T2: Lab Bio Molecular
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Questions and Answers

¿Cuál de los siguientes instrumentos es esencial para mantener reactivos a una temperatura constante en un laboratorio de biología molecular?

  • Congelador
  • Secuenciador de ADN
  • Baño termostático (correct)
  • Centrífuga

En un laboratorio de biología molecular, ¿qué instrumento se utiliza principalmente para la separación de muestras basadas en diferencias de densidad?

  • Centrífuga (correct)
  • Secuenciador de ADN
  • Baño termostático
  • Micropipeta

¿Cuál es la importancia principal de mantener una presión positiva en la sala de preparación de reactivos pre-PCR?

  • Facilitar la manipulación de los reactivos.
  • Evitar la contaminación de los reactivos con ADN externo. (correct)
  • Regular la temperatura de los reactivos.
  • Aumentar la eficiencia de la reacción PCR.

¿En qué sala del área pre-PCR se realiza la preparación inicial de la muestra para la extracción de ADN?

<p>Sala de extracción de ADN (D)</p> Signup and view all the answers

Si un investigador necesita medir y transferir con precisión volúmenes de líquido extremadamente pequeños, ¿qué instrumento debería utilizar?

<p>Micropipeta (B)</p> Signup and view all the answers

¿Cuál es el primer lugar que se visita en el laboratorio para realizar una PCR, según el protocolo descrito?

<p>La sala de extracción de ácidos nucleicos, para aislar el material genético. (A)</p> Signup and view all the answers

¿Cuál de los siguientes procesos se lleva a cabo en la sala de preparación de reactivos en un laboratorio de biología molecular?

<p>Preparación de las soluciones necesarias para la PCR (D)</p> Signup and view all the answers

¿Cuál es el propósito del uso de cabinas de bioseguridad en la sala de preparación de reactivos pre-PCR?

<p>Prevenir la contaminación cruzada de las muestras (A)</p> Signup and view all the answers

En el contexto de un laboratorio de biología molecular, ¿cuál es el propósito principal de la sala de electroforesis después de realizar una PCR?

<p>Visualizar y analizar los fragmentos de ADN amplificados durante la PCR. (D)</p> Signup and view all the answers

¿Cuál de las siguientes opciones describe mejor la importancia de tener instrumental preciso en la sala donde se realiza la PCR?

<p>Garantizar la exactitud y reproducibilidad de la amplificación del ADN. (C)</p> Signup and view all the answers

¿Cuál de los siguientes equipos es fundamental para determinar la secuencia exacta de nucleótidos en una molécula de ADN?

<p>Secuenciador de ADN (B)</p> Signup and view all the answers

Si un investigador olvida realizar la extracción de ácidos nucleicos antes de intentar una PCR, ¿cuál sería el resultado más probable?

<p>La PCR no funcionaría, ya que no habría ADN disponible para amplificar. (D)</p> Signup and view all the answers

¿Cuál es la razón principal para mantener las salas de extracción de ácidos nucleicos y PCR separadas en un laboratorio de biología molecular?

<p>Evitar la contaminación cruzada del ADN amplificado con el ADN original. (D)</p> Signup and view all the answers

¿Cuál de las siguientes NO es una práctica crucial para prevenir la contaminación cruzada en un laboratorio de biología molecular?

<p>Compartir el mismo juego de pipetas para la preparación de reactivos y la manipulación de productos de PCR amplificados. (B)</p> Signup and view all the answers

¿Qué función principal desempeña el termociclador en un laboratorio de biología molecular?

<p>Amplificar secuencias específicas de ADN mediante ciclos repetidos de temperatura. (B)</p> Signup and view all the answers

Un investigador está cuantificando la concentración de ADN en una muestra. ¿Qué instrumento de laboratorio sería más apropiado para esta tarea?

<p>Espectrofotómetro. (A)</p> Signup and view all the answers

¿Por qué es crucial separar físicamente las áreas pre-PCR y post-PCR en un laboratorio de biología molecular?

<p>Para evitar la contaminación de los reactivos y las muestras con ADN amplificado. (D)</p> Signup and view all the answers

¿Cuál de los siguientes equipos se utiliza principalmente para la esterilización de materiales y reactivos en un laboratorio de biología molecular?

<p>Autoclave. (D)</p> Signup and view all the answers

En un experimento de electroforesis en gel, ¿qué propiedad de las moléculas de ADN determina su velocidad de migración a través del gel?

<p>Su carga eléctrica y tamaño. (A)</p> Signup and view all the answers

Un técnico de laboratorio observa resultados inconsistentes en sus experimentos de PCR. Sospecha de contaminación. ¿Cuál de las siguientes acciones sería la MÁS apropiada para investigar la fuente de contaminación?

<p>Revisar y reforzar las prácticas de separación entre las áreas pre-PCR y post-PCR. (A)</p> Signup and view all the answers

¿Cuál es la principal diferencia entre un laboratorio de biología molecular y uno de citogenética, según el texto proporcionado?

<p>El laboratorio de biología molecular realiza la técnica de PCR, mientras que el de citogenética no. (C)</p> Signup and view all the answers

¿Por qué se recomienda que una sala de realización de PCR tenga presión negativa?

<p>Para asegurar que, en caso de fuga, los contaminantes permanezcan dentro de la sala, evitando la contaminación cruzada. (C)</p> Signup and view all the answers

¿Cuál es la principal función de la sala post-PCR o de análisis?

<p>Interpretar y analizar los resultados de la PCR, como la electroforesis en gel. (B)</p> Signup and view all the answers

¿Qué característica especial debería tener la sala post-PCR para optimizar la lectura de resultados?

<p>Un ambiente oscuro para mejorar la detección de señales luminiscentes en la electroforesis. (D)</p> Signup and view all the answers

¿Cuál es el propósito principal de la Reacción en Cadena de la Polimerasa (PCR) en un laboratorio de biología molecular?

<p>Amplificar el material genético para facilitar su análisis. (B)</p> Signup and view all the answers

¿Cuál de los siguientes equipos es indispensable para un laboratorio de biología molecular enfocado en la PCR?

<p>Termociclador. (D)</p> Signup and view all the answers

Además de la sala de PCR y la sala post-PCR, ¿qué otro elemento es crucial para mantener la asepsia en la técnica y evitar la dispersión de contaminantes?

<p>Cabinas de bioseguridad. (D)</p> Signup and view all the answers

¿Cómo debe ser el flujo de trabajo en un laboratorio de biología molecular, desde la recepción de las muestras hasta la interpretación de los resultados?

<p>Unidireccional, evitando la contaminación cruzada y asegurando la integridad de las muestras. (C)</p> Signup and view all the answers

En un laboratorio de biología molecular, ¿cuál es la razón principal para tener secciones bien diferenciadas antes y después de la PCR?

<p>Para minimizar el riesgo de contaminación del ADN amplificado con ADN no amplificado. (D)</p> Signup and view all the answers

En un laboratorio de biología molecular enfocado en PCR, ¿qué función cumple el documentador de geles?

<p>Visualizar y registrar imágenes de los geles de electroforesis. (D)</p> Signup and view all the answers

¿Cuál de los siguientes elementos es menos relevante para la correcta ejecución y análisis en un laboratorio de biología molecular enfocado en PCR?

<p>El registro detallado de las condiciones ambientales del laboratorio, como temperatura y humedad. (C)</p> Signup and view all the answers

¿Qué diferencia principal existe en el manejo de presión entre la sala pre-PCR y post-PCR?

<p>Ambas salas deben tener presión negativa para evitar contaminaciones cruzadas. (D)</p> Signup and view all the answers

¿Por qué es importante incluir un autoclave en el equipamiento básico de un laboratorio de biología molecular?

<p>Para esterilizar materiales y desechos contaminados, evitando la propagación de agentes biológicos. (A)</p> Signup and view all the answers

Si un laboratorio de biología molecular necesita identificar rápidamente un brote de Escherichia coli en una muestra de agua, ¿qué técnica basada en la PCR sería más adecuada?

<p>PCR cuantitativa (qPCR) para medir la carga bacteriana. (C)</p> Signup and view all the answers

Un investigador observa que sus resultados de PCR son inconsistentes, con amplificación en controles negativos. ¿Cuál de las siguientes acciones sería la menos efectiva para solucionar este problema?

<p>Aumentar la concentración de ADN molde en la reacción de PCR. (C)</p> Signup and view all the answers

¿Cuál de las siguientes NO es una medida de control de calidad esencial en un laboratorio de biología molecular que realiza pruebas de PCR?

<p>Asegurar que todo el personal del laboratorio tenga el mismo tipo de sangre. (C)</p> Signup and view all the answers

En el contexto de la gestión de la calidad en un laboratorio de biología molecular, ¿cómo influye la selección de reactivos de PCR de alta calidad en la precisión de los resultados?

<p>El uso de reactivos de calidad superior puede minimizar la amplificación inespecífica y mejorar la sensibilidad de la prueba. (C)</p> Signup and view all the answers

¿Cuál de las siguientes afirmaciones describe mejor el protocolo general para el almacenamiento de muestras de ADN y ARN purificados en un laboratorio de biología molecular?

<p>El ADN se almacena en neveras para uso en pocos días o en congeladores para usos posteriores, mientras que el ARN se almacena siempre en congeladores. (B)</p> Signup and view all the answers

En un laboratorio de biología molecular, tras la amplificación de ADN mediante PCR y la posterior electroforesis en gel, ¿qué técnica se emplea inmediatamente después para analizar los resultados?

<p>Visualización de los resultados de la electroforesis en gel. (A)</p> Signup and view all the answers

¿Por qué es esencial calibrar las micropipetas en un laboratorio de biología molecular, y cómo se lleva a cabo generalmente este proceso?

<p>Para garantizar la exactitud y precisión en la dispensación de líquidos; se realiza comparando las mediciones de volúmenes dispensados con patrones de referencia. (C)</p> Signup and view all the answers

Si un investigador necesita marcar una secuencia específica de ADN para su estudio, ¿cuál de las siguientes técnicas sería la más adecuada?

<p>Hibridación con sonda. (B)</p> Signup and view all the answers

En el proceso de calibración de micropipetas, ¿cuál es el propósito de tarar un recipiente en una balanza antes de añadir el agua destilada?

<p>Evitar errores debido a la masa del recipiente, obteniendo así una medición precisa del agua destilada. (B)</p> Signup and view all the answers

Un laboratorio ha amplificado una muestra de ADN mediante PCR y necesita separar los fragmentos de ADN según su tamaño. ¿Qué técnica debe emplearse?

<p>Electroforesis en gel. (B)</p> Signup and view all the answers

¿Cuál es la razón principal por la que los laboratorios deben adherirse a protocolos específicos de gestión de residuos al eliminar muestras almacenadas?

<p>Para cumplir con la legislación vigente y minimizar los riesgos ambientales y de salud. (C)</p> Signup and view all the answers

Considerando las técnicas básicas en un laboratorio de biología molecular, ¿cuál de las siguientes opciones representa el orden lógico de los pasos para analizar una muestra de ADN desde su obtención hasta la interpretación de resultados?

<p>Extracción de ADN → PCR → Electroforesis en gel → Visualización de resultados. (B)</p> Signup and view all the answers

Flashcards

Sección Pre-PCR

Sección donde se preparan reactivos, productos y se extrae el material genético de la muestra antes de la PCR.

Sección Post-PCR

Sección donde se realiza la PCR y se interpretan los resultados.

Termociclador

Alterna ciclos de temperatura para amplificar el ADN.

Electroforesis en gel

Separa moléculas según su carga y tamaño mediante un campo eléctrico.

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Cabina de bioseguridad

Aisla al personal y muestras de contaminantes.

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Espectrofotómetro

Mide la cantidad de luz absorbida por una sustancia para determinar su concentración.

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Autoclave

Esteriliza materiales usando vapor a alta presión y temperatura.

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PCR

Técnica fundamental que distingue un laboratorio de biología molecular de uno de citogenética.

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¿Qué es un laboratorio de biología molecular?

Laboratorio dedicado al estudio de ácidos nucleicos, como el ADN, mediante técnicas de Biología Molecular.

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¿Qué es la PCR?

Reacción en Cadena de la Polimerasa; técnica para amplificar el material genético de una muestra.

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¿Cuál es el propósito de la PCR?

Amplificar el material genético de una muestra para hacerlo legible y permitir su análisis.

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¿Cómo debe ser el flujo de trabajo?

Debe ser unidireccional, desde la recepción de muestras hasta la interpretación de resultados.

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¿Cómo se dividen las secciones?

Una sección para los procedimientos previos a la PCR y otra para los procedimientos durante y posteriores a la PCR.

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¿Qué son las técnicas de Biología Molecular?

Técnicas que estudian los ácidos nucleicos, especialmente el ADN.

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¿Qué técnica marca la pauta en el laboratorio?

La PCR marca la organización y estructura del laboratorio, siendo esencial.

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¿Qué permite la PCR en microbiología?

Identificar microorganismos y células amplificando su material genético.

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Baño termostático

Mantiene el agua a una temperatura constante.

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Congelador

Congela muestras y productos para su conservación a largo plazo.

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Secuenciador de ADN

Determina la secuencia de nucleótidos en el ADN.

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Micropipeta

Maneja volúmenes de líquidos muy pequeños.

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Centrífuga

Separa muestras según su densidad a alta velocidad.

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Sala de Preparación de Reactivos

La primera sala en la sección pre-PCR, donde se preparan reactivos.

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Presión Positiva

Presión más alta dentro de la sala que afuera, para evitar contaminación.

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Sala de Extracción de ADN

Sala donde se recibe la muestra y se extrae el ADN.

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Presión negativa en laboratorios

Mantener una presión más baja en la sala que en el exterior para evitar la salida de contaminantes.

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Sala de realización de la PCR

Zona donde se lleva a cabo la PCR y se manipulan muestras genéticas.

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Sala post-PCR o de análisis

Sala para electroforesis y lectura de resultados de PCR.

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Equipos para electroforesis en gel

Equipo para separar moléculas por tamaño usando un campo eléctrico.

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Documentador de geles

Dispositivo para visualizar y registrar imágenes de geles después de la electroforesis.

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Cabina de bioseguridad o de flujo laminar

Espacio de trabajo que garantiza un ambiente estéril para manipular muestras.

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¿Qué ocurre en la sala de extracción de ácidos nucleicos?

Sala donde se extrae el material genético (ADN/ARN) de la muestra.

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¿Qué se hace en la sala de PCR?

Sala equipada para realizar la Reacción en Cadena de la Polimerasa, técnica para amplificar ADN.

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¿Qué se hace en la sala de electroforesis?

Sala donde se realiza la electroforesis para separar moléculas según su tamaño y carga.

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¿Qué es un PNT (Procedimiento Normalizado de Trabajo)?

Documento que detalla los pasos específicos para realizar una tarea en el laboratorio de forma estandarizada.

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¿Qué significa calibrar un instrumento?

Ajustar un instrumento de medición para que las lecturas sean precisas y exactas, comparándolo con un estándar conocido.

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¿Cómo se almacena el ADN?

Almacenar muestras de ADN purificado en frío (nevera para uso a corto plazo, congelador para uso posterior).

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¿Cómo se almacena el ARN?

Almacenar el ARN en congeladores debido a su inestabilidad.

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Extracción de ácidos nucleicos

Extraer ADN de las células.

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Técnicas de PCR

Amplificar (copiar muchas veces) el ADN de una muestra.

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Hibridación con sonda

Marcar regiones específicas del ADN para su estudio.

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Secuenciación del ADN

Determinar la secuencia exacta de nucleótidos en una molécula de ADN.

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Clonación del ADN

Insertar un fragmento de ADN en un vector para su replicación.

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Study Notes

  • Los laboratorios de biología molecular se dedican a técnicas que estudian los ácidos nucleicos, siendo la PCR la principal.
  • La PCR es una técnica que permite amplificar el material genético de una muestra para su análisis.

Instalaciones

  • El flujo de trabajo debe ser unidireccional, con dos secciones bien diferenciadas: pre-PCR y post-PCR.
  • La sección pre-PCR se lleva a cabo antes de realizar la PCR, preparando reactivos y extrayendo material genético.
  • La sección post-PCR comprende la realización de la PCR y la lectura de los resultados.
  • Es importante separar las zonas estériles o «limpias>> de las no estériles o «sucias» para evitar la contaminación de las muestras.

Equipo Básico de un Laboratorio de Biología Molecular I

  • Termociclador: alterna ciclos de temperatura en una muestra.
  • Electroforesis en gel: separa sustancias según carga y tamaño, dependiendo su desplazamiento de la carga eléctrica.
  • Cabina de bioseguridad: permite trabajar en condiciones de seguridad, aislando al personal y muestras de contaminantes.
  • Espectrofotómetro: estima la concentración de una sustancia mediante lecturas de absorbancia.
  • Autoclave: esteriliza empleando vapor.

Equipo Básico de un Laboratorio de Biología Molecular II

  • Baño termostático: mantiene agua a una temperatura regulable.
  • Congelador: congela muestras y productos.
  • Secuenciador de ADN: define la secuencia de nucleótidos de un ácido nucleico.
  • Micropipeta: permite manejar pequeños volúmenes, del orden de microlitros.
  • Centrífuga: separa muestras de diferente densidad mediante acción giratoria.

Salas pre-PCR

  • Se dividen en dos secciones: sala para preparación de reactivos y sala de extracción de ADN.
  • Sala para la preparación de reactivos: se preparan reactivos y productos, debe ser una zona limpia con ligera presión positiva y se debe trabajar en cabinas de bioseguridad. Esto evita la contaminación por gérmenes externos.
  • Sala de extracción de ADN: recibe y prepara la muestra para extraer ADN de las células. Es recomendable que tenga presión negativa.

Salas post-PCR

  • Se dividen en dos secciones: sala de realización de la PCR y sala post-PCR o de análisis.
  • Sala de realización de la PCR: se realiza la PCR, zona "sucia" con presión negativa para evitar contaminaciones cruzadas.
  • Sala post-PCR o de análisis: se realiza la electroforesis y lectura de geles, es una sala "sucia" con presión negativa e idealmente oscura.

Funciones

  • Las funciones del laboratorio consisten en apoyar a los médicos clínicos realizando pruebas de biología molecular y citogenética necesarias para el diagnóstico de la patología molecular.
  • Es importante recordar que la asepsia es muy importante cuando trabajamos con ADN, porque la más mínima contaminación nos ofrecerá resultados que no coinciden con el estado real de la muestra del paciente.

Recepción e Identificación de la Muestra

  • Las muestras deben seguir estrictos protocolos para minimizar errores.
  • La muestra debe estar bien etiquetada o identificada con los datos del paciente.
  • Se registra en un sistema de archivos y se le asigna un código.
  • Hay que comprobar los datos del paciente en la hoja de petición de laboratorio coinciden con los de la muestra.

Registro, Cultivo y Almacenamiento de la Muestra

  • El registro debe hacerse en una base de datos.
  • Se hacen alícuotas, dividiendo la muestra original en otras más pequeñas para su almacenamiento.
  • Las muestras se almacenan en un almacén con acceso restringido, clasificadas por categorías.
  • Las muestras se almacenarán durante un tiempo prudencial, según la legislación vigente.
  • El ADN debe almacenarse en frío, mientras que el ARN debe almacenarse en congeladores debido a su inestabilidad.

Técnicas Básicas que se Realizan en el Laboratorio

  • Técnicas de extracción de ácidos nucleicos: para extraer el ADN de las células.
  • Técnicas de PCR: amplificar el ADN de una muestra.
  • Técnicas de electroforesis en gel: para leer los resultados de la prueba.
  • Técnicas de visualización de los resultados de la electroforesis en gel: para poder interpretar los resultados
  • Técnicas de hibridación con sonda: para marcar el ADN y poder estudiar estas regiones marcadas
  • Técnicas de secuenciación del ADN
  • Técnicas de clonación del ADN.

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