Uso del Tampone Tris in Biologia Cellulare

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Questions and Answers

Qual è l'osmolarità normale del plasma?

  • 300 mOsm/L
  • 320 mOsm/L
  • 285 mOsm/L (correct)
  • 270 mOsm/L

Quale dei seguenti elettroliti è presente nel plasma?

  • Calcio (correct)
  • Zinco
  • Manganese
  • Ferro

Cosa determina principalmente l'osmolarità plasmatica?

  • Temperatura del plasma
  • Dimensione delle particelle
  • Concentrazione di urea e glucosio (correct)
  • Solubilità dei sali

Quale tra queste sostanze è considerata un non elettrolita nel plasma?

<p>Glucosio (B)</p> Signup and view all the answers

Cosa indica il fenomeno dell'effetto Tyndall nei liquidi biologici?

<p>Disposizione di particelle grandi disperse (D)</p> Signup and view all the answers

Qual è la pressione osmotica corrispondente all'osmolarità del plasma?

<p>8 atm (B)</p> Signup and view all the answers

Quale affermazione è vera riguardo alla composizione dei liquidi extracellulari?

<p>Hanno osmolarità totale simile al plasma (A)</p> Signup and view all the answers

Cosa possono essere considerati i liquidi biologici in termini di proprietà fisiche?

<p>Sospensioni colloidali (A)</p> Signup and view all the answers

Quale affermazione sui fibroblasti dopo 7 giorni dalla coltura è corretta?

<p>I fibroblasti sono migrati fuori e hanno aderito al recipiente di coltura. (D)</p> Signup and view all the answers

Qual è la funzione degli enzimi utilizzati nella disaggregazione enzimatica?

<p>Digerire lipoproteine e facilitare la separazione delle cellule. (C)</p> Signup and view all the answers

Quale tra i seguenti enzimi non è citato come esempio per la disaggregazione enzimatica?

<p>Lipasi (C)</p> Signup and view all the answers

Perché gli agenti chelanti del calcio come EDTA ed EGTA sono utilizzati nella digestione enzimatica?

<p>Per estrarre il calcio dal microambiente e favorire l'azione degli enzimi. (D)</p> Signup and view all the answers

Che tipo di cellule si presta meglio alla tecnica dell'espianto?

<p>Cellule muscolari e epiteliali (D)</p> Signup and view all the answers

Qual è un potenziale svantaggio della disaggregazione enzimatica?

<p>Può danneggiare le cellule del tessuto durante il processo. (C)</p> Signup and view all the answers

Quale caratteristica è vera per le cellule di fibroblasti all'inizio della loro coltura?

<p>Devono ancora abituarsi al nuovo microambiente di coltura. (D)</p> Signup and view all the answers

Qual è la convessità del nucleo delle cellule di fibroblasti?

<p>Mostra che le cellule sono in uno stato di monostrato. (B)</p> Signup and view all the answers

Qual è il range di pH in cui il tampone tris può essere utilizzato senza problemi?

<p>7,5-8,5 (D)</p> Signup and view all the answers

Per quale scopo il tampone tris non è adatto?

<p>Per la coltivazione di cellule vive (D)</p> Signup and view all the answers

Qual è il pKa del tampone Mes?

<p>Circa 6 (D)</p> Signup and view all the answers

Quale ione è fondamentale affinché gli enzimi che lavorano sugli acidi nucleici possano funzionare?

<p>Mg2+ (D)</p> Signup and view all the answers

Quale dei seguenti composti non è un esempio di tampone ampiamente utilizzato?

<p>Aminoacidi (C)</p> Signup and view all the answers

Quali sali vengono quasi sempre aggiunti per contribuire alla forza ionica e all'osmolarità?

<p>NaCl e KCl (D)</p> Signup and view all the answers

Qual è il peso molecolare del tampone tris?

<p>121 g/mol (B)</p> Signup and view all the answers

Per quale motivo si può voler sottrarre Mg2+ da una soluzione durante l'uso degli acidi nucleici?

<p>Per eliminare frazioni di enzimi indesiderati (C)</p> Signup and view all the answers

Qual è l'osmolarità fisiologica generalmente riconosciuta?

<p>280 mOsm/L (B)</p> Signup and view all the answers

Cosa permette una membrana semipermeabile in un sistema osmotico?

<p>Il passaggio di molecole e solvente in base alla loro dimensione (B)</p> Signup and view all the answers

Quale delle seguenti affermazioni meglio descrive il sacchetto utilizzato nei sistemi di dialisi?

<p>Permette il passaggio di soluti e solvente (B)</p> Signup and view all the answers

Perché le membrane da dialisi sono progettate per trattenere molecole con peso molecolare superiore a un certo valore?

<p>Per rimuovere piccole molecole indesiderate (B)</p> Signup and view all the answers

Qual è uno degli usi principali della dialisi in laboratorio?

<p>Rimuovere sali e altre piccole molecole da soluzioni (C)</p> Signup and view all the answers

Qual è la principale funzione dell'emodialisi?

<p>Filtrare il sangue in persone con reni incapaci di filtrare (B)</p> Signup and view all the answers

In che modo i sistemi di dialisi possono modificare la soluzione in cui è immerso un campione biologico?

<p>Separando le macromolecole dai sali e da altre piccole molecole (D)</p> Signup and view all the answers

Qual è la dimensione critica delle molecole rispetto alla permeabilità della membrana da dialisi?

<p>Molecole più piccole di 10000 dal peso molecolare possono passare (C)</p> Signup and view all the answers

Qual è una caratteristica distintiva delle linee cellulari continue?

<p>Possono duplicarsi indefinitamente. (C)</p> Signup and view all the answers

Cosa significa 'immortalizzazione' nel contesto delle cellule?

<p>Le cellule possono duplicarsi indefinitamente in coltura. (B)</p> Signup and view all the answers

Quale affermazione sulle cellule progenitrici del sangue è corretta?

<p>Mantengono il potenziale di generazione delle cellule adulte. (C)</p> Signup and view all the answers

Le linee cellulari trasformate si caratterizzano per:

<p>Essere in grado di indurre tumori. (B)</p> Signup and view all the answers

Che cosa determina la capacità delle cellule di manifestare modificazioni morfologiche?

<p>La pressione selettiva durante la coltivazione veloce. (D)</p> Signup and view all the answers

Quale delle seguenti è una caratteristica delle linee cellulari continue?

<p>Hanno comportamenti morfologici anomali nel tempo. (A)</p> Signup and view all the answers

Cosa implica la caratteristica 'dipendenza da fattori di crescita' nelle linee cellulari continue?

<p>Le cellule non possono proliferare senza nutrienti aggiuntivi. (D)</p> Signup and view all the answers

Qual è una bandiera rossa nell'interpretazione delle cellule trasformate?

<p>Presentano caratteristiche diverse dal tessuto originale. (A)</p> Signup and view all the answers

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Study Notes

Tampone Tris

  • Utilizzo in una gamma di pH tra 7,5 e 8,5, ideale per applicazioni comuni, ma non adatto per cellule vive.
  • Peso molecolare (PM) di 121 g/mol; può essere presente come tris base o tris cloruro.
  • Possibilità di formare diverse varianti come il tris borato e tris acetato.

Altri tamponi

  • Hepes: Ampiamente usato, buone caratteristiche di tolleranza per cellule.
  • Mes: pKa più basso, efficace per tamponi intorno al pH 6.
  • Pipes: Utilizzato per tamponi sotto pH 6.
  • Rappresentano generalmente tamponi stabili e costosi ma utili per pH nelle vicinanze di 7.

Composizione delle soluzioni biologiche

  • Importanza della forza ionica, solitamente aumentata con NaCl e KCl.
  • Magnesio (Mg²⁺) è essenziale per il funzionamento degli enzimi che lavorano sugli acidi nucleici.
  • Composti tiolici, come le cisteine, cruciali per l'attività delle proteine.

Osmolarità e pressione osmotica

  • Osmolarità plasmatica normale di circa 285 mOsm/L (intervallo 275-295 mOsm/L); corrisponde a circa 8 atm di pressione.
  • Derivata da molecole dissociate presenti nel plasma, inclusi elettroliti e non elettroliti.
  • Liquidi intra ed extracellulari devono mantenere un equilibrio osmotico per prevenire deformazioni cellulari.

Effetto Tyndall e dispersioni colloidali

  • Particelle di dimensioni fra 1-1000 nm creano dispersioni colloidali nei liquidi biologici.
  • Esempi pratici: nebbia → liquido disperso in un gas.

Dialisi e osmosi

  • Fenomeni osmotici in ambiente a membrana semipermeabile permettono il passaggio di soluti e solventi.
  • Sistemi di dialisi usati per rimuovere macromolecole; membrane con fori per molecole sotto 10.000 Da.

Tecniche cellulari

  • Tecnica di espianto per cellule adesive come fibroblasti; disaggregazione enzimatica più aggressiva può causare danni.
  • Utilizzo di vari enzimi per la digestione cellulare, come tripsina e collagenasi, e agenti chelanti come EDTA.

Linee cellulari continue

  • Cellule in vitro possono proliferare indefinitamente; subiscono trasformazioni e acquisiscono capacità di replicazione illimitata.
  • Linee continue differenziali in base alla capacità di mantenere caratteristiche morfologiche del tessuto di origine o diventare tumorigeniche.
  • Cellule trasformate subiscono modifiche morfologiche e funzionali diverse dal tessuto d'origine, spesso a causa di fattori ambientali selettivi.

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