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This presentation covers the fundamentals of spectrophotometry, including principles, methodologies, and instrumentation. It details how spectrophotometry works, its applications in quantifying chemical species, the types of measurements used, and provides practical application instructions.

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04/01/2025 ESPECTROFOTOMETRIA Profa. Amanda de Castro Amorim Serpa Brandão 1 Espectrofotometria A espectrofotometria é uma das técnicas analíticas mais utilizadas para determinações quantitativas de espécies químic...

04/01/2025 ESPECTROFOTOMETRIA Profa. Amanda de Castro Amorim Serpa Brandão 1 Espectrofotometria A espectrofotometria é uma das técnicas analíticas mais utilizadas para determinações quantitativas de espécies químicas. Instrumentação relativamente simples e de baixo custo devido o grande número de aplicações desenvolvidas. 2 1 04/01/2025 Espectrofotometria Método de análise óptico baseado em medidas de absorção de radiação eletromagnética. 3 Espectrofotometria Esta técnica se baseia na medida da absorção de radiação eletromagnética nas regiões visível e ultravioleta por espécies químicas (moléculas ou íons) em solução. 4 2 04/01/2025 ESPECTROFOTOMETRIA O fundamento da técnica é a interação de uma radiação eletromagnética e a matéria constituinte da amostra. A energia incidente pode ser refletida, transmitida ou absorvida. 5 ESPECTROFOTOMETRIA Quando a luz atravessa uma substância, parte da energia é absorvida – absorvância. 6 3 04/01/2025 ESPECTROFOTOMETRIA A cor das substâncias se deve a absorção de certos comprimentos de ondas da luz branca que incide sobre elas, deixando transmitir aos nossos olhos apenas aqueles comprimentos de ondas não absorvidos – transmitância. 7 ESPECTROFOTOMETRIA O espectrofotômetro é um instrumento que permite comparar a radiação absorvida ou transmitida por uma solução que contém uma quantidade desconhecida de soluto. 8 4 04/01/2025 ESPECTROFOTOMETRIA Luz UV (180 a 400 nm) - Lâmpada de gás hidrogênio - Mercúrio Luz Visível (400 a 800 nm) -Tungstênio 9 ESPECTROFOTOMETRIA Os espectrômetros compreendem uma fonte de energia radiante, um sistema colimador (fenda, lentes...), um local destinado à amostra, um sistema monocromador e um sistema detector. 10 5 04/01/2025 EQUIPAMENTOS Os equipamentos para medidas espectrofotométricas são denominados espectrofotômetros e várias configurações são disponíveis comercialmente. 11 O espectrofotômetro UV-Vísivel Os espectrofotômetros são instrumentos de análise que permitem: - Selecionar o comprimento de onda (lâmbda) da radiação adequado à análise de um determinado componente. - Medir a intensidade do feixe emergente que corresponde a um determinado feixe incidente, convertendo o sinal recebido no detector em medida de absorbância (ou absorvância) para o comprimento de onda da análise. - Determinar a concentração de uma espécie em solução a partir do gráfico da variação de absorbância (ou transmitância) em função da concentração de várias soluções-padrão. 12 6 04/01/2025 Espectrofotômetro UV-Vísivel 13 Como fazer? 1. Utiliza-se a cubeta contendo o branco, totalmente límpida a fim de diminuir ao máximo o erro causado por partículas em suspensão. 14 7 04/01/2025 Como fazer? 2. A cubeta contendo o branco é colocada no equipamento e sua linha de base coletada, para então seguir com a leitura das amostras. 15 Como fazer? 2. A cubeta contendo o branco é colocada no equipamento e sua linha de base coletada, para então seguir com a leitura das amostras. 16 8 04/01/2025 Como fazer? 3. As amostras devem ser colocadas na cubeta, no comprimento de onda a ser analisado, e a absorção então medida. 17 9

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