Le sang : traces sanguines d'une rencontre pathogène - Cours PDF

**[Le sang : traces sanguines d'une rencontre pathogène]** I. [Le sang] Hématologie : Etude de la physiologie et de la pathologie du sang Hémogramme (= numération formule sanguine (NFS)) = examen biologique du sang à partir d'un échantillon prélevé par ponction veineuse sur anticoagulant =\> on...

**[Le sang : traces sanguines d'une rencontre pathogène]** I. [Le sang] Hématologie : Etude de la physiologie et de la pathologie du sang Hémogramme (= numération formule sanguine (NFS)) = examen biologique du sang à partir d'un échantillon prélevé par ponction veineuse sur anticoagulant =\> on teste plusieurs paramètres qui ont de sens que tous ensemble. Le problème est que le sang coagule hors du corps à cause de la rencontre avec des charges positives ou négatives (surtout négatives), c'est pourquoi il faut le stocker dans 1 récipient. Avant on le stockait dans des tubes en verres mais ça coagulait quand même beaucoup (sulfites), c'est pourquoi on le stocke dans un tube en plastique neutre. On ajoute aussi du liquide anticoagulant (= substances qui complexifient le sang pour empêcher la coagulation) dans le tube : en fonction de ce qu'on veut analyser, on met un liquide ≠. Chaque couleur de bouchon correspond à un type de liquide (conventions de couleur): [Composants cellulaires du sang : ] Sang = tissu conjonctif liquide qui a plein de fonctions : - Respiratoire : apporte de l'oxygène aux organes - Nutritive : transport de sucres, protéines pour nourrir les cellules - Dépurative : déchets filtrés par le rein (cf système urinaire) - Régulatrice : électrolytes, osmolarité - Thermique : sang liquide est composé de bcp d'eau : en circulant il maintient la chaleur -  Défensive cellulaire et humorale : les Ac sont véhiculés en partie par le plasma Sang = éléments figurés (45%) + plasma (55%) Éléments figurés = cellules (globules rouges et blancs), plaquettes (= fragments de mégacaryocytes),... qui baignent dans le plasma. La grande majorité des éléments figurés sont des GR. Il y a 5 sortes de globules blancs définies morphologiquement : Pour accélérer la sédimentation (= séparation GR et plasma), on utilise une centrifugeuse. En cas d'inflammation, la vitesse naturelle de sédimentation du sang est augmentée. Le contact du sang qui s'échappe du vaisseau et rencontre des substances négatives (notamment l'air), déclanché le phénomène de coagulation. La présence de Ca2+ permet aussi la coagulation : c'est pourquoi les anticoagulants des tubes permettent de complexer le calcium (notamment EDTA). [Composition du plasma : ] Enzymes et protéines (7%) = principalement les facteurs de coagulation et Ac [Composants cellulaires du sang : ] On peut reconnaître les différentes cellules par **coloration May-grunwald et Giemsa**. Cette coloration repose sur l'action combinée de 2 colorants neutres (= acides et basiques à la fois). Ces deux colorants sont en solution sous forme inactive. Lors de l\'addition d\'eau, les colorants précipitent et se fixent sélectivement sur les constituants cellulaires. Les cellules ne se colorent pas de la même manière selon l'attraction acide base de la cellule. Il y a donc coloration de différentes zones par le colorant : - - - Résultats : - GR : éosinophile/ acidophile - Plaquette : noyaux sont basophiles - PN : est éosinophile, basophile et neutrophile selon le type de cellule On peut aussi les différencier par : - Marquage enzymatique (= enzymes biologiques) mais ça ne fonctionne qu'en faible quantité. - Facteurs de coagulation ou anticorps mais la plus grande part est souvent retrouvée au niveau plasmatique Le sérum contient les mêmes éléments que le plasma à l'exception du fibrinogène et des facteurs de la coagulation (protéines plasmatiques). En effet la fibrine, qui est la dernière molécule formée par le processus de coagulation, est formée grâce aux facteurs de coagulation : il ne peut pas y avoir l'un sans l'autre. Quand on fait une « sérologie », on fait une recherche de protéines. II. [Hémogramme (NFS)] = analyse quantitative des éléments figurés du sang + étude morphologique (qualitative) des cellules sanguines. Prélèvement sur sang veineux (adulte) ou capillaire (enfant sur doigt ou talon), sur anticoagulant Rôle : orientation diagnostic + suivi évolution maladie. Les paramètres mesurés sont interdépendants. [Liste des analyses = mesures réalisées : ] - Lignée rouge (= globules rouges + leurs paramètres) : - Taux d'hémoglobine = concentration massique en g/L. - Hématocrite = volume occupé par l'ensemble des GR dans un volume de sang donnée. Sans unité - Numération des érythrocytes (ou hématies ou normocytes/ normoblastes) - Calcul des constantes érythrocytaires : volume globulaire moyen (VGM), concentration moyenne en hémoglobine dans chaque GR (CMH) et taux moyen en hémoglobine (gramme moyen par globule rouge) (TMH) = concentration massique - Récemment : numération des reticulocytes (= les globules rouges jeunes, depuis 24 à 48h dans le sang) - Lignée blanche (= globules blancs/ leucocytes + leurs précurseurs dans la moelle) : - Numération (= mesure du nombre d'éléments par unité de volume L-1) - Formule leucocytaire = pourcentage respectif de chaque type de GB (5) - Numération plaquettaire (thrombocytes) = donne la capacité de coagulation de la patiente Thrombus = caillot fait à partir de plaquettes Hémoglobine = protéine contenue dans les hématies / !\\ On parle d'anémie si TMH \< minimum valeur de référence (VR). En effet, cette valeur est celle à partir de laquelle c'est dangereux pour la personne. [Notions de valeurs de référence (= valeurs « normales » ≠ de non pathologique) ] = limites rencontrées dans la population. Leur représentation graphique, qui représente la distribution d'un paramètre, se fait sous la forme d'une courbe en cloche (cf loi normale/ de Gauss). On prend le min et le max des résultats de 95% de la population non pathologique pour trouver les valeurs de référence. Entre ces 2 valeurs = intervalle de réf encadré par 2 limites de référence : - 5% de la pop non pathologique sort de ces valeurs : si je suis dedans, il faut peut être s'inquiéter mais ne signifie pas nécessairement qu'il y a pathologie - Valeurs de réf toujours indiquées sur la feuille de résultats. [Structure des globules rouges :] **= disque biconcave anucléé chez l'homme qui est quasi saturé en hémoglobine (Hg).** Cette cellule a une forme de « diabolo » car elle se débarrasse de son noyau une fois dans le sang (= cellule anucléée). Cela permet de laisser plus de place à l'hémoglobine qui transporte l'oxygène (= rôle principal des GR). Ils sont au **maximum possible de la concentration en hémoglobine dans la cellule** : même pathologiquement, il est impossible d'être \> à la valeur max. Ils sont biconcaves car donne des **avantages physiologiques**, notamment le cycle de production/ destruction avec capacité de recyclage qui leur permet de ne pas rester coincé dans les capillaires qui sont très étroits. Durée de vie = 120j environ [Les globules blancs : comment les reconnaître ? ] Granulocytes (polynucléaires) = neutrophiles, éosinophiles et basophiles Mononucléaires = le reste = monocytes et lymphocytes Polynucléaires neutrophiles :  Polynucléaires neutrophiles : Basophiles : grosses granulations au point qu'on ne devine parfois plus le noyau Lymphocytes : bcp de cytoplasme (+il est grand, + de cytoplasme) et gros noyau :  Monocytes : les + grands, noyau en fer à cheval, vacuoles [Explication des formules leucocytaires] : Elle permet de calculer le pourcentage de chacune des variétés de GB pour une numération de leucocytes égale à 8G/L. Signification des variations : - Augmentation des éosinophiles : problème d'allergies ou d'infection parasitaire (ex vers) - Augmentation des basophiles : peut être rhume de base ou rhume des foins - Augmentation des lymphocyte : infection virale ou bactérienne Mais un paramètre seul ne veut rien dire : il faut faire une numération relative de chaque catégorie pour les comparer. III. [Érythrocytométrie] : Cette méthode consiste à mettre les cellules en suspension dans un flux de liquide et à les faire passer à travers un faisceau laser. C'est une technique d\'analyse et de tri de cellules ou de particules individuelles sur la base de leurs propriétés physiques et chimiques. = calcul de - Volume globulaire moyen (VGM) = volume de chaque globule rouge. Exprimé en litres de GR/ L de sang - Concentration corpusculaire (dans chaque GR) moyenne en Hg. Elle est donnée par litre de sang et ne peut jamais dépasser la valeur de référence. - Teneur corpusculaire moyenne en Hg 1. [Les mesures traditionnelles sont ] a. [ Hématocrite] = volume occupé par les globules rouges dans un volume de sang déterminé. Il se mesure après décantation spontanée ou accélérée (centrifugation) du sang (anti-coagulé) en : - Une phase supérieure et jaunâtre : plasmatique - Une phase inférieure et rouge : érythrocytaire - Une interphase petite et blanchâtre : leucocytaire et plaquettaire Formule : S'exprime en pourcentage : sans unité (vol/vol) b. [Concentration massique en hémoglobine (dosage Hg)] Hémoglobine : Molécule hétéroprotéique à structure quaternaire tétramérique : 4 chaînes de globine (identiques 2 à 2) associées chacune à une molécule d'hème par liaison du fer à des résidus d'histidines. contenue à saturation dans l'hématie normale responsable du transport des gaz (en particulier le dioxygène) par fixation entre le fer (Fe2+) de l'hème et la chaîne protéique. Le fer est capable de lier l'oxygène. Molécule oxydable en méthémoglobine (Fe3+) instable et non fonctionnelle 1 globine = une sous unité (SU) Les globines sont identiques 2 à 2 (α2β2) chez les adultes, c'est l'HbA (hémoglobine adulte). Il y a une beaucoup plus faible proportion d' HBA2 (= α2δ2) Le sucre modifie l'hémoglobine circulante, en faisant de l'hémoglobine glycée = HbAC (=HbA1). Elle est imprégnée par les sucres. On peut suivre son évolution sur les ¾ mois qui précèdent un diabète. Au cours du développement fœtal, il y a 2 autres hémoglobines : - 1^er^ mois de la période embryonnaire, avant que le placenta ne soit fonctionnel (α2ζ2) - Hémoglobine fœtale, HbF (= α2γ2), qui diminue vers la fin de la grossesse pour récupérer des chaînes β. Des anomalies peuvent exister et mener à des maladies, les α peuvent compenser pour les β mais pas l'inverse. [Affinité pour l'O2] Affinité chimique = prévision du sens d'évolution d'une réaction chimique A + B C + D. On a besoin de favoriser la liaison ou libérer l'O2. Les différentes hémoglobines ont des affinités ≠ pour l'oxygène. L'hémoglobine est une protéine allostérique c'est-à-dire que l'affinité de chaque su pour l'oxygène est modulée par la présence déjà oxygénée ou pas. Cela est possible par encombrement stérique : la molécule d'oxygène modifie la forme des hèles une fois qu'elle entre, et permet que les prochaines molécules entrent plus facilement. D'autres molécules entrent en jeu, pour permettre ou non l'oxygénation. La fonction de l'hémoglobine est le transport d'O2. L'affinité de chaque SU pour 1 molécule d'O2 va être modulée par la présence d'1 SU déjà oxygénée : la fixation de la première est difficile, 2^e^ un peu + facile, 3^e^ facile et 4^e^ pratiquement automatique. Courbe d'affinité de l'Hg pour l'O2 : elle est en S (sigmoïde) Elle augmente de 25% car Hg = 4 molécules. P50 = pression partielle en O2 pour une saturation à 50%. On regarde la pression en oxygène nécessaire pour saturer à 50%. Représente l'affinité précise de l'hémoglobine pour l'oxygène. L'affinité est modifiée par des changements de température, notamment en cas d'inflammation. Le traitement peut être tératogène. Le pH modifie aussi l'affinité. Le sang a normalement une forme de neutralité (à peine plus basique que l'eau), mais peut changer à cause de certains paramètres, notamment en cas de diabète mal équilibré. Modification de pH rend l'équilibre moins efficace et est donc tératogène. [Interprétation :] - Résultat inférieur aux valeurs seuils = anémie. Elle est souvent accompagnée d'une modification de la numération des globules rouges et de l'hématocrite - Résultat supérieur aux valeurs de réf = polyglobulie probable (à confirmer par un hématocrite et une numération érythrocytaire élevée). Elle est rapport à la saturation : on ne peut pas mettre + dans un GR que ce que l'hydratation permet. La pression atmosphérique en montagne fait augmenter le nb de GR : c'est dangereux parce que ça augmente la viscosité du sang, ce qui peut amener à des caillots. c. [Taux de globules rouges (numération)] Classement des éléments à mesure de l'identification, sur 200 éléments. Établissement d'un pourcentage et des valeurs absolues. Seule, la numération ne veut rien dire, mais avec la formule leucocytaire permet une numération relative de chaque globule blanc. Si augmentation de certains paramètres (et diminution d'autres), permet de savoir quel type d'infection il y a.