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Questions and Answers
¿Qué valor de transmitancia corresponde a una absorción total de luz?
¿Cómo se relaciona la absorbancia con la transmitancia según la fórmula A = 2 – log %T?
Según la ley de Lambert-Beer, ¿qué factores influyen en la absorbancia de un analito?
¿Qué representa el espectro de absorción de una sustancia?
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¿Qué se entiende por la linealidad en el contexto de la ley de Beer?
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¿Cómo se relaciona la frecuencia de una onda con su energía?
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¿Cuál de las siguientes interacciones radiación-muestra implica una pérdida de energía?
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¿Qué técnica espectrométrica se utiliza principalmente para comparar la radiación absorbida por soluciones?
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¿Cuál de las siguientes afirmaciones sobre el espectro electromagnético es correcta?
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¿Cuál es la función principal del espectrofotómetro?
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¿Qué sucede durante la emisión en el contexto de la interacción radiación-muestra?
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¿Qué tipo de radiación se utiliza generalmente en las técnicas espectrométricas?
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¿Qué fenómeno describe la caualidad entre la longitud de onda y la energía?
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¿Cuál es el ancho de banda de un prisma de vidrio?
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¿Qué tipo de material se usa para cubetas que trabajan con luz UV?
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¿Cuál es la función principal del detector en un espectrofotómetro?
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¿Cuál de las siguientes afirmaciones sobre el sistema de registro y lectura es correcta?
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¿Qué tipo de espectrofotómetro alterna el paso entre la cubeta del blanco y la de la muestra?
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¿Qué tipo de material no se utiliza para cubrir cubetas que deben operar en la luz visible?
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¿Cuál es la estructura que dirige el haz sobre la cubeta en un espectrofotómetro?
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¿Qué tipo de detector se basa en el efecto fotoeléctrico?
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¿Qué fenómeno se utiliza como base para la refractometría de líquidos?
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¿Qué mide la fotometría de reflectancia?
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¿Cuál de las siguientes partes no forma parte de un espectrofotómetro de reflexión?
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¿Cómo se clasifican los tipos de reflexión en fotometría de reflectancia?
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¿Qué parte de la tira reactiva está en contacto directo con la muestra?
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¿Cuál es el objetivo principal de utilizar tiras reactivas?
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¿Qué indica una variación en la dirección de la luz en la refractometría?
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¿Qué tipo de reactivos se utilizan en la química seca?
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¿Cuál es la función del quemador en la espectrometría de absorción atómica?
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¿Qué características tiene el horno de grafito en la espectrometría de absorción atómica?
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En la espectrometría de emisión atómica, ¿cómo se obtiene la cantidad de un elemento químico en la muestra?
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¿Cuál es la ventaja de la espectrometría de absorción atómica con atomización electrotérmica en comparación con la atomización con llama?
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¿Qué tipo de interferencias pueden afectar las mediciones en espectrometría de absorción atómica?
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¿Qué método se utiliza en la espectrometría de emisión atómica para producir atomización y excitación atómica?
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¿Qué sucede con los elementos químicos tras ser excitados en la espectrometría de emisión?
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¿Cuál de los siguientes no es un método de espectrometría de emisión atómica?
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Study Notes
Radiaciones electromagnéticas
- El espectro electromagnético es el conjunto de radiaciones electromagnéticas que existen en la naturaleza.
- Se organiza en regiones según la longitud de onda.
- Las radiaciones empleadas en las técnicas instrumentales de bioquímica son: la ultravioleta visible, los infrarrojos y los rayos X.
Interacción radiación-muestra
- La transmisión es la radiación que incide sobre una sustancia sin pérdida de energía ni cambio de dirección.
- La absorción es la radiación que incide sobre una sustancia y se produce pérdida de energía.
- En la emisión, las moléculas o átomos excitados liberan energía y vuelven a su estado de reposo.
- La dispersión es la radiación que incide sobre una sustancia y cambia de dirección de propagación pero no de energía.
- En la refracción la radiación incide sobre una solución de diferente naturaleza y cambia de dirección de propagación.
- La reflexión es cuando la radiación incide sobre una sustancia y rebota, produciendo un cambio de dirección.
- La difracción es la radiación que se desvía al pasar por el extremo de una superficie o al atravesar una rendija.
Espectrofotometría
- La espectrofotometría es una técnica que se basa en la interacción de la radiación electromagnética con la materia.
- Un espectrofotómetro es un instrumento que permite comparar la radiación absorbida o transmitida por la solución que contiene una cantidad desconocida de soluto, y una que contiene una cantidad conocida de la misma sustancia.
- El espectrofotómetro utiliza luz incidente que es estable, continua y monocromática.
- Los monocromadores se utilizan para aislar la longitud de onda deseada, como prismas y rendijas de salida.
- Las cubetas son recipientes que se utilizan para contener la muestra. Deben ser transparentes a la longitud de onda de la luz que se utiliza en el análisis.
- El detector es un dispositivo que convierte la luz en una señal eléctrica.
- El sistema de registro y lectura es un sistema que amplifica la señal eléctrica y la transforma en una señal digital.
Espectrofotómetros
- Los espectrofotómetros se clasifican en dos tipos: de haz simple y de doble haz.
- Los espectrofotómetros de haz simple utilizan un solo haz de luz para medir la absorbancia de la muestra.
- Los espectrofotómetros de doble haz utilizan dos haces de luz, uno para medir la absorbancia de la muestra y otro para medir la absorbancia del blanco.
Transmitancia, Absorbancia y Espectro de Absorción
- La transmitancia es la cantidad de luz que pasa a través de una sustancia.
- La absorbancia es la cantidad de luz que es absorbida por una sustancia.
- El espectro de absorción es el conjunto de bandas que indican la cantidad de luz absorbida por una sustancia a diferentes valores de longitud de onda.
Ley de Lambert-Beer
- La ley de Lambert-Beer enuncia que la absorbancia de un analito es directamente proporcional al coeficiente de absorción de la molécula, a la distancia recorrida por el haz de luz en la disolución y a la concentración de dicho analito.
- La linealidad es el intervalo de concentraciones entre las cuales existe una relación lineal entre la concentración y la absorbancia.
- Las desviaciones de la Ley de Lambert-Beer pueden ser causadas por diversos factores, tales como la presencia de interferentes, la no linealidad del sistema o la variación del coeficiente de absorción con la concentración.
Espectrometría de absorción atómica
- La espectrometría de absorción atómica es una técnica que se utiliza para determinar la concentración de ciertos elementos químicos en una muestra.
- Se basa en la absorción de radiación electromagnética por átomos libres de un elemento en la muestra.
- Se utiliza un horno de grafito para atomizar la muestra.
- La espectrometría de absorción atómica con atomización electrotérmica es más sensible que la espectrometría de absorción atómica con llama.
- El horno de grafito utiliza un tubo de grafito sujeto por dos electrodos, con un orificio central por donde se introduce la muestra, un sistema de refrigeración por agua y gas.
Espectrometría de emisión atómica
- La espectrometría de emisión atómica es una técnica que se utiliza para determinar la concentración de ciertos elementos químicos en una muestra.
- Se basa en la emisión de luz por átomos excitados en la muestra.
- La intensidad luminosa producida por los átomos es directamente proporcional al número de átomos excitados, y es proporcional a la concentración del compuesto en la muestra.
- La espectrometría de emisión atómica se puede realizar con llama o por plasma.
- La fotometría de llama utiliza el calor aplicado mediante llama para producir la atomización y la excitación atómica.
Refractometría de líquidos
- Es una técnica de análisis cuantitativo basada en el fenómeno de refracción de la luz.
- La velocidad de propagación de la luz depende del medio de propagación, es decir, de su índice de refracción.
- La ley de Snell relaciona el índice de refracción con el cambio de dirección.
- El índice de refracción es directamente proporcional a la cantidad de sustancias disueltas en una solución.
Fotometría de reflectancia.Química seca
- Utiliza reactivos secos fijados en un soporte.
- La muestra difunde sobre la fase sólida del soporte disolviendo los reactivos, esto produce la reacción.
- La intensidad de la luz reflejada en la superficie tras producirse la reacción se mide con la reflectancia.
- La reflectancia es el cociente entre el flujo de luz reflejada y el flujo de luz incidente.
Instrumentación
- El espectrofotómetro de reflexión utiliza una fuente de luz, selector de longitud de onda, sistema óptico, reactivos de fase sólida, detector, procesador de datos y un sistema de lectura.
- Los reactivos de fase sólida se utilizan en la química seca.
Los reactivos de química seca
- Las tiras reactivas experimentan un cambio de color al entrar en contacto con la muestra.
- Se utilizan en el diagnóstico rápido o las pruebas de autodiagnóstico.
- Las películas multicapa son láminas de múltiples capas.
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Description
Explora el espectro electromagnético y cómo interactúan las radiaciones con diferentes muestras. Este cuestionario abarca conceptos como transmisión, absorción, emisión, dispersión, refracción y reflexión. Comprende la importancia de estas interacciones en las técnicas instrumentales de bioquímica.
