Traducción in vitro: sistemas celulares
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Questions and Answers

¿Cuál es la función de un promotor fuerte en la expresión génica?

  • Incrementar la expresión génica (correct)
  • Regular la expresión génica
  • Reducir la expresión génica
  • Detener la expresión génica

    • ¿Cuál es el problema principal con los promotores constitutivos?

  • No se pueden regular
  • No se pueden clonar
  • Son inestables
  • Gastan mucha energía (correct)

    • ¿Qué es un gen reportero?

  • Un gen que se utiliza para evaluar la actividad de un promotor (correct)
  • Un gen que regula la expresión génica
  • Un gen que evalúa la expresión génica
  • Un gen que inhibe la expresión génica

    • ¿Cuál es la ventaja de utilizar promotores regulables?

    <p>Permiten decidir el momento de expresión génica</p> Signup and view all the answers

    ¿Cuál es el resultado de la sobreexpresión de un gen?

    <p>Un elevado costo energético</p> Signup and view all the answers

    ¿Cuál es la función de la secuencia consenso en un promotor?

    <p>Regular la unión de la RNA polimerasa</p> Signup and view all the answers

    ¿Cuál es la diferencia entre un promotor constitutivo y uno regulable?

    <p>La forma en que se regula la expresión génica</p> Signup and view all the answers

    ¿Cuál es el efecto de la sobreexpresión de un gen en la célula?

    <p>Un freno en el crecimiento de la célula</p> Signup and view all the answers

    ¿Cuál es el propósito de irradiar las células de E. coli con luz UV en la traducción in vitro?

    <p>Degradar el DNAg para que algunas copias del plásmido sobrevivan y expresen los genes clonados</p> Signup and view all the answers

    ¿Qué es necesario para la expresión in vivo de secuencias clonadas?

    <p>Un promotora, un terminadora, un RBS, un codón de inicio y un codón de termino</p> Signup and view all the answers

    ¿Qué es un promotora en la expresión in vivo de secuencias clonadas?

    <p>La región de DNA que interactúa con el aparato transcripcional para iniciar la transcripción</p> Signup and view all the answers

    ¿Qué tipo de células se utilizan para la traducción in vitro de secuencias clonadas?

    <p>Células de E. coli mutantes y transformadas</p> Signup and view all the answers

    ¿Qué es un minicélula en la traducción in vitro?

    <p>Una célula que se divide de forma descontrolada y genera minicélulas sin DNA</p> Signup and view all the answers

    ¿Qué es necesario para la expresión completa de un gen clonado?

    <p>La transcripción y la traducción de DNA con o sin intrones</p> Signup and view all the answers

    Study Notes

    Sistemas Celulares de Traducción In Vitro

    • Maxicélulas: células de E. coli mutantes y transformadas que se irradian con luz UV para degradar su DNA, permitiendo expresar genes clonados.
    • Minicélulas: divisiones alteradas que forman septos de forma descontrolada y generan minicélulas sin DNA, capaces de expresar genes en un medio con un precursor radiactivo.

    Ovocitos de Xenopus leavis

    • Se microinyectan con mRNAs eucariotas que se traducen en el citoplasma.
    • Existen expresiones completas que incluyen transcripción y traducción de DNA con o sin intrones, clonada o no.

    Expresión In Vivo de Secuencias Clonadas

    • Requiere que la secuencia codificante sea provista de señales para su expresión:
      • Promotor
      • Terminadora
      • RBS (Región de Binding Secuencial)
      • Codón de inicio
      • Codón de término

    Promotor

    • Es la región de DNA que interacciona con el aparato transcripcional (RNA pol y factores auxiliares) para iniciar la transcripción de la secuencia contigua.
    • Secuencia -35 y -10 (Caja Pribnow) son importantes para la interacción con el aparato transcripcional.
    • Elementos promotores se encuentran en la región upstream (rio arriba) y downstream (rio abajo).

    Secuencias Consenso

    • Plac
    • Ptrp
    • PlacI
    • PtRNATyr
    • ApI
    • Pt7
    • PlagV5
    • Ptac
    • Ptrc
    • Cada consenso tiene una secuencia específica para la interacción con el aparato transcripcional.

    Tipos de Promotores

    • Promotor constitutivo: de expresión continua, puede deteriorar a la célula por un gasto alto de energía continuo.
    • Promotor regulable: es inducible solo bajo condiciones específicas en ciertas etapas del crecimiento de la célula.
    • Promotor fuerte: tiene gran afinidad por la RNA polimerasa y por lo tanto la secuencia ubicada rio abajo será transcrita con alta frecuencia.

    Identificar un Promotor

    • Utilizar un gen reportero para identificar la actividad del promotor.
    • Clonar la secuencia promotora para estudiar su función.

    Mecanismo de Regulación

    • La sobreexpresión de un gen puede generar un elevado costo energético y frenar el crecimiento de la célula.
    • La toxicidad del producto génico puede ser evitada con el uso de promotores bien regulados.
    • Un promotor fuerte puede generar entre 20 y 40% de la proteína total de la célula.

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    Quiz Team

    Description

    Aprende sobre la traducción in vitro, incluyendo maxicélulas y minicélulas, y su relación con la expresión génica. Entrena tus conocimientos sobre los sistemas celulares y su función en la biotecnología.

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