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Questions and Answers
Qual é a característica fundamental do solvente utilizado na GC em relação aos analitos?
Qual é a característica fundamental do solvente utilizado na GC em relação aos analitos?
Qual detector é mais comum na HPLC e por que é utilizado?
Qual detector é mais comum na HPLC e por que é utilizado?
Qual das seguintes afirmações sobre a HPLC é verdadeira?
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No contexto da GC, qual é a função principal da fase móvel?
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Como a sensibilidade dos detectores na HPLC é geralmente descrita?
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Qual é a principal diferença entre um sistema de bomba binária e um sistema de bomba quaternária em HPLC?
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O que caracteriza um sistema de bomba binária em HPLC?
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Qual das opções abaixo é verdadeira sobre a mistura de solventes em HPLC?
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Qual é um benefício do uso de um sistema de bomba quaternária em relação ao sistema de bomba binária?
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Qual desafio pode ser associado a um sistema de bomba binária?
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Em um sistema HPLC, qual é uma característica das bombas de baixa pressão?
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O que é um resultado direto da alta pressão em sistemas HPLC?
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Qual é uma desvantagem do sistema de bomba quaternária?
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Qual a ordem correta de aumento das forças de adsorção (k) em cromatografia de fase normal?
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Qual dessas interações não é utilizada em cromatografia de fase normal?
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Como a polaridade de um grupo funcional influencia o comportamento na cromatografia de fase normal?
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Qual dos seguintes compostos estaria associado a uma maior retenção em cromatografia de fase normal?
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Na cromatografia de fase normal, a separação de moléculas idênticas é possível com base em:
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Qual dessas afirmações sobre a eluição de compostos polares e apolares na cromatografia de fase normal é verdadeira?
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Qual dos seguintes grupos funcionais apresenta menor força de interação em cromatografia de fase normal?
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Qual é a principal influência da taxa de fluxo na eficiência da coluna de HPLC?
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Qual é a característica fundamental das colunas com partículas pequenas?
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O que ocorre com a retenção de um composto quando a sua estrutura possui uma maior esterificação?
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Qual das seguintes fases estacionárias é considerada hidrofóbica?
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Qual é a principal diferença entre partículas macroporosas e microporosas?
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A que se refere a 'fase ligada' nas colunas de sílica?
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Qual das afirmações sobre colunas de HPLC é verdadeira?
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Qual é a relação entre a cadeia de carbono de uma molécula e sua retenção na cromatografia líquida de fase reversa?
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Qual é a principal diferença entre uma fase estacionária C18 modificada convencional e uma fase polar-encapsulada?
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Qual é a função de um núcleo inerte nas colunas de embalagem pelicular?
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Qual dos seguintes tipos de revestimento tem maior variabilidade de tamanho de partícula e poro?
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Qual dos seguintes compostos é eluído mais rapidamente na cromatografia líquida de fase reversa?
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Qual descrição melhor se aplica à fase estacionária de sílica modificada C18?
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Qual das seguintes afirmações sobre a eluição em cromatografia líquida de fase reversa está correta?
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O que indica um alto índice de carga de carbono em uma coluna de cromatografia líquida de fase reversa?
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O que acontece quando grupos polares são introduzidos na fase estacionária?
O que acontece quando grupos polares são introduzidos na fase estacionária?
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Qual dos seguintes tipos de interação é predominantemente responsável pela retenção na cromatografia líquida de fase reversa?
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Qual é a principal característica das fases de cromatografia normal?
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Quais compostos são mais adequados para cromatografia em fase reversa?
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O que define a cromatografia de troca iônica?
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Quais são utilizados em cromatografia de exclusão por tamanho?
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Qual é a composição típica da fase móvel em cromatografia de fase reversa?
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Quais são os modos de separação disponíveis no HPLC?
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Qual é a configuração correta dos compostos em um sistema HPLC?
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Qual seria um exemplo de modificação de fase estacionária para HPLC?
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Quais características são essenciais para a fase estacionária em HPLC?
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Study Notes
HPLC Technique Overview
- HPLC stands for High Performance Liquid Chromatography
- It's a separation technique used in analytical chemistry
- The technique involves separating different components of a mixture
HPLC System Components
- High pressure pumps: Deliver the mobile phase at high pressure
- Injector: Introduces the sample into the system
- Column: Contains the stationary phase, where separation occurs
- Detector: Measures and identifies the separated components
- Mobile phase reservoir: Holds the solvent for the mobile phase
- Degasser: Removes gas bubbles from the mobile phase
- Mixing chamber: Mixes the mobile phase components
- Oven (Optional): Maintains constant temperature for the column
HPLC Columns
- Stationary phase material can be silica or polymers
- Different types (e.g. C18, C8, phenyl) provide different separation capabilities
- Columns vary by length, diameter and particle size, impacting resolution and analysis time
HPLC Mobile Phases
- Often a mixture of water and organic solvents
- Solvent properties, like polarity, viscosity and boiling point, affect separation
- Examples include water, methanol, acetonitrile and others
HPLC Applications
- Widely used in various fields including chemical, pharmaceutical, environmental, bioscience and clinical analyses
- Suitable for a broad range of analyte types (e.g. amino acids, lipids, polymers)
- Used to quantify components within a mixture or identify unknowns
Elution Modes
- Isocratic elution uses a constant mobile phase composition during analysis
- Gradient elution uses a progressively changing mobile phase composition to improve separation of various analytes.
HPLC Gradient Systems
- Binary pump system uses two solvent reservoirs
- Quaternary pump system uses four solvent reservoirs
HPLC Injection
- Manual injection using a syringe
- Automated injection using an autosampler
HPLC System Columns and Stationary Phases
- Column type, length and diameter affect resolution and analysis time
- Different column characteristics enable selection of specific compounds to be separated
HPLC Column Selection Factors
- Separation efficiency, peak symmetry, column lifetime
- Stability of bonded phase, reproducibility, time, selectivity
HPLC Column Material Types
- Silica-based stationary phases
- Polymer-based stationary phases
- Other materials (e.g., bonded phase silica)
HPLC Stationary Phases
- C18, C8 (octadecyl and octadecylsilane) are common stationary phases
- Their chemical structure impacts separation choices
- The specific structure of the bonded phase influences the chromatographic behavior
Modes of HPLC Separation
- Normal-phase Liquid Chromatography (NPLC) : polar stationary phase, non-polar mobile phase. Separates polar/partially polar solutes
- Reversed-phase Liquid Chromatography (RPLC): non-polar stationary phase, polar mobile phase. Separates non-polar/partially non-polar solutes
- Hydrophilic Interaction Chromatography (HILIC): polar stationary phase, organic mobile phase. Separates highly polar compounds
HPLC Detectors
- UV-Vis detectors: Measures absorbance of UV/visible light
- Fluorescence detectors: Measure fluorescence emitted by compounds
- Refractive Index (RI) detectors: Measure differences in refractive index
- Conductivity detectors: Measure ions in the eluent
- Mass Spectrometry detectors: Identifies compounds based on mass-to-charge ratio.
HPLC Sample Treatment
- Filtration and solubilization for sample purity
- Extractions to improve analyte solubility
- Other sample prep methods may be necessary
HPLC Data Acquisition and Treatment
- Data collection methods, integration algorithms and data analysis techniques
- Software and hardware, calibration and validation methods
HPLC Applications
- Identification and quantification of various compounds, including drugs, pollutants, peptides, etc
- Many applications are in chemical, environmental, pharmaceutical and other scientific domains
- Preparation methods and considerations for various sample types
HPLC System Comparison to GC
- HPLC suitability based on sample volatility, polarity and thermal stability
- HPLC and GC differing detection methods and sample preparation requirements
- Optimal method selection based on experimental conditions.
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Description
Este quiz explora a técnica de Cromatografia Líquida de Alta Performance (HPLC), que é essencial na química analítica. Você aprenderá sobre os componentes do sistema HPLC, diferentes tipos de colunas e fases móveis, além de suas aplicações. Teste seu conhecimento sobre como a HPLC separa componentes de misturas.