blancs par mmm³ = (nombre compté) x 50 ## NUMERATION GLOBULAIRE **Matériel:** - Liquide de Marcano ou de Hayem - Solution acétique de violet de méthyle - Microscope - Lancette - Hématimètre de Neubauer ou de Thoma **Technique:** - Le prélèvement se fera par piqûre d'un doigt au niveau de la pulpe. - Après la piqûre, laisser couler librement le sang. - Ne pas presser pour éviter une dilution possible avec la lymphe. - Plonger la pointe de la pipette dans le sang qui sourd de la piqûre et aspirer doucement jusqu'au trait 0,5 (cas d'un sang normal) ou un peu au-dessus. - Eviter soigneusement l'entrée de bulles d'air. - Avec du papier Joseph, essuyer l'extrémité de la pipette et enlever l'excès de sang, s'il y en a, de telle sorte que l'affleurement se fasse exactement au niveau du trait. - Sans attendre, aspirer du liquide de Hayem jusqu'au trait 101 exactement en évitant soigneusement l'entrée de bulles d'air. - Enlever doucement le tube de caoutchouc, chasser 2 gouttes de liquide puis déposer une petite goutte au centre de la cellule. - Appliquer la lamelle couvre-objet de l'hématimètre sur les glissières de la cellule comme l'indique la figure 3 et la laisser tomber en la soutenant avec une aiguille. - Appuyer légèrement et attendre quelques minutes pour que les globules soient déposés. ## VALEUR HÉMATOCRITE **Matériel:** - Centrifugeuse à hématocrite - Lancette - Alcool et coton - Tube à hématocrite - Règle spéciale à hématocrite - Pâte à boucher **Technique:** - Désinfectez avec un coton imbibé d'alcool la pulpe du doigt. - Laissez le sang s'écouler, normalement. - Prenez un tube capillaire d'hématocrite. Mettez - le obliquement et vers le bas au contact de la goutte de sang qui pénètre par capillarité jusqu'au trait limite. - Faire attention aux bulles d'air. - Bouchez le tube avec la pâte et placez - le dans la centrifugeuse à hématocrite. - Centrifugez pendant 5 minutes. - Lisez la hauteur de la colonne de sédimentation ( valeur hématocrite) au moyen de la règle spéciale à hématocrite. - Refaites la même manipulation en pressant sur la pulpe du doigt pour faire sortir le sang. ## MESURE DE L’HÉMOGLOBINE DANS LE SANG **Matériel:** - Lancette - Alcool et coton - Hémoglobine - Acide chlorhydrique dilué au 1/10 - Eau distillée - Pipette de 201 **Technique:** - Placez 5 gouttes d'HCL N/10 dans le tube gradué qui se trouve dans la boîte de l'hémomètre. - Aspirez avec la pipette spéciale de l'hémomètre du sang de votre doigt jusqu'à la marque 201. - Essuyez la pipette de l'extérieur en la passant sur du papier filtre. - Faites couler ce sang dans l'acide du tube gradué. - Videz complètement la pipette. - Notez le temps. - Agitez doucement. - Attendez 3 minutes. - Tout en agitant, ajoutez de l'eau distillée goutte à goutte jusqu'à ce que la coloration, dans le tube placé dans son support, devient identique à la coloration standard. - 5 minutes après le temps noté, lisez en vous basant sur la base du ménisque qui se forme dans le tube. - Le résultat lu donne directement le taux d'Hb en g/100 cm³ de sang. ## TEMPS DE SAIGNEMENT **Matériel:** - Lancette - Alcool et coton - Papier filtre - Chronomètre **Technique:** - Désinfectez avec un coton imbibé d'alcool le lobule de l'oreille. - Piquez le lobule avec la lancette. - Laissez le sang s'écouler, normalement. - Déclenchez le chronomètre. - Epongez toutes les 30 secondes la goutte de sang avec le papier filtre sans toucher la peau. - A l'arrêt de l'écoulement, lisez le temps. ## VITESSE DE SÉDIMENTATION **Matériel:** - Sang frais oxalaté (48 à 72h) - Tubes gradués à sédimentation - Porte tubes à sédimentation **Technique:** - Remplissez un tube gradué avec du sang oxalaté, le sang ne doit pas avoir plus que 72h. - Placez ce tube verticalement dans le porte tubes à sédimentation. - Mesurez la quantité de plasma qui surnage en mm, ceci donne la vitesse de sédimentation. - Lisez la sédimientation après une heure puis deux heures. ## TEMPS DE COAGULATION **Matériel:** - Lame - Lancette - Alcool et coton - Chronomètre **Technique:** - Désinfectez avec un coton imbibé d'alcool la pulpe du doigt. - Piquez la pulpe avec la lancette. - Mettez deux gouttes séparées de sang sur une lame propre. - Déclenchez le chronomètre en même temps que la mise des gouttes de sang sur la lame. - Agitez délicatement et en mouvement circulaire la lame de temps à autre. - Arrêtez le chronomètre quand la coagulation du sang commence à apparaître sur la lame et lisez le temps. - La coagulation se présente sur la lame par l'appariton d'une ligne rouge noirâtre sur le pourtour de la goutte du sang. - Reprendre l'expérience en gardant la goutte de sang sur le bout du doigt piqué. ## RESISTANCE GLOBULAIRE **Matériel:** - Alcool et coton - Lancette - 10 éprouvettes - Porte éprouvettes - Solution d'eau salée à 1% - Eau distillée **Technique:** - Mettez dans un porte éprouvettes une série de 10 éprouvettes. - Mettez dans chaque éprouvette le nombre de gouttes d'eau distillée et d'eau salée indiqué par le tableau suivant. - On obtient une série de concentration d'eau salée. - Placez le compte goutte verticalement pour avoir des gouttes égales. - Mélangez bien l'eau salée à l'eau distillée dans les tubes. - Ajoutez à chaque tube une goutte de sang. - Mélangez. - Laissez reposer pendant une heure. - Quand l'hémolyse est totale le contenu du tube est uniformément coloré en rouge. # LE COEUR ## Caractéristiques du “Moteur” - Le coeur est un muscle creux à quatre cavités: deux oreillettes et deux ventricules. - Vide de sang, il pèse 270 g. - Les parois des ventricules sont épaisses et forment une masse charnue importante; les parois des oreillettes sont minces et flasques (lorsque le coeur est vide, elles sont rabattues sur les ventricules comme des oreilles sur la tête d'un éléphant; d'où leur nom). - La moitié droite et la moitié gauche du coeur ne communiquent pas entre elles. - Chaque oreillettes communique avec le ventricule situé du même côté; mais des valvules ne laissent passer le sang que des oreillettes vers les ventricules: - la valvule mitrale (valvule du coeur gauche) est formée de deux lames; - la valvule tricuspide (valvule du coeur droit) en a trois. - Le coeur reçoit le sang par les veines et envoie le sang dans les artères. - Les valvules sigmoides placées à la base des artères empêchent le sang de refluer de artères dans les ventricules. - Le coeur est un muscle entouré par le péricarde et revêtu par l'endocarde. - Le muscle cardiaque ou myocarde est formé de fibres musculaires striées à contraction involontaire. - Les jonctions entre les fibres adjacentes ou stries scalariformes sont des zones de faible résistance électrique permettant la diffusion rapide du stimulus. - Ainsi le muscle cardiaque fonctionne comme un syncytium. - Cependant, les deux étages du coeur, les oreillettes et les ventricules forment deux masses musculaires indépendantes. - On trouve dans le coeur un autre type de tissu musculaire à cellules, minces, fusiformes, plus petites que les fibres myocardiaques, c'est le tissu nodal. - Ce tissu assure la transmission des stimulus entre la masse musculaire auriculaire et la masse musculaire ventriculaire. ## Observation du Cœur de Mouton - Situez anatomiquement le coeur. - Côté ventral. - Côté dorsal. - pointe généralement dirigée vers la gauche de l'animal. - Dégagez le coeur de son péricarde. - Observez: - a) les deux oreillettes à paroi mince et flasque et les deux ventricules à paroi épaisse. - b) du côté ventral du coeur, les artères à paroi élastique - Le tronc artériel part du ventricule gauche, ce tronc comprend: l'aorte principale (cross aortique) et l'aorte antérieure. - L'aorte principale envoie une petite artère qui irrigue le coeur (l'artère coronaire). - c) du côté dorsal du coeur, les veines à paroi flasque: - les veines pulmonaires débouchent dans l'oreillette gauche - les deux veines caves antérieure et postérieure débouchent dans l'oreillette droite. ## Dissection du Coeur de Mouton - **lère étape:** Ouverture du ventricule gauche. - Introduisez une sonde dans l'aorte jusqu'à la base du ventricule gauche et coupez la musculature en suivant la sonde. - Observez: - a) les valvules sigmoides ou valvules semi lunaires avec des lames musculaires arrondies. - Ces valvules sont situées à l'embouchure de l'aorte avec le ventricule. - b) la valvule mitrale ou bicuspides qui sépare l'oreillette du ventricule, cette valvule comprend des fibres tendineues articulées sur les piliers charnus de la musculature ventriculaire. - c) l'orifice interne de l'aorte antérieur et les deux orifices des artères coronaires. - d) la musculature épaisse du ventricule gauche. - **2ème étape:** Ouverture de l'oreillette gauche. - Par la valvule mitrale, incisez la musculature de l'oreillette gauche. - Observez: - a) Les orifices des veines pulmonaires. - b) La paroi extensible de l'oreillette. - **3ème étape:** Ouverture du ventricule droit. - Par l'artère pulmonaire, incisez la musculature du ventricule droit. - Observez: - a) les valvules sigmoides à l'embouchure de l'artère pulmonaire. - b) la valvule tricuspide qui sépare l'oreillette droite du ventricule droit. - c) la paroi du ventricule droit. - Remarquez qu'elle est moins épaisse que la paroi du ventricule gauche. - **4ème étape:** Ouverture de l'oreillette droite. - Par la valvule tricuspide, incisez la paroi de l'oreillette droite. - Observez: - a) les deux veines caves antérieure et postérieure. - b) le noeud de Keith et Fluck ou noeud sinusal situé au niveau de l'abouchement de la veine cave antérieure. - Il apparaît sous la forme d'une traînée blanche fusiforme de 2 cm de long et de 2 mm de large. - c) le noeud d'Aschoff - Tawara ou noeud auriculo - ventriculaire situé en avant de l'abouchement de l'artère coronaire. - Le noeud d'Aschoff - Tawara se prolonge par le faisceau de His. Les ramifications du faisceau de His forment le réseau de Purkinje. - L'oreillette gauche est dépourvue de tissu nodal. Sa musculature est exclusivement myocardiaque. # TABLE | N° | Description | |---|---| | 1 | Ventricle droit | | 2 | Oreillette droite | | 3 | Veine cave antérieure | | 4 | Artère aorte principale | | 5 | Aorte antérieure | | 6 | Artères pulmonaires | | 7 | Veines pulmonaires | | 8 | Oreillette gauche | | 9 | Veine cave postérieure | | 10 | Sillon ventral | | 11 | Ventricule gauche | | 12 | Orifice de l'aorte antérieure | | 13 | Orifices des artères coronaires | | 14 | Valvules sigmoides | | 15 | Valvule mitrale | | 16 | Fibres tendineuses | | 17 | Piliers charnus | | 18 | Paroi du ventricule gauche | | 19 | Ventricule droit | | 20 | Paroi du ventricule droit | | 21 | Ventricule gauche | | 22 | Piliers charnus du ventricule gauche |