Pharmacométrie - Méthodes d'étude PDF

Pharmacométrie I.Introduction Antagoniste : pas de changement conformationel On cherche à savoir si ça se fixe ou non On regarde la réponse biologique II.Caractérisation de la liaison d'un médicament à un récepteur 2 méthodes : -expérience de binding/ saturation -expérie...

Pharmacométrie I.Introduction Antagoniste : pas de changement conformationel On cherche à savoir si ça se fixe ou non On regarde la réponse biologique II.Caractérisation de la liaison d'un médicament à un récepteur 2 méthodes : -expérience de binding/ saturation -expérience de déplacement/ compétition 1.Expérience de binding/ saturation 3 étapes : -incubation -séparation -quantification But : étude quantitative de la liaison L-R (=affinité) -\> détermination de Kd et Bmax Se fait dans un tube à essai On retrouve : -les récepteurs -les ligands Principe :  Il y a des récepteurs seuls, des ligands seuls mais aussi des récepteurs accrochés aux ligands 1-incubation Molécule marqué radioactivement Propriétés de la liaison L-R : -saturable (nombre de sites de liaison spécifique limité, Bmax) -Réversible (liaisons de faible énergie)  2-Séparation Pour séparer sur du papier filtre : les plus grosses molécules sont retenues : les récepteurs (protéines), les ligands vont passer le papier filtre   = le ligand c'est fixé spécifiquement sur le récepteur Lfroid : non marqué Prend la place sur les récepteurs  Liaison non spécifique : plateau pas assez de récepteurs 2 paramètres : -Bmax -Kd  Quantité maximale de ligand qui se fixe Kd c'est une concentration Se fixe avec des petites concentrations don se fixe mieux Plus Kd est petit meilleur sera l'affinité Limite : Pas top de marquer radioactivement des molécules, ça prend du temps et c'est cher Toutes les molécules devant être testées doivent être radios marquées 2.Expérience de déplacement/ compétition But : déterminer l'affinité d'une substance (médicament potentiel) pour un site d'intérêt Principe :  Récepteur + molecule non radioactive On utilise un seul tube car on utilise une seule concentration de la molécule radioactive  Notre molécule se fixe sur le récepteur car plus on ajoute de ligand plus le nombre de molécules radiomarquées diminue Kd plus faible = plus forte affinité  Ki permet de mieux comparer La rouge a le plus d'affinité pour le récepteur Plus le Ki est petit meilleur sera l'affinité III\. Approches fonctionnelles de l'action des médicaments 1.Etude qualitative et quantitative de l'effet agoniste But : établir une relation entre al réponse et la dose d'une substance : courbe dose-réponse Principe : administration de la substance a un système (organisme entier, organe, cellule...) et mesure de la réponse biologique Meilleur : rouge Plus la CE50 est petit meilleur sera l'affinité Plus le pD2 est grand meilleur sera l'affinité  2 paramètres importants : la puissance et l'efficacité  Agoniste entier : molécule la plus efficace Agoniste inverse : super agoniste Pas optimal a cause d'un changement conformationel : agoniste partiel   Meilleur : rouge Avec des petites concentrations on supprime l'effet de l'agoniste