Protein Structure and Denaturation

Al menos 45 minutos

Inclinar el soporte verde para descartar el etanol

Con 100 µL de agua ultrapura (o 50 µL en cada extremo) y luego con un kimwipe

<p>30% (2.67%)</p> Signup and view all the answers

<p>30 minutos</p> Signup and view all the answers

<p>Lentamente con una micropipeta, evitando que se formen burbujas</p> Signup and view all the answers

<p>Insertarla lentamente en el stacking gel</p> Signup and view all the answers

<p>Abrir las ventanillas y remover los cristales del casting frame</p> Signup and view all the answers

<p>Con el cristal más corto hacia adentro, verificando que ambos lados del soporte del electrodo tengan los cristales bien colocados</p> Signup and view all the answers

<p>Debemos trabajar con gafas y guantes.</p> Signup and view all the answers

<p>Los cristales deben limpiarse primero con agua y jabón, luego con agua desionizada, y finalmente con etanol y un kimwipe.</p> Signup and view all the answers

<p>El separador de 0.75mm se utiliza para colocar el cristal más corto sobre el cristal largo.</p> Signup and view all the answers

<p>Los cristales deben colocarse en el soporte verde con el cristal más corto hacia el frente y verificando que ambos cristales estén nivelados.</p> Signup and view all the answers

<p>La goma gris se coloca en el soporte transparente.</p> Signup and view all the answers

<p>La parte superior de los cristales se ajusta con la palanca con resorte.</p> Signup and view all the answers

<p>La peinilla se utiliza para formar las fosas en el gel.</p> Signup and view all the answers

<p>Se debe trazar la línea a una distancia de 0.5 mm por debajo del borde de la peinilla.</p> Signup and view all the answers

<p>La porción no polimerizada que reste se debe mezclar con agente calítico.</p> Signup and view all the answers

<p>Desnaturalizar las proteínas.</p> Signup and view all the answers

<p>Rompe los puentes disulfuro y altera la estructura terciaria de la proteína.</p> Signup and view all the answers

<p>1844 µg/mL.</p> Signup and view all the answers

<p>El calor ayuda a romper los puentes de hidrógeno y a inactivar proteasas que puedan estar presentes.</p> Signup and view all the answers

<p>0.5 µL.</p> Signup and view all the answers

<p>1:20.</p> Signup and view all the answers

<p>Todas las proteínas tienen carga negativa y conformación lineal.</p> Signup and view all the answers

<p>Se utiliza para separar las proteínas por peso molecular.</p> Signup and view all the answers

<p>100 µL.</p> Signup and view all the answers

<p>Confirmar la presencia de las proteínas totales en la gel de poliacrilamida.</p> Signup and view all the answers

<p>Para evitar la evaporación de la muestra.</p> Signup and view all the answers

<p>Preparar las muestras de proteínas para la electroforesis.</p> Signup and view all the answers

<p>95 µL.</p> Signup and view all the answers

<p>Un buffer que se utiliza para la electroforesis en gel de poliacrilamida.</p> Signup and view all the answers

<p>Agua ultrapura, muestra y Laemmli buffer (sample buffer) 5X.</p> Signup and view all the answers

<p>95°C.</p> Signup and view all the answers

<p>Servir de referencia para la separación de proteínas por peso molecular.</p> Signup and view all the answers

<p>La acrilamida es neurotóxica.</p> Signup and view all the answers

<p>20 µl</p> Signup and view all the answers

<p>No se puede determinar con certeza, pero se espera encontrarla entre las proteínas de 37 kDa y 45 kDa</p> Signup and view all the answers

<p>15.5 µl</p> Signup and view all the answers

<p>66 kDa</p> Signup and view all the answers

<p>5 µl</p> Signup and view all the answers

<p>30 segundos a 4,000 rpm</p> Signup and view all the answers

<p>90 voltios</p> Signup and view all the answers

<p>Permitir que las muestras se acomoden en la fosa y se introduzcan al gel de poliacrilamida lentamente</p> Signup and view all the answers

<p>10 µl</p> Signup and view all the answers