Immuno-Hématologie PDF (By Fouad Akhelij)

Immuno – Hématologie Fait par : Fouad Akhelij Introduction : -Le système ABO est organisé en plusieurs groupes : +Grp A +Grp B +Grp AB +Grp O -Actuellement on ait à 36 systèmes, chaque système est connu par un grp sanguin, ils se trouvent au niveau de...

Immuno – Hématologie Fait par : Fouad Akhelij Introduction : -Le système ABO est organisé en plusieurs groupes : +Grp A +Grp B +Grp AB +Grp O -Actuellement on ait à 36 systèmes, chaque système est connu par un grp sanguin, ils se trouvent au niveau de la membrane plasmique des érythrocytes -Le système RH (Rhésus) comporte 52 antigènes -Dans les 36 systèmes il y’a 350 molécules différentes. Parmi ces 350 molécules, 100 sont des molécules immunogène , et 10 sont fatales -Il y’a trois types d’immunisation : +L’Allo-immunisation +L’auto-immunisation : c’est une autodestruction de l’organisme (exemple : le diabète) +L’immunisation hétéro-espèce QE : Le système ABO est un système ubiquitaire, càd qui existe partout I-Étude des trois premiers système : 1-Le 1er système : Le système ABO -Le système ABO est un système qui existe au niveau du chromosome 9 , comporte 2 gènes : Le gène A et B -Dans un seul chromosome 9 on trouve un locus occupé par un gène, ce gène peut avoir deux formes alléliques -Un groupe sanguin O est définit par 0 gène A et 0 gène B (absence de gène A et B dans les deux chromosomes 9) -Sur les chromosomes 9 des patients O, on constate la présence d’une surexpression du gène de ADAMTS 13 -L’ADAMTS 13 est une enzyme qui « éduque » le facteur de Von Willebrand , L’ADAMTS 13 est un polymère très hétérogènes -Il y’a quatres formes du facteur Von Willebrand :.Von Willebrand plasmatique.Von Willebrand plaquettaire (se trouve dans les granules Alpha plaquettaire).Von Willebrand endothéliale.Von Willebrand sous endothéliale -Que fait L’ADAMTS 13 ? Il fait la coiffe , il réduit la taille du Von Willebrand Remarques : -Á la suite d’une brèche vasculaire, le Von Willebrand sous endothéliale se fixe à la plaquette circulante → déclenchement de l’hémostase primaire -Le Von Willebrand transporte le facteur 8 -Une personne du groupe A est définit par la présence de l’antigène A sur le globule rouge et l’antigène anti B dans le plasma 2-Le 2ème système : Le système H -Le système H existe sur les chromosomes 19 , c’est un système géno-induit , il y’a un gène par chromosome, c’est le gène H Remarques : -L’édification (l’acquisition) des groupes sanguins requiert obligatoirement le fonctionnement phénotypique (antigénique) du système H -Quelqu’un du groupe A sur le plan génétique, a au moins un gène A sur l’un des chromosomes 9, ce n’est pas suffisant, il doit faire fonctionner le système H 3-Le 3ème système : Le système RH Le système RH est définit par deux gènes en tandem (l’un à côté de l’autre) sur un chromosome 1. Ces deux gènes sont le gène D et le gène CE Le système RH et système exclusivement érythrocytaire -Pour le système RH, l’antigène est une protéine, c’est une protéine de la structure membranaire II-L’édifiaction antigénique : (antigène H et A) -L’antigène est édifié de la sorte : Le gène H se traduit en protéine H , cette protéine s’appelle la fucosyltransférase (FUT 1), cette protéine transfert le fucose sur une substance matricielle érythrocytaire et forme l’antigène H -La spécificité antigénique du gène H : la présence du fucose, donc l’antigène H est un ose -Le gène A se traduit en protéine A qui s’appelle la N-acétyl Galactosamyl transférase , qui transfert le N-acétyl galactosamine sur l’antigène H pour former l’antigène A Remarques : -L’édification antigénique de l’antigène H requiert l’édification au préalable du gène H -Le groupe O sanguin n’a pas de gène A et B → absence d’antigènes A et B, cependant il y’a présence de l’antigène H -Le phénotype Bombay : -On peut avoir dans certaines situations le plus souvent constitutionnelle : le cas du phénotype Bombay, et dans certains cas acquises dues aux hémopathies malignes : le cas du phénotype pseudo-Bombay -Les phénotypes Bombay peut être génétiquement A et B , mais ils n’ont pas de groupe sanguin dans le système ABO (présence de gène A et B, mais absence de la synthèse des antigènes A et B) -Un phénotype Bombay est définit par l’absence du gène H et absence d’antigène H et de présence de l’antigène anti H -La définition du système ABO : Un système de groupe ABO est définit par deux choses : +La présence ou l’absence d’un antigène érythrocytaire, ces antigènes sont A ou/et B +La présence ou l’absence d’anticorps naturels au niveau du plasma : ce sont des anticorps antinomiques Remarques : QE : les anticorps naturels sont des immunoglobulines N qui ne traverse pas la lumière placentaire.Le statut des anticorps naturels anti A anti B n’est requis officiellement qu’à l’âge de 6 mois après la naissance.Lors d’une grossesse incompatible pour le système ABO (exemple : maman O, fœtus A), la maman va s’immuniser en produisant des anticorps anti A immun de type IGG, qui traverse la barrière placentaire.L’allo-immunisation par la grossesse de la maman dans le système ABO n’est significatif que dans 2% des grossesses (98% des grossesses se déroule sans problème) -La définition du système Rh -La définition du système érythrocytaire de groupe RH requiert un seul volet (à 2 aspects) : +1er aspect : présence ou absence d’antigène D +2ème aspect : présence sur chaque chromosome 1, d’un gène CE avec possibilité de deux allèles antithétiques -Le gène CE code pour deux protéines -4 forme alléliques de ce gène peuvent être présent chez cette individu :. La 1ère forme allélique : CE. La 2ème forme allélique : ce. La 3ème forme allélique : cE. la 4ème forme allélique : Ce Remarques :.Tous ces allèles sont codominants.Définition de « antithétique » : Sur un même chromosome 1 on doit avoir obligatoirement soit C ou c, et soit E ou e sur le même gène.Les 4 protéines C, E, c et e peuvent s’exprimer chez le même patient 1er exemple : une personne qui a uniquement deux protéines c et e, cette personne a un gène ce sur les deux chromosomes 1 (les deux chromosomes 1 sont homologues) 2ème exemple : une personne qui a les quatres protéines C, E, c et e. Cette personne peut avoir soit les gènes Ce, cE soit CE, ce -Le cas particulier du RH partiel : «D partiel » -C’est un antigène D amputé de quelques domaines (Dans le cas normal, un antigène D a 12 domaines) -Pour la reconnaissance du RH partiel, on doit faire un génotypage de la protéine D -Tout anticorps dans le système RH est un anticorps immun -Tous les anticorps immuns sont irréguliers -Le seul anticorps naturel irrégulier est l’anticorps anti Lewis III-Les tests immuno-hématologiques érythrocytaires :. Groupage et phénotypage érythrocytaire. Coombs direct Recherche d’agglutinines irrégulières. Épreuve de compatibilité érythrocytaire. Test ultime au lit du maladen 1-Le groupage et le phénotypage : a-Le groupage -Le groupage standard (ou AB0 Rh) Définition -Le groupage est un act physiologique d’identification du groupe sanguin QE : l’âge de prélèvement doit être daté de moins de 8 jours À 4°C dans des conditions respectueuses -Les anticoagulants utilisé : EDTA Remarques : -Un sérum = plasma moins tous les facteurs consommer lors de l’hémostase -Une personne ayant le groupe :. A1 a 0 antigène H sur les globules rouges : cette personne a convertit tout les antigènes H en antigène A. A2 a convertit partiellement les antigènes H en antigène A -Le groupage standard consiste à déterminer de manière indissociable les groupes : AB0 et RhD (Rh1) Indications :. Sécuriser une transfusion. Sécuriser une greffe. Sécuriser une femme enceinte et la descendance Principe : Le principe du groupage standard (groupage AB0 ,RhD) se fait sur un sang anticoagulé et centrifugé afin d’isoler les globules rouges du plasma. Il consiste en la réalisation concomitante (en même temps) des épreuves globulaires et plasmatiques pour le groupage AB0 et de l’épreuve globulaire pour le groupage du système Rh Remarque : Pour le cas particulier du nouveau né et du nourisson moins de 6 mois, le groupage AB0 ne requiert que l’épreuve globulaire -Pour le groupage AB0 Rh, le constat réactionnel sera révéler par des réactions d’agglutination Agglutination signifie une réaction antigène anticorps de même type, exemple : un anticorps anti A réagit avec un antigène A -La technique globulaire (ou épreuve globulaire) est une technique qui se fait sur les globules rouges du patient à grouper (à tester). Pour la technique globulaire du système AB0 : Technique de Beth Vincent, on utilise des réactifs appelé sérums test :. Anti A. Anti B. Anti AB Ce sont des anticorps monoclonaux (monoclonal : reconnait un seul épitope de l’antigène) Ils doivent réagir chacun avec un échantillon érythrocytaire du patient (un sérum test par échantillon) -La technique plasmatique AB0, aussi appelé technique de Simonin, utilise d’autres réactifs, ce sont les globules rouges test :. Hématies A. Hématies B. Hématies AB L’épreuve plasmatique AB0 requiert une réaction entre le plasma du patient et avec chacun des hématies test Remarque : La technique de Beth Vincent permet de discriminer (déterminer) les antigènes, alors que la technique Simonin permet de discriminer les anticorps antinomiques présents dans le plasma -Le groupage D -Un groupage D requiert une épreuve globulaire avec des réactifs anti D et une épreuve témoin qui doit être parfaitement négative L’anti D : c’est un réactif monoclonal. S’il y’a présence d’agglutination : présence de l’antigène D → Rh +. S’il y’a absence d’agglutination : absence de l’antigène D → Rh – b-phénotypage Rh-K : L’analyse des antigènes C, E, c, e et Kell suivent les mêmes principes en se limitant à l’étude de la réactivité des hématies par deux anticorps anti-C, anti-E, anti-c, anti-e, et anti-Kell différents. -Les produits sanguins labiles -Les produits sanguins labiles (fragiles) qu’on appelle PSL sont préparées à partir de la séparation totale faite sur le sang d’un donneur -Les produits sanguins labiles PSL sont :. Le culot globulaire (le concentré érythrocytaire). Le concentré plaquettaire. Le plasma frais congelé Remarque : -Le groupe O est un donneur universel, cependant il doit donner uniquement le culot globulaire (les globules rouges uniquement) en séparant les globules rouges du plasma. Car le plasma d’un groupe d’un groupe O contient des antigènes anti A et anti B 2-Test de Coombs direct (ou test direct de l’antiglobuline TDA) Il consiste à révéler une sensibilisation éventuelle des hématies du patient Le réactif de ce test est une immunoglobuline (la gamma globuline), elle est d’origine animale, permet la révélation des hématies sensibilisés par des immunoglobulines humaines Le réactif de Coombs est un révélateur : permet la révélation non agglutinante de la sensibilisation des globules rouges 3-Le recherche d’agglutinines irrégulières RAI et épreuve directe de compatibilité au laboratoire D’après le prof ils représentent 2 à 3 QE Recherche d’agglutinines Épreuve directe de irrégulières compatibilité au laboratoire -La RAI permet de sécuriser un -Le test (ou épreuve) directe de act de transfusion chez un compatibilité au laboratoire ce patient ou d’une femme fait pour la qualification de la enceinte etc…, pour but de ne poche ou des poches pas lui donner un ou plusieurs érythrocytaire à transfuser antigènes dont l’anticorps ou les -L’épreuve de compatibilité au anticorps correspondant laboratoire consiste à la peuvent être présents chez recherche des anticorps l’individu irréguliers potentiellement -Le RAI dépistage d’utiliser un présents chez le receveur lors panel de 2 à 3 globules rouges de la qualification de la poche afin de discriminer la présence érythrocytaire à transfuser ou l’absence d’anticorps Principe : irréguliers. Ces hématies -Dans un tube à hémolyse, on utilisées sont des hématies de prend une goutte de sang à groupe O transfuser, on lui ajoute une -La RAI identification est utilisé goutte du plasma du receveur lorsque la RAI dépistage est et on ajoute le réactif de positive. Cette RAI identification coombs requiert l’utilisation de 8 à 10 À titre indicatif : globules rouges. Elle permet de (Le réactif de Coombs peut être déterminer la spécificité de remplacer dans la RAI et dans l’anticorps ou des anticorps l’épreuve directe de présents compatibilité au laboratoire par l’utilisation d’enzymes : la papaïne et la brimonidine -Une réaction négative dans l’épreuve de compatibilité au  laboratoire est constatée par absence d’agglutination qui autorise la dispensation de cette poche , jugée compatible 4-Le contrôle ultime au lit du patient : Il consiste à sécuriser l’act transfusionnelle en s’assurant que les poches à transfuser sont compatibles dans le système AB0 au groupe sanguin du receveur