Identificarea Neisseria spp. PDF
Document Details
Uploaded by UnbiasedJackalope
Universitatea de Medicină și Farmacie Grigore T. Popa Iași
Tags
Summary
Acest document prezintă informații despre identificarea Neisseria spp., inclusiv caracteristicile microbiologice ale tractului genital masculin și feminin, agenții etiologici ai infecțiilor cu transmitere sexuală și diagnosticul de laborator în gonoree. Informațiile sunt utile pentru studenții de medicină și farmacie.
Full Transcript
24-Mar-24 Identificarea Neisseria spp. Infecţii bacteriene cu transmitere sexuală Obiective: 1. Identificarea neisseriilor 2. Cunoaşterea condiţiei microbiologice a tractusului genital masculin şi feminin 3. Cunoaşterea agenţilor etiologici şi a principalelor...
24-Mar-24 Identificarea Neisseria spp. Infecţii bacteriene cu transmitere sexuală Obiective: 1. Identificarea neisseriilor 2. Cunoaşterea condiţiei microbiologice a tractusului genital masculin şi feminin 3. Cunoaşterea agenţilor etiologici şi a principalelor tipuri de infecţii cu transmitere sexuală 4. Cunoaşterea diagnosticului de laborator în gonoree 1 24-Mar-24 1. Identificarea neisseriilor Neisseria meningitidis (meningococul) Specii cu Neisseria habitat uman gonorrhoeae strict patogene: (gonococul) 2 24-Mar-24 Caractere microscopice - nesseriile sunt diplococi cu fețele adiacente aplatizate (“boabe de cafea”) - imobili, gram negativi, au tendința de a rezista la decolorare Caractere microscopice În prelevatele patologice, speciile patogene apar predominant intracelular, în citoplasma fagocitelor. Diplococi în boabă de cafea, gram negativi, intracelulari Frotiu din produs patologic, neutrofil colorat Gram, 1000x 3 24-Mar-24 Frotiu din produs patologic, colorat Gram, 1000x 4 24-Mar-24 5 24-Mar-24 Caractere de cultivare - Pretențioase nutritiv - strict aerobe, 5-10% CO₂ - cultivă optim la 35 - 37⁰C - medii îmbogăţite (agar-chocolat) Caractere biochimice Catalaza + Oxidaza + 6 24-Mar-24 N. gonorrhoeae degradarea zaharurilor – gonococul descompune oxidativ numai glucoza (nu maltoza, zaharoza şi fructoza) 2. Condiţia microbiologică a tractusului genital a. Tract genital masculin: - uretra distală - normal colonizată cu bacterii de pe tegument şi colon (stafilococi coagulazo negativi, bacili difterimorfi, enterobacterii, Neisseria nepretențioase, bacterii anaerobe, stafilococi coagulazo-pozitivi) - uretra proximală - necolonizată, ocazional contaminată - prostata, canalele ejaculatoare, veziculele seminale, canalele deferente, epididim - normal sterile. 7 24-Mar-24 2. Condiţia microbiologică a tractusului genital b. Tract genital feminin: - vulva, vagin, exocol - normal colonizate primele saptămâni de viaţă: lactobacili prepubertar: bacterii de pe tegumentul perineal de la pubertate şi până la menopauză: lactobacili predominant, bacterii anaerobe, Gardnerella vaginalis, Candida postmenopauza: bacterii de pe tegumentul perineal - endocol uterin, uter, trompe – normal sterile Infecții cu transmitere sexuală Treponema pallidum Syphilis Neisseria Gonoree gonorrhoeae Chlamydia L1-L3 Limfogranulomatoza veneriană inghinală trachomatis Chlamydia Uretrită non-gonococică trachomatis D-K Endocervicită non-gonococică Ureaplasma urealyticum Micoplasme Uretrită non-gonococică Mycoplasma genitalium genitale Endocervicită non-gonococică M. hominis Haemophilus Șancru moale ducreyi Shigella Salmonella Campylobacter 8 24-Mar-24 Agenți etiologici ai uretritei Uretrita gonococică - Neisseria gonorrhoeae (gonococ) Uretrita non-gonococică Mycoplasma genitalium Mycoplasma hominis Ureaplasma urealyticum Chlamydia trachomatis serovar D-K Neisseria meningitidis Diagnosticul de uretrită non-gonococică se stabilește prin excluderea etiologiei gonococice Co-infecții 4. Diagnosticul de laborator în gonoree I. Uretrita gonococică 9 24-Mar-24 Uretrita gonococică a) Prelevare şi transport: secreţie uretrală purulentă, urină dimineaţa sau la minimum 4 ore de la ultima micţiune după toaleta locală prelevarea secreției uretrale - 2 tampoane (din dacron sau vată atoxică) primul tampon: 2 frotiuri realizate extemporaneu 10 24-Mar-24 al 2-lea tampon: însămânţare imediată sau includere în mediu de transport Uretrita gonococică b) Examen microscopic: frotiuri colorate cu albastru de metilen şi Gram Frotiu din puroi uretral colorat cu albastru de metilen , 1000x 11 24-Mar-24 Uretrita gonococică b) Examen microscopic: frotiuri colorate cu albastru de metilen şi Gram Frotiu din puroi uretral colorat gram, 1000x Examen microscopic Numeroase PMN diplococi gram negativi „în boabă de cafea” asezaţi predominant intracelular = aspect caracteristic pentru uretrita acută gonococică la bărbat valoare diagnostică la bărbaţii simptomatici (specificitate >99%, sensibilitate >95%) Frotiu din puroi uretral colorat Gram ,1000x 12 24-Mar-24 : Uretrita gonococică c) Cultivarea exsudatului uretral Necesară NUMAI în caz de eșec therapeutic şi în infecţia cronică Medii îmbogățite neselective (agar chocolat) Medii îmbogățite selective (mediu Thayer–Martin) Bacterie sensibilă => medii preîncălzite, însămânţate imediat după recoltare Incubare 5% CO₂ colonii de tip S, translucide, mici, stralucitoare, nepigmentate 13 24-Mar-24 Cultură de Neisseria gonorrhoeae http://virtuallab.apa.uoit.ca/virtual_lab.php?id=L5_15 Uretrita gonococică d) Identificare: 1. biochimică: - oxidază-pozitiv, - catalază- pozitiv - spectrul de degradare a zaharurilor (descompune oxidativ glucoza) http://www.esanatos.com/ghid-medical/microbilologie/ Diagnosticul-de-laborator- al-i85617.php 14 24-Mar-24 Uretrita gonococică d) Identificare: 2. Antigenică – IFD, coaglutinare, test colorimetric 3. Metode de biologie moleculară (sonde de acizi nucleici) Uretrita gonococică e) Antibiogramă (în caz de eşec terapeutic) - alegerea antibioticului în raport cu sensibilitatea tulpinii izolate; - antibiotice active: cefalosporine (ceftriaxona), spectinomicină (utilă pentru tulpinile rezistente), fluorochinolone, tetracicline, cotrimoxazol; - rezistenţă dobândită la toate antibioticele. 15 24-Mar-24 II. Endocervicita gonococică a) Prelevare şi transport 2 tampoane de exsudat cervical din endocol (după ştergerea exocolului cu tampoane sterile) primul tampon: examen microscopic al 2-lea tampon: însămânţare imediată sau includere în mediu de transport Amies sau Stuart II. Endocervicita gonococică b) Examen microscopic frotiu exsudat endocervical diplococi gram negativi „în boabă de cafea” asezaţi predominant extracelular examen nespecific (nu poate diferenţia gonococul de neisseriile comensale) 16 24-Mar-24 II. Endocervicita gonococică c) Cultivare - este OBLIGATORIE în diagnosticul endocervicitei gonococice (sensibilitate și specificitate mari) - permite identificarea speciei - Medii îmbogățite neselective (agar chocolat) - Medii îmbogățite selective (mediu Thayer–Martin) - Bacterie sensibilă => medii preîncălzite, însămânţate imediat după recoltare - Incubare 5% CO₂ - colonii de tip S, translucide, mici, stralucitoare, nepigmentate Cultură de Neisseria gonorrhoeae http://virtuallab.apa.uoit.ca/virtual_lab.php?id=L5_15 17 24-Mar-24 II. Endocervicita gonococică d) Identificarea izolatului e) Antibiogramă Alte metode de diagnostic Teste de amplificare a acizilor nucleici Detecția secvențelor nucleotidice direct în produs patologic (exsudat uretral, urină, exsudat endocervical) Avantaje: Sensibile, specifice şi rapide Dezavantaje: Nu pot monitoriza rezistenţa la antibiotice 18 24-Mar-24 Caz clinic Pacient care prezintă secreție uretrală purulentă și disurie apărute la 3 zile după raport sexual neprotejat Diagnostic prezumptiv – uretrită Caz clinic Prelevare – puroi uretral Examen microscopic frotiu puroi uretral colorat Gram, 1000x 19 24-Mar-24 Caz clinic Pacientă care prezintă disurie, dureri în etaj abdominal inferior, sângerare după contact sexual și dispareunie, apărute la 10 zile după un raport sexual neprotejat Caz clinic Prelevare – secreție endocervicală Examen microscopic frotiu secreție endocol colorat Gram, 1000x 20 24-Mar-24 Caz clinic Cultivare Identificarea speciei antibiogramă 21